刺芹侧耳液体菌种栽培基质筛选*

秦智亨，张智文，刘乃旭，李长田,2**

(1.吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118；2.吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心，吉林 长春 130118)

〈栽培技术〉

刺芹侧耳液体菌种栽培基质筛选*

秦智亨1，张智文1，刘乃旭1，李长田1,2**

(1.吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118；2.吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心，吉林 长春 130118)

将刺芹侧耳液体菌种接入玉米粉、米糠、麦麸，单独或与不同比例组合混合添加以木屑为主的培养基中，发现不同组合与刺芹侧耳生长周期时间、生物学效率和子实体质量有着密切联系。米糠10%、玉米粉20%组合和麦麸10%、玉米粉20%组合的生长周期较短，生物转化率较高。而仅添加米糠30%的组合和米糠20%、玉米粉10%组合出菇质量最优质，综合考虑产量，生产周期与子实体质量麦麸10%、米糠10%和玉米粉10%组合是最适宜侧耳液体菌种的基质配方。

刺芹侧耳；液体菌种；人工栽培

刺芹侧耳(Pleurotuseryngii)是近年来成功开发栽培的集食用、药用、食疗于一体的珍稀食用菌新品种[1]。随着市场对刺芹侧耳产品需求的增长，其生产方式也由传统的家庭作坊式操作、季节性生产的模式，逐渐向设施化、工厂化、周年化、规模化生产转变[2]。生产方式的变革带动了新技术、新工艺、新设备的开发，采用制备的刺芹侧耳菌种栽培子实体成为研发热点和发展趋势。

为了满足刺芹侧耳快速生产的需求，本文研究重点集中在刺芹侧耳液体菌种的高效培基质配方筛选方面，以提高产量和质量，并缩短生产周期，在这项研究中，通过添加不同比例的基质，来研究确定不同基质对刺芹侧耳生产周期、生物转化率和品质的影响，确定最佳栽培基质组合[3]。

1 材料及方法

1.1 供试材料

1.1.1 菌株

刺芹侧耳(Pleurotuseryngii)，由本实验室提供，菌种编号L3074。

1.1.2 培养基

固体培养基：马铃薯200 g、琼脂18 g、葡萄糖20 g、蛋白胨10 g，水 1 000 mL，pH自然[3]。

液体种子培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨10 g、KH2PO40.1%、MgSO4·7H2O 0.05%，水 1 000 mL，pH自然。

液体发酵培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨10 g、KH2PO40.1%、MgSO4·7H2O 0.05%，水 1 000 mL，pH自然。

栽培料：不同比例的杂木屑、CaSO4、玉米粉、米糠、麦麸。

1.1.3 主要仪器与设备

超净工作台SW-CJ-IBU，苏净集团安泰空气技术有限公司；移液枪，上海大龙医疗设备有限公司；水浴恒温振荡器THA-82A，江苏金坛金城国盛实验仪器厂；电子天平BS210S，北京赛多利斯天平有限公司；立式压力蒸汽灭菌器LDZX-30FA，上海申安医疗器械厂；霉菌培养箱MJ-250BSH-Ⅱ，上海新苗医疗器械制造有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 刺芹侧耳液体种子的制备

将25℃恒温培养8 d，10 cm2的固体菌种，接种于装有50 mL种子液体培养基的三角瓶中，125 r·min-1、25℃条件下培养6 d制备种子液，作为下一步摇瓶发酵种子。

1.2.2 刺芹侧耳液体菌种制备

将制备好刺芹侧耳液体种子培养基按1∶5比例，接入液体发酵培养基，130 r·min-1、25℃条件下培养5 d。

1.2.3 液体菌种栽培基质设计

以杂木屑为基础基质，其他营养添加剂包括麦麸、米糠和玉米粉，这些基质以不同比例组合进行测试，其中基础基质木屑占69.8%、石膏占0.2%，其他基质的比例为30%，基质含水量为60%，每袋干料为200 g。所有原料经过混合、搅拌、装袋，高压蒸汽灭菌。然后进行含水量测定，每处理设置10个重复，具体的培养料基质组合见表1。

表1 不同培养料组合分组

1.2.4 液体菌种栽培试验

栽培料灭菌后在无菌条件下，待冷却至常温，将培养5 d的液体菌种接种进各组培养基，每组10袋，每袋接种培养液25 mL。

管理措施：发菌期温度保持在(22±1)℃，空气相对湿度(RH)控制在70%，CO2浓度控制在 2 500 ppm以下。在长满菌袋1周后移进出菇房，打开菌袋，温度控制在(15±1)℃，RH增至95%，CO2浓度控制在 1 000 ppm，待袋口有白点状原基形成，7 d后进行舒蕾，每袋选留1个菇蕾，待菇蕾长至4 cm，RH调至95%，CO2升至 3 500 ppm，子实体8分成熟，孢子未弹射之前采收[5]。

每个分组均在吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心菇房的同等实验条件下完成。

1.2.5 生物转化率测定与质量评价

当子实体基部隆起、菌盖基本平展、边缘稍有内卷时，刺芹侧耳即可采收，收集与培养料接触的菌柄部分称重。生物转化率(BE)公式为：

BE=m1m2×100%

式中：m1为子实体鲜重；m2为培养料干重。

质量评价基于刘魁[6]的描述与主观判断，以形状、颜色与气味来标准评估子实体的质量，见表2。

在控制工程中，几乎所有的控制系统都是高阶系统。而对于高阶系统的响应波形和性能指标求取涉及大量的数值计算和图形绘制。在传统的教学模式中，主要使用闭环主导极点对高阶系统进行降阶，再进行近似分析。但是高阶系统毕竟不是一、二阶系统，因而在使用低阶系统性能进行估算时，还要考虑其它闭环零、极点对系统动态性能的影响。因此，直接应用MATLAB软件对高阶系统进行分析有利于学生快速掌握分析高阶系统的性能。

表2 评价质量各种营养基质添加物与木屑基质组合水平对刺芹侧耳质量的影响

2 结果与分析

2.1 不同基质组合对刺芹侧耳的发菌时间的影响

不同基质组合对刺芹侧耳的发菌时间的影响见表3。

表3 不同基质组合对刺芹侧耳生产周期、生物转化率和质量影响

注：同水平因子差异不显著；质量等级以表2标准评价标准；不同字母表示差异显著，p< 0.05。

如表3所示，液体菌种L3074在不同比例基质与木屑混合组合的条件下栽培，刺芹侧耳都能正常发菌，但发菌时间最短的A组、B组、G组与发菌时间最长的J组、H组之间存在显著差异，发菌周期最短25 d，A组、B组、G组，当玉米粉在组合中占20%或30%的比例时发菌时间最短，而当麦麸在组合中占20%或30%的比例时发菌时间最长，H组发菌时间 30 d，J组发菌时间 33 d。

2.2 不同基质组合对刺芹侧耳原基形成的影响

从表3可以看出，液体菌种L3074在不同组分的培养料内均能形成原基，且前期发菌时间较短的A组、B组、G组均比前期发菌时间较长的H组、J组形成原基时间长，虽然各组形成时间有差异，但差异不显著。

2.3 不同基质组合对刺芹侧耳子实体形成的影响

从表3可以看出，液体菌种L3074在不同组分的培养料内均形成子实体，虽然各组形成时间有差异，但差异并不显著。

2.4 不同基质组合对刺芹侧耳子实体生物转化率与质量的影响

从表3可以看出，在10组处理中，BE从48%(J组)到70%(B组)；质量等级介于2.2(J组)与1.1(E组)之间，仅麦麸30%的J组生物转化率最低，且质量等级最差。

3 讨论

实验结果表明，不同基质组合对刺芹侧耳的生长周期、产量和质量有显著影响[7]。例如，从缩短发菌时间来看，高比例的玉米粉，能有效缩短发菌时间，但出菇品质不高。从出菇质量来看，提高米糠的比例，能较好地提高出菇品质，但生长周期较长。

营养均衡的培养料能生产出质量优、产量高的食用菌[8]。不同配方组合比较发现，在生产周期、产量与质量综合比较中，麦麸、米糠、玉米粉组合优于其他只有1种或2种基质组合，仅有麦麸的配方，生长周期、生物转化率与质量均较差。

由于刺芹侧耳液体栽培的历史较短, 目前针对不同的基质类型、层次如何影响作物周期、产量、质量的研究非常有限，而本研究结果清楚地表明，不同基质类型和组合对刺芹侧耳生长周期、产量和质量能有显著影响。

[1]邹莉，李绍鹏，袁玲. 杏鲍菇最佳培养基的筛选[J]. 菌物研究，2006，4(1)：38-41.

[2]孙强，郑茜，王玉磊，等. 杏鲍菇工厂化高产栽培技术研究[J]. 农业与技术，2006，26(6)：142-143.

[3]Shu-ting Chang, John A. Buswell, Siu-wai Chiu.Mushroom biology and mushroom products [M].Hongkong：The Chinese University Press，1997.

[4] 谢春芹，韩荣梅，冯大俊，等. 杏鲍菇母种最适固化培养基的筛选[J]. 江苏农业科学，2011，39(5)：342-344.

[5] 唐玉琴，李长田，赵义涛. 菇菌生产技术[M]. 北京：化学工业出版社，2008.

[6] 刘魁. 北方食用菌生产技术规程与产品质量标准 [M]. 北京：中国农业大学出版社，2006.

[7] Fanadzo M, Zireva DT, Dube E. Evaluation of various substrates and supplements for biological efficiency ofPleurotussajor-cajuandPleurotusostreatus[J]. African Journal of Biotechnology, 2010, 9 (19): 2756-2761.

[8] Royse, D.J. Effect of spawn run time and substrate nutrition on yield and size of the shiitake mushroom[J]. Mycologia, 1985(77): 756-762.

The Selection on Liquid Spawn Culture Substrate ofPleurotuseryngii

QIN Zhi-heng1, ZHANG Zhi-wen1, LIU Nai-xu1, LI Chang-tian1,2

(1.College of Chinese Medicine Materials, Jilin Agricultural University, Changchun Jilin 130118;2.Engineering Research Center of Chinese Ministry of Education for Edible and Medicinal Fungi, Jilin Agricultural University, Changchun Jilin 130118)

The substrate corn meal, rice bran and wheat bran used alone or in various combinations with mixed sawdust significantly influenced crop cycle time, biological efficiency and basidiome quality ofPleurotuseryngiiliquid spawn. The combination of rice bran 10%, corn meal 20% and the combination of wheat bran 10% plus corn meal 20% achieved the shortest crop cycle time and the highest biological efficiency. While the best quality mushrooms was obtained with rice bran 20% and corn meal 10% and 30% rice bran only. Considering the desirable characteristics of yield, short crop cycle time and best basidiome quality, an equal mixture of wheat bran 10%, rice bran 10% and corn meal 10% proved the best formulas for the liquid spawn culture substrate ofPleurotuseryngii.

Pleurotuseryngii; Liquid spawn; Artificial cultivation

*项目来源：吉林省科技发展计划项目“地衣型真菌发酵产物抗老年痴呆活性物质开发研究”(No.21200253)。

秦智亨(1986-)，男，在读硕士研究生，主要从事菌物生态学方面研究。

**通信作者： 李长田，副教授，E-mail: changtianli@126.com

2014-03-18

S646.1

A

1003-8310(2014)03-0016-03