苦参炭薄层色谱鉴别研究

范张姣 景晓琦 蔡翠芳

苦参炭薄层色谱鉴别研究

范张姣 景晓琦 蔡翠芳

目的研究苦参炭的薄层色谱鉴别。方法选用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)为展开剂, 浓氨水饱和, 碘化铋钾试液为显色剂, 以苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱为对照品进行薄层鉴别。结果选用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)为展开剂, 碘化铋钾试液为显色剂进行薄层鉴别, 色谱斑点清晰, 能有效提供鉴别特征。结论方法可行, 为建立完整、科学的苦参炭质量标准提供了参考依据。

苦参炭；薄层色谱；展开剂

苦参为豆科植物苦参(Sophora flavescens Ait.)的干燥根［1］。始载于《神农本草经》, 列为中品, 在《雷公炮炙论》即有关于其炮制的记载, “凡使苦参, 先用糯米浓泔汁浸一宿, 其腥秽气并浮在水面上, 须重重淘过, 即蒸, 从巳至申”等。历代医药文献中, 有关苦参炮制品的记述不多, 计有生苦参、炒苦参、麸炒苦参、煨苦参、苦参炭、醋苦参、酒苦参、米泔制苦参等, 现今常用的为生苦参［2］。苦参炭是现代发展的炮制品, 在《全国中药炮制规范》和《山西省中药炮制规范》均载有苦参炭的炮制方法和成品性状［3,4］。《中华人民共和国药典》2010版中对苦参质量标准的记载以苦参碱、氧化苦参碱作为指标, 未收录苦参炭。本实验旨在研究苦参炭的薄层色谱鉴别方法, 为建立完整、科学的苦参炭质量标准提供参考依据。

1 仪器与材料

1.1仪器 KQ-500B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；HH-2型数显恒温水浴锅(金坛市科析仪器有限公司)；QE-100二两装高速中药粉碎机(武汉市屹立工具有限公司)；92SM-202A-DPR-SCS型电子分析天平；薄层层析硅胶G(青岛海洋化工厂)；薄层层析硅胶G(青岛基亿达硅胶试剂厂)。

1.2药材 苦参饮片10批分别购自山西省相关医药公司、河北安国药市、安徽省亳州药市, 经山西药科职业学院中药系裴慧荣副教授鉴定所购药材为豆科植物苦参(Sophora flavescens Ait.)的干燥根；苦参炭饮片由本实验室按苦参炭炮制方法炮制所得。

1.3试剂 苦参碱(中国食品药品检定所；110805-200508)；氧化苦参碱(中国食品药品检定所；110780-201007)；槐定碱(中国食品药品检定所；110784-200804)；其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1供试品制备 取苦参炭粉末0.5 g, 加浓氨试液0.3 ml、三氯甲烷25 ml, 放置过夜, 滤过, 滤液蒸干, 残渣加三氯甲烷0.5 ml使溶解, 作为供试品溶液。

2.2对照品液制备 取苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱对照品各10 mg, 分别加乙醇5 ml使溶解, 制成每1 ml含2 mg的溶液, 作为对照品溶液。

2.3展开剂和显色剂选择 照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验, 吸取上述供试品和对照品两种溶液各4 μl (对照品浓度为1 ml含0.2 mg), 分别点于喷以2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上(青岛海洋化工厂)。采用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)为展开剂, 展距8 cm, 取出, 晾干, 再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4:2:1)10℃以下放置的上层溶液为展开剂, 展开, 取出,展距8 cm展开, 喷以碘化铋钾试液所得斑点清晰、分离度较差, 对照品斑点不明显。再喷亚硝酸钠乙醇试液, 斑点立刻消失。

采用三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5:0.6:0.3)10℃以下放置的下层溶液为展开剂(《中华人民共和国药典》2010年版一部苦参薄层色谱法)展开, 喷以碘化铋钾试液所得斑点清晰、分离度较差, 对照品斑点不明显。再喷亚硝酸钠乙醇试液,斑点立刻消失。

针对以上问题, 一是将对照品与供试品点样量均改为5 μl；二是调整展开剂, 选用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)为展开剂展开, 浓氨水饱和；三是仅喷碘化铋钾试液。同样选用青岛海洋化工厂分厂生产的薄层板进行试验, 所得斑点清晰、分离度好, 3种生物碱可在同一块薄层板上检识。

图1

图2

图3

2.4耐用性试验 采用喷以2%氢氧化钠溶液制备的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板(青岛基亿达硅胶试剂厂),作为固定相, 选用每1 ml含2 mg的对照品溶液, 点样量为5 μl, 供试品点样量为5 μl；用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)为展开剂展开, 浓氨水饱和, 喷碘化铋钾试液显色。所得斑点清晰、分离度好。结果见图3。结果所得斑点均显色清晰且分离度好。

3 讨论

根据药典中记录的苦参薄层色谱鉴别方法, 所得斑点不明显, 分离不佳。可能有如下原因：一是样品和对照品浓度偏低, 点样量小；二是展开剂展开效果不理想, 且检识方法繁琐, 三种生物碱不能在同一块薄层板上检识；三是喷亚硝酸钠乙醇试液后, 斑点消失达不到展开效果。经对比, 最终选择甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)为展开剂, 浓氨水饱和, 碘化铋钾试液为显色剂, 得到的斑点清晰, 分离度佳。

炭药炮制强调“炒炭存性”, “太过”或“不及”均会影响有效成分的含量及药效发挥。有学者对苦参饮片的最佳炮制工艺进行了研究［5］, 但对于苦参炭的炮制工艺鲜有研究。本实验所用苦参炭饮片为教师根据药典要求及个人经验炮制所得, 为规范苦参炭炮制工艺, 指导饮片企业进行生产, 需进一步进行相关实验研究。

参考资料

［1］ 药典委员会.中华人民共和国药典一部.北京：医药科技出版社, 2010:122.

［2］ 杨巨奎, 顾茂书, 杨兆兵。中药炮制技术汇编.太原:山西科学技术出版社, 1997:78-79.

［3］ 中华人民共和国卫生部药政管理局.全国中药炮制规范.北京：人民卫生出版社, 1988(9):66-67.

［4］ 山西省卫生厅.山西中药炮制规范, 1984:70.

［5］ 邓捷圆, 胡馨, 张英华, 等.正交设计法优选苦参炮制工艺的研究.中成药, 2011(07):1206-1208.

Identification research on sophora carbon TLC

FAN Zhang-jiao, JING Xiao-qi, CAI Cui-fang.
Shanxi Pharmaceutical Vocational College, Taiyuan 030031, China

ObjectiveTo study identification of sophora carbon TLC.MethodsSelecting toluenepain-methanol (8:3:1.5) as developing agent,using saturation strong aqua,taking bismuth potassium iodide solution as the chromogenic agent, and setting matrine, huaialkali,bitter and alkali oxide TLC identification for reference substance.ResultsSelects the toluene - acetone - methanol (8:3:1.5) as developing solvent, Bismuth potassium iodide solution for TLC identification as the chromogenic agent,the chromatographic spots were clear, and can effectively provide identification features.ConclusionThe method is feasible, and can be a reference to establish a complete, scientific sophora charcoal for quality standards.

Sophora carbon; TLC identification; Developing solvent

030031 太原, 山西药科职业学院