五麦党黄口服液对辐射损伤小鼠脏器中自由基清除能力的影响

徐春红 ，李 鹏 ，卢海波 ，谢 梅 ，杨晓燕

（1．中国人民解放军第452医院，四川 成都 610021； 2．中国人民解放军78491部队，四川 成都 610017)

电离辐射作用于机体会产生大量自由基，这些自由基成为传递辐射能的主要媒介，从而引发一系列的放射生物效应。为了对抗电离辐射所引起的自由基损伤，多年来，中医中药以其低毒、易得成为抗辐射损伤研究的热点。五麦党黄口服液（WMDH）原为中医专家呼永和根据临床经验拟订的中药方剂，由五味子、麦冬、党参、黄芪、陈皮、青皮、白术、苍术、当归组方，具有益气养阴、运脾健胃之功效，用于部队官兵大运动量训练后抗疲劳、恢复体能，提高机体在疲劳及高原缺氧环境的生存能力[1]。笔者拟观察受照小鼠服用WMDH后其主要脏器中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、抑制羟自由基能力的变化，研究WMDH对辐射所致小鼠各脏器中自由基的清除作用，探讨其抗辐射作用，为其临床防辐射应用提供依据。

1 材料与方法

1．1 药物与试剂

WMDH（由中国人民解放军第452医院制剂室提供，批号为20110701，规格为每支10 mL），临用前按照各组给药剂量浓缩至相应浓度。SOD测试盒（测总SOD）、MDA测试盒、羟自由基（·OH-）测试盒，均购自南京建成生物工程研究所。

1．2 试验动物及处理

KM小鼠，体重 18～22 g，雌雄各半，6～8周龄，四川大学实验动物中心提供，许可证号为SCXK(川)2009-09，试验动物饲养适应环境3 d后进行试验，饲养环境温度为（20±2）℃，自由进食、饮水。随机分成正常对照组，辐照模型组，WMDH低、中、高剂量组(7．3，14．6，29．2 g ／kg，相当于 60 kg 成人日用药量的 2．5，5，10倍)，共 5组，各 10只。辐照模型组和 WMDH低、中、高剂量组均接受1次全身γ射线辐射，总剂量为3 Gy。WMDH各剂量组于照射后即以相应浓度的WMDH液灌胃给药，连续7 d，每天1次；正常对照组与辐照模型组同法给予等容积的蒸馏水。各组均正常喂饲。

1．3 组织样本制备

于试验第8天颈动脉放血处死动物，取肝脏、脾脏、肾脏及肺。准确称取组织湿重，加0．9%氯化钠注射液制成1→10的组织匀浆，以2 500 r／min的速率离心10 min，取上清液再用0．9%氯化钠注射液稀释成不同浓度的组织匀浆待测。

1．4 观察指标

制备好的组织匀浆稀释成不同浓度，分别按试剂盒说明书测定肝、脾、肾及肺组织中SOD活力、MDA含量、抑制·OH-能力。

1．5 统计学处理

采用 SPSS 17．0统计软件，组间比较采用 t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表1和表2。

表1 WMDH对60Co 射线照射小鼠主要脏器SOD和MDA的影响(±s，n＝10)

表1 WMDH对60Co 射线照射小鼠主要脏器SOD和MDA的影响(±s，n＝10)

注：与正常对照组比较， P ＜0．05， P ＜0．01；与辐照模型组比较， P ＜0．05， P ＜0．01。下表同。

组别 剂量（g ／kg）正常对照组辐照模型组WMDH低剂量组中剂量组高剂量组--7．3 14．6 29．2 SOD活力(U／mgport) MDA含量( mol／gport)肝脾肾肺肝脾肾肺262．26 ± 49．58 226．47 ± 29．49 235．84 ± 24．18 243．48 ± 42．52 244．10 ± 19．93 41．87 ± 11．54 34．66 ± 10．58 37．45 ± 6．33 40．89 ± 7．51 39．69 ± 7．18 175．26 ± 29．12 149．89 ± 26．78 153．45 ± 19．87 174．71 ± 29．45 186．63 ± 35．48 149．19 ± 21．44 114．58 ± 23．41 120．47 ± 22．55 139．29 ± 34．89 156．47 ± 36．63 2．65 ± 0．44 3．06 ± 0．67 2．86 ± 0．45 2．70 ± 0．52 2．71 ± 0．62 1．48 ± 0．26 1．72 ± 0．22 1．51 ± 0．17 1．52 ± 0．35 1．45 ± 0．39 2．93 ± 0．59 3．29 ± 0．72 3．04 ± 0．64 2．69 ± 0．57 2．57 ± 0．29 1．86 ± 0．31 2．45 ± 0．33 2．14 ± 0．40 1．72 ± 0．22 1．74 ± 0．20

表2 WMDH对60Co 射线照射小鼠主要脏器抑制羟自由基的影响(±s，n＝10)

表2 WMDH对60Co 射线照射小鼠主要脏器抑制羟自由基的影响(±s，n＝10)

组别 抑制羟自由基能力(U／mgport)剂量（g ／kg）肝脾肾肺正常对照组辐照模型组WMDH低剂量组中剂量组高剂量组- -7．3 14．6 29．2 536．42 ±92．45 378．87 ±102．64 426．65 ± 110．79 442．10 ± 82．49 476．31 ±93．02 124．96 ±29．56 89．41 ±17．95 92．15 ± 23．45 118．63 ± 20．45 129．65 ±31．25 236．12 ±42．12 167．16 ±33．44 172．64 ±45．77 184．32 ±26．71 198．51 ±32．52 259．11 ±52．45 175．78 ±41．26 215．98 ± 46．99 247．57 ± 55．68 239．35 ±54．59

3 讨论

自由基是人体生命活动中各种生化反应的中间代谢产物，具有高度的化学活性，参与细胞分裂、分化等重要生理功能。但过多的自由基也作用于细胞膜上的脂质，使其过氧化，从而破坏细胞膜的双分子层结构，还会导致DNA的碱基和脱氧核糖发生化学变化，引起碱基改变、破坏或脱落，脱氧核糖分解，磷酸二脂键断裂，以及DNA核苷酸链的单链和双链断裂等；自由基对蛋白质也会产生多种损伤，可引起蛋白质分子发生交联、聚合、肽链断裂。此外，自由基还可引起细胞致死性突变及细胞癌变等生物学效应[2]。

自由基和活性氧是电离辐射对生物系统作用的重要产物，在辐射效应的发生机制中起重要作用，正常组织受到高剂量辐射后，自由基生成增加，清除能力下降，通过直接或间接作用对机体造成损害。自由基作用于生物膜引起膜的脂质过氧化，产生MDA，造成生物膜功能和代谢的改变；SOD是机体主要清除自由基的抗氧化酶，其活力的高低可反映机体清除自由基的能力。因此，选取小鼠主要脏器的SOD活力、MDA含量、抑制·OH-能力为观察指标。

中医认为，辐射伤病机上属于的热邪侵犯机体致使阴伤和气血不足所致病症，为邪热伤阴、气血两虚以及脾胃不和、肝肾亏损等原因所致[3-4]，治疗原则以清热生津、补益气血为主。方中党参可补中益气、生津养血，为主药；又因党参补气力之不足，故益之以黄芪。麦冬润肺养阴，益胃生津，清心除烦；五味子敛肺滋肾，生津止汗，宁心安神，以佐参、芪温补之偏，组方在黄芪生脉饮基础方补中益气、养阴生津的同时，以白术、大枣等益气健脾为主，辅以青、陈皮、泽泻燥湿除逆，帮助参、术健脾，生姜温中下气，当归行血和营，建曲导滞化积，甘草调和诸药。全方旨在益气养阴、运脾健胃，提高机体免疫能力，对抗辐射损伤[5]。

本研究结果表明，WMDH对提高受照小鼠脏器组织的SOD活性、抑制·OH-能力，降低受损脏器 MDA含量均有一定作用，对肝、脾、肺组织影响尤为显著，其量效关系需进一步研究探明。

[1]李 鹏，胡 露，张 勇，等．五麦党黄汤对小鼠抗疲劳、耐缺氧和抗寒热能力的影响[J]．西南国防医药，2012，22（1）：16-18．

[2]王崇道，强亦忠．电离辐射所致自由基对机体的损伤与自由基清除剂的研究[J]．中华放射医学与防护杂志，2002，22(6)：461-463．

[3]沈世林，张汝学，贾正平．具有抗辐射损伤作用的中药复方研究进展概述[J]．中国实验方剂学杂志，2007，13（11）：64-66．

[4]黄黎明，石 鹏，张琳静，等．抗辐射复方中药对辐射损伤小鼠的防护作用研究[J]．中国药事，2011，25（2）：132-134．

[5]徐春红，李 鹏，谢 梅，等．五麦党黄口服液对辐射损伤小鼠防护作用的初步研究[J]．中国药业，2013，22（15）：17-18．