硫化氢后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

李鲲鹏　朱磊　马捷

[摘要] 目的 用外源性硫化氢后处理大鼠肺缺血再灌注损伤模型，检测其对肺缺血再灌注损伤的影响。 方法 将24只健康SD大鼠，随机分成3组，每组8只，分别为：假手术（Sham）组、肺缺血再灌注（I/R）组及I/R+硫氢化钠（NaHS）干预组。在每组实验结束后取大鼠肺组织，观察肺组织病理学的变化，检测大鼠肺湿/干重（W/D）比值，肺组织丙二醛（MDA）含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性的测定，提取支气管肺泡灌洗液（BALF）检测BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比及肺通透性指数。结果 I/R组肺组织W/D值、MDA水平与Sham组比较显著升高（P<0.05），而I/R+硫氢化钠（NaHS）干预组明显低于I/R组（P<0.05）；I/R组肺组织SOD活性与Sham组比较显著降低（P<0.05）， I/R+硫氢化钠（NaHS）干预组明显高于I/R组（P<0.05）。肺组织病理结果表明，I/R+硫氢化钠（NaHS）干预组与I/R组比较损伤减轻，肺泡腔内炎性细胞减少。 结论 硫化氢后处理通过减轻肺水肿、降低氧自由基水平有关，对肺缺血再灌注损伤具有保护作用。

[关键词] 再灌注损伤；硫化氢；氧自由基；肺水肿

[中图分类号] R363 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）13-0010-03

肺缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion，I/R）损伤往往出现于临床肺移植、体外循环心脏手术、机体大出血等情况下，造成肺缺血，恢复灌注后，缺血所导致的损伤并没有减轻，甚至更加严重[1]。如何降低肺缺血/再灌注损伤的危害，改善患者的预后，是如今尚需解决的重要问题[2]。硫化氢（hydrogensulfide，H2S）具有类似NO和CO的某些生物学特性，在NO和CO之后被认为是第3类内源性气体分子[3]。经研究证实，其对多种脏器以及组织的缺血再灌注损伤有保护作用。在此研究中，通过建立大鼠在体肺缺血/再灌注模型， 以硫氢化钠作为预处理药物，研究硫化氢（H2S）后处理对肺缺血再灌注损伤的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康SD大鼠24只（山西医科大学动物实验中心提供），体重220～280 g，雌雄不拘。

1.2 动物模型复制

实验大鼠通过腹腔注射5%水合氯醛（0.7 mL/100 g），麻醉后取仰卧位固定于手术台上。颈部正中切口，予气管切开插管，动物呼吸机行机械通气[吸入室内空气，呼吸频率（50～60）次/min]。沿胸骨左缘切断第3～5肋骨，打开胸腔，游离左侧肺门，切断左侧肺下韧带。按Sekido[4]法复制在体大鼠肺缺血-再灌注模型，结扎阻断左侧肺门血管及支气管，左肺血供及通气终止30 min后，开放左肺门予再灌注120 min。

1.3 实验分组

24只大鼠随机分成以下3组，假手术组（Sham）、肺缺血再灌注组（I/R）及I/R+硫氢化钠（NaHS）干预组，每组8只。I/R+硫氢化钠（NaHS）干预组实验前5 d始每天腹腔注射NaHS（NaHS 20 μmol/kg，溶入0.3 mL生理盐水），于实验前15 min再次给药；Sham组和I/R组实验前5 d，每天经腹腔注射0.3 mL生理盐水；实验15 min再次注射。

1.4观察指标及检测方法

1.4.1 肺组织湿/干重（W/D）值测定 大鼠处死后立即留取左肺部分肺组织测量湿重（W）并记录，然后放入60℃恒温烘箱烘干至恒重，48 h后测量干重（D），从而算得肺组织湿/干（W/D）值，W/D值可反映肺组织水肿情况。

1.4.2 肺组织匀浆中MDA含量、SOD活性的测定 左肺取部分肺组织冻存，实验结束后，按试剂盒的要求将肺组织制成匀浆， 3500 r/min离心10 min，取上清液，用分光光度计测反应后的吸光度值，计算出MDA含量及SOD活性，严格按照试剂盒说明操作。

1.4.3支气管肺泡灌洗液（BALF）中肺通透性指数、白细胞（WBC）计数、中性粒细胞（PMN）百分比及肺通透性指数（LPI）的测定 取左肺上叶，经气管用5 mL生理盐水行左肺灌洗，收集支气管肺泡灌洗液，以3000 r/min高速离心15 min取上清液，双缩脲法测BALF及血清中蛋白含量，BALF中蛋白含量与血清蛋白含量之比为肺通透性指数。将BALF离心沉渣涂片，瑞氏染色，光镜下行白细胞及PMN计数，求得PMN百分比。

1.4.4 病理学检查 留取左肺部分肺组织行病理学分析，用10%甲醛固定肺组织标本，然后常规石蜡包埋，切片，HE染色，观察光镜下病理学改变。

1.5 统计学处理

所有结果均采用SPSS 16.0统计学软件进行处理，实验结果以均数±标准差（x±s）表示，实验数结果组间比较行方差分析和t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺组织W/D值

Sham组肺组织基本无水肿，而I/R组肺组织严重水肿，I/R组与Sham组比较W/D值明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组W/D值虽比Sham组有所升高（P<0.05），但与I/R组对比，W/D值明显下降，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。

表1 各组大鼠肺组织W /D值比较（x±s）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.2 肺组织血浆丙二醛（MDA）含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性

与Sham组比较，I/R组肺组织匀浆中MDA含量明显增多，差异有统计学意义（P<0.01）， I/R+ NaHS组MDA含量虽比Sham组有所升高（P<0.05），但与I/R组对比，肺组织匀浆中MDA含量明显减少，差异有统计学意义（P<0.01）；与Sham组比较，I/R组肺组织匀浆中SOD活性明显下降，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组SOD活性虽比Sham组有所降低（P<0.05），但显著高于I/R组，差异有统计学意义（P<0.01）。见表2。

表2 各组血浆MDA含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性（x±s）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.3 肺通透性指数（LPI）和BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比

与Sham组比较，I/R组BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比虽比Sham组有所升高（P<0.05），但与I/R组对比BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比明显降低， 差异有统计学意义（P均<0.01）；与Sham组比较，I/R组肺通透指数明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组肺通透指数虽比Sham组有所升高（P<0.05）但与I/R组对比，肺通透指数明显降低，差异有统计学意义（P<0.01）。见表3。

表3 各组肺通透性指数及BALF中WBC计数、PMN百分比（x±s，n=8）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.4 肺组织病理结果

Sham组肺泡腔完整性好，肺泡间隔均匀无增厚，肺泡壁光滑，无渗出物及炎细胞浸润（封三图1）；I/R组出现明显的肺组织水肿，毛细血管扩张、充血，肺泡间隔增厚，肺泡腔内充满大量红细胞及渗出物（封三图2）；I/R+ NaHS组肺组织毛细血管轻微扩张，与I/R组比较，肺泡间隔及肺泡水肿减轻，肺泡腔渗出物明显减少（封三图3）。

3 讨论

H2S本是一种有毒气体，但近些年发现H2S是一种新型气体信号分子，对心血管系统、神经系统、消化道系统等均具有重要的调节作用[5]。新近研究证实，H2S对心脏[6]、肝脏[7]、脑[8]、小肠[9]缺血再灌注损伤有一定的保护作用，其机制可能与抗氧化凋亡提高缺血耐受性有关[10]。

肺缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury，I/R）的机制还不特别清晰，近年来认为炎性介质、氧自由基、内皮细胞的损伤等机制在肺缺血再灌注损伤中有重要作用[11]。内皮细胞的损伤引起肺毛细血管扩张，从而通透性增高，引发肺组织水肿，肺组织湿/干重比值可反映肺水肿情况，再灌注后W/D比值，BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比及肺通透性指数均增高，而NaHS后处理后上述指标明显下降（P<0.05），其对肺缺血再灌注损伤产生了很好的效果。

近年来证明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注损伤的主要影响因素。与缺血再灌注损伤有关的氧自由基（OFR）有过氧化氢（H2O2）、超氧阴离子（O2-）[12]。正常生理状态下，氧自由基所引起的损伤可被机体“抗氧化屏障”所抑制，然而缺血再灌注使组织产生过多的氧自由基，破坏了内源性抗氧化系统，从而引起细胞坏死和组织的损伤。在此过程中，双键脂肪酸在氧化后形成丙二醛，其含量可间接反映肺组织氧化损伤的情况。本实验结果表明，I/R组中MDA含量与Sham组相比显著升高，表明肺缺血再灌注时，体内大量的氧自由基积累，导致肺水肿。而NaHS处理后，MDA含量虽然比Sham组高，而与I/R组相比显著下降（P<0.05）。实验结果表明H2S处理后，可降低再灌注后血浆MDA的含量，能减轻氧自由基所引起的氧化损伤，从而达到一定的保护能力。SOD是机体的重要抗氧化活性酶，其活性水平能间接反映机体的抗氧化能力[13]。本实验中观察到I/R组SOD活性与Sham组相比显著下降，表明肺缺血再灌注后内源性抗氧化活性酶消耗，从而导致氧自由基含量增加，破坏肺组织内皮细胞，引起肺毛细血管扩张，引起肺水肿，而NaHS处理后，SOD活性与I/R组相比显著升高（P<0.05）。实验结果表明，H2S处理后可以提高机体内源性抗氧化活性酶的活性，从而达到清除氧自由基的目的。

本实验结果表明，外源性硫化氢可通过清除基体氧自由基，提高抗氧化酶活性，起到对肺缺血再灌注损伤起保护作用。然而对其剂量、给药时间等尚需进一步研究。

[参考文献]

[1] Alam S，Chan KM. Noninfectious pulmonary complications after organ transplantation[J]. Curr Opin PulmMed，1996，2（5）：412-418.

[2] 郝茂林，徐正衸，倪世容，等. 葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响[J]. 温州医学院学报，2005，35（2）：92-95.

[3] WangR. Two's company，three's a crowd：can H2S be the third endogenous gaseous tranamitter[J]. FASEB J，2002， 16 （13）：1792-1798.

[4] Sekido N，Mukadia N，Harada A，et al. Prevention of lung reperfusion injury in rabbits by a monoclonal antibody against interleukin-8 [J]. Nature，1993，365：654-657.

[5] iowicka E，Be3towski J. Hydrogen sulfide （H2S）-the third gas of interest for pharmacologists[J]. Pharmacolo Rep，2007， 59（1）：4-24.

[6] 许言午，张江虹，张丽娜，等. 硫化氢对D-半乳糖所致大鼠心肌组织氧化应激和细胞凋亡的影响[J]. 中国老年学杂志，2012，32（16）：3471-3473.

[7] 杜津，王国林. 硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响[J]. 中华麻醉学杂志，2011，31（9）：1136-1138.

[8] 李国风，李兰芳，张勤增，等. 硫化氢对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织神经元凋亡的影响[J]. 中国病理生理杂志，2012，（11）：2105-2106.

[9] 刘浩，白晓斌，史松，等. 硫化氢对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 西安交通大学学报（医学版），2007， 28（6）：668-671.

[10] Szabó C. Hydrogen sulphide and its therapeutic potential[J]. Nat Rev Drug Discov，2007，6（11）： 917-935.

[11] 孟颍，朱仁之. 肺缺血再灌注损伤发病机制的研究进展[J]. 中国医学理论与实践，2002，2002（4）：385-387.

[12] Ruiz-Ginés JA，López-Ongil S，González-Rubio M，et al. Reac tive oxygen species induce proliferation of bovine aortic endo thelial cells[J]. J Cardiovasc Pharmaco，2000， 35（1）：109-113.

[13] 李颖川，姜祯. 尿蛋白酶抑制剂防治肺缺血再灌注损伤的实验研究[J]. 复旦学报（医学版）， 2004，31（2）：182-184.

（收稿日期：2014-02-25）

表2 各组血浆MDA含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性（x±s）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.3 肺通透性指数（LPI）和BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比

与Sham组比较，I/R组BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比虽比Sham组有所升高（P<0.05），但与I/R组对比BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比明显降低， 差异有统计学意义（P均<0.01）；与Sham组比较，I/R组肺通透指数明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组肺通透指数虽比Sham组有所升高（P<0.05）但与I/R组对比，肺通透指数明显降低，差异有统计学意义（P<0.01）。见表3。

表3 各组肺通透性指数及BALF中WBC计数、PMN百分比（x±s，n=8）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.4 肺组织病理结果

Sham组肺泡腔完整性好，肺泡间隔均匀无增厚，肺泡壁光滑，无渗出物及炎细胞浸润（封三图1）；I/R组出现明显的肺组织水肿，毛细血管扩张、充血，肺泡间隔增厚，肺泡腔内充满大量红细胞及渗出物（封三图2）；I/R+ NaHS组肺组织毛细血管轻微扩张，与I/R组比较，肺泡间隔及肺泡水肿减轻，肺泡腔渗出物明显减少（封三图3）。

3 讨论

H2S本是一种有毒气体，但近些年发现H2S是一种新型气体信号分子，对心血管系统、神经系统、消化道系统等均具有重要的调节作用[5]。新近研究证实，H2S对心脏[6]、肝脏[7]、脑[8]、小肠[9]缺血再灌注损伤有一定的保护作用，其机制可能与抗氧化凋亡提高缺血耐受性有关[10]。

肺缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury，I/R）的机制还不特别清晰，近年来认为炎性介质、氧自由基、内皮细胞的损伤等机制在肺缺血再灌注损伤中有重要作用[11]。内皮细胞的损伤引起肺毛细血管扩张，从而通透性增高，引发肺组织水肿，肺组织湿/干重比值可反映肺水肿情况，再灌注后W/D比值，BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比及肺通透性指数均增高，而NaHS后处理后上述指标明显下降（P<0.05），其对肺缺血再灌注损伤产生了很好的效果。

近年来证明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注损伤的主要影响因素。与缺血再灌注损伤有关的氧自由基（OFR）有过氧化氢（H2O2）、超氧阴离子（O2-）[12]。正常生理状态下，氧自由基所引起的损伤可被机体“抗氧化屏障”所抑制，然而缺血再灌注使组织产生过多的氧自由基，破坏了内源性抗氧化系统，从而引起细胞坏死和组织的损伤。在此过程中，双键脂肪酸在氧化后形成丙二醛，其含量可间接反映肺组织氧化损伤的情况。本实验结果表明，I/R组中MDA含量与Sham组相比显著升高，表明肺缺血再灌注时，体内大量的氧自由基积累，导致肺水肿。而NaHS处理后，MDA含量虽然比Sham组高，而与I/R组相比显著下降（P<0.05）。实验结果表明H2S处理后，可降低再灌注后血浆MDA的含量，能减轻氧自由基所引起的氧化损伤，从而达到一定的保护能力。SOD是机体的重要抗氧化活性酶，其活性水平能间接反映机体的抗氧化能力[13]。本实验中观察到I/R组SOD活性与Sham组相比显著下降，表明肺缺血再灌注后内源性抗氧化活性酶消耗，从而导致氧自由基含量增加，破坏肺组织内皮细胞，引起肺毛细血管扩张，引起肺水肿，而NaHS处理后，SOD活性与I/R组相比显著升高（P<0.05）。实验结果表明，H2S处理后可以提高机体内源性抗氧化活性酶的活性，从而达到清除氧自由基的目的。

本实验结果表明，外源性硫化氢可通过清除基体氧自由基，提高抗氧化酶活性，起到对肺缺血再灌注损伤起保护作用。然而对其剂量、给药时间等尚需进一步研究。

[参考文献]

[1] Alam S，Chan KM. Noninfectious pulmonary complications after organ transplantation[J]. Curr Opin PulmMed，1996，2（5）：412-418.

[2] 郝茂林，徐正衸，倪世容，等. 葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响[J]. 温州医学院学报，2005，35（2）：92-95.

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[4] Sekido N，Mukadia N，Harada A，et al. Prevention of lung reperfusion injury in rabbits by a monoclonal antibody against interleukin-8 [J]. Nature，1993，365：654-657.

[5] iowicka E，Be3towski J. Hydrogen sulfide （H2S）-the third gas of interest for pharmacologists[J]. Pharmacolo Rep，2007， 59（1）：4-24.

[6] 许言午，张江虹，张丽娜，等. 硫化氢对D-半乳糖所致大鼠心肌组织氧化应激和细胞凋亡的影响[J]. 中国老年学杂志，2012，32（16）：3471-3473.

[7] 杜津，王国林. 硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响[J]. 中华麻醉学杂志，2011，31（9）：1136-1138.

[8] 李国风，李兰芳，张勤增，等. 硫化氢对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织神经元凋亡的影响[J]. 中国病理生理杂志，2012，（11）：2105-2106.

[9] 刘浩，白晓斌，史松，等. 硫化氢对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 西安交通大学学报（医学版），2007， 28（6）：668-671.

[10] Szabó C. Hydrogen sulphide and its therapeutic potential[J]. Nat Rev Drug Discov，2007，6（11）： 917-935.

[11] 孟颍，朱仁之. 肺缺血再灌注损伤发病机制的研究进展[J]. 中国医学理论与实践，2002，2002（4）：385-387.

[12] Ruiz-Ginés JA，López-Ongil S，González-Rubio M，et al. Reac tive oxygen species induce proliferation of bovine aortic endo thelial cells[J]. J Cardiovasc Pharmaco，2000， 35（1）：109-113.

[13] 李颖川，姜祯. 尿蛋白酶抑制剂防治肺缺血再灌注损伤的实验研究[J]. 复旦学报（医学版）， 2004，31（2）：182-184.

（收稿日期：2014-02-25）

表2 各组血浆MDA含量及超氧化物岐化酶（SOD）活性（x±s）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.3 肺通透性指数（LPI）和BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比

与Sham组比较，I/R组BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比虽比Sham组有所升高（P<0.05），但与I/R组对比BALF中WBC总数及中性粒细胞百分比明显降低， 差异有统计学意义（P均<0.01）；与Sham组比较，I/R组肺通透指数明显升高，差异有统计学意义（P<0.01），I/R+ NaHS组肺通透指数虽比Sham组有所升高（P<0.05）但与I/R组对比，肺通透指数明显降低，差异有统计学意义（P<0.01）。见表3。

表3 各组肺通透性指数及BALF中WBC计数、PMN百分比（x±s，n=8）

注：与Sham组比较，*P<0.05；与I/R组比较，#P<0.01

2.4 肺组织病理结果

Sham组肺泡腔完整性好，肺泡间隔均匀无增厚，肺泡壁光滑，无渗出物及炎细胞浸润（封三图1）；I/R组出现明显的肺组织水肿，毛细血管扩张、充血，肺泡间隔增厚，肺泡腔内充满大量红细胞及渗出物（封三图2）；I/R+ NaHS组肺组织毛细血管轻微扩张，与I/R组比较，肺泡间隔及肺泡水肿减轻，肺泡腔渗出物明显减少（封三图3）。

3 讨论

H2S本是一种有毒气体，但近些年发现H2S是一种新型气体信号分子，对心血管系统、神经系统、消化道系统等均具有重要的调节作用[5]。新近研究证实，H2S对心脏[6]、肝脏[7]、脑[8]、小肠[9]缺血再灌注损伤有一定的保护作用，其机制可能与抗氧化凋亡提高缺血耐受性有关[10]。

肺缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury，I/R）的机制还不特别清晰，近年来认为炎性介质、氧自由基、内皮细胞的损伤等机制在肺缺血再灌注损伤中有重要作用[11]。内皮细胞的损伤引起肺毛细血管扩张，从而通透性增高，引发肺组织水肿，肺组织湿/干重比值可反映肺水肿情况，再灌注后W/D比值，BALF中白细胞计数、中性粒细胞百分比及肺通透性指数均增高，而NaHS后处理后上述指标明显下降（P<0.05），其对肺缺血再灌注损伤产生了很好的效果。

近年来证明氧自由基和活性氧是引起缺血再灌注损伤的主要影响因素。与缺血再灌注损伤有关的氧自由基（OFR）有过氧化氢（H2O2）、超氧阴离子（O2-）[12]。正常生理状态下，氧自由基所引起的损伤可被机体“抗氧化屏障”所抑制，然而缺血再灌注使组织产生过多的氧自由基，破坏了内源性抗氧化系统，从而引起细胞坏死和组织的损伤。在此过程中，双键脂肪酸在氧化后形成丙二醛，其含量可间接反映肺组织氧化损伤的情况。本实验结果表明，I/R组中MDA含量与Sham组相比显著升高，表明肺缺血再灌注时，体内大量的氧自由基积累，导致肺水肿。而NaHS处理后，MDA含量虽然比Sham组高，而与I/R组相比显著下降（P<0.05）。实验结果表明H2S处理后，可降低再灌注后血浆MDA的含量，能减轻氧自由基所引起的氧化损伤，从而达到一定的保护能力。SOD是机体的重要抗氧化活性酶，其活性水平能间接反映机体的抗氧化能力[13]。本实验中观察到I/R组SOD活性与Sham组相比显著下降，表明肺缺血再灌注后内源性抗氧化活性酶消耗，从而导致氧自由基含量增加，破坏肺组织内皮细胞，引起肺毛细血管扩张，引起肺水肿，而NaHS处理后，SOD活性与I/R组相比显著升高（P<0.05）。实验结果表明，H2S处理后可以提高机体内源性抗氧化活性酶的活性，从而达到清除氧自由基的目的。

本实验结果表明，外源性硫化氢可通过清除基体氧自由基，提高抗氧化酶活性，起到对肺缺血再灌注损伤起保护作用。然而对其剂量、给药时间等尚需进一步研究。

[参考文献]

[1] Alam S，Chan KM. Noninfectious pulmonary complications after organ transplantation[J]. Curr Opin PulmMed，1996，2（5）：412-418.

[2] 郝茂林，徐正衸，倪世容，等. 葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响[J]. 温州医学院学报，2005，35（2）：92-95.

[3] WangR. Two's company，three's a crowd：can H2S be the third endogenous gaseous tranamitter[J]. FASEB J，2002， 16 （13）：1792-1798.

[4] Sekido N，Mukadia N，Harada A，et al. Prevention of lung reperfusion injury in rabbits by a monoclonal antibody against interleukin-8 [J]. Nature，1993，365：654-657.

[5] iowicka E，Be3towski J. Hydrogen sulfide （H2S）-the third gas of interest for pharmacologists[J]. Pharmacolo Rep，2007， 59（1）：4-24.

[6] 许言午，张江虹，张丽娜，等. 硫化氢对D-半乳糖所致大鼠心肌组织氧化应激和细胞凋亡的影响[J]. 中国老年学杂志，2012，32（16）：3471-3473.

[7] 杜津，王国林. 硫化氢对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响[J]. 中华麻醉学杂志，2011，31（9）：1136-1138.

[8] 李国风，李兰芳，张勤增，等. 硫化氢对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织神经元凋亡的影响[J]. 中国病理生理杂志，2012，（11）：2105-2106.

[9] 刘浩，白晓斌，史松，等. 硫化氢对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 西安交通大学学报（医学版），2007， 28（6）：668-671.

[10] Szabó C. Hydrogen sulphide and its therapeutic potential[J]. Nat Rev Drug Discov，2007，6（11）： 917-935.

[11] 孟颍，朱仁之. 肺缺血再灌注损伤发病机制的研究进展[J]. 中国医学理论与实践，2002，2002（4）：385-387.

[12] Ruiz-Ginés JA，López-Ongil S，González-Rubio M，et al. Reac tive oxygen species induce proliferation of bovine aortic endo thelial cells[J]. J Cardiovasc Pharmaco，2000， 35（1）：109-113.

[13] 李颖川，姜祯. 尿蛋白酶抑制剂防治肺缺血再灌注损伤的实验研究[J]. 复旦学报（医学版）， 2004，31（2）：182-184.

（收稿日期：2014-02-25）