白癜风患者血清25-(OH)D3水平检测及其与白癜风发病的相关性分析

刘成刚，李建标，孙绍权，史丽梅，程苏琴，朱美财

·论著·

白癜风患者血清25-(OH)D3水平检测及其与白癜风发病的相关性分析

刘成刚，李建标，孙绍权，史丽梅，程苏琴，朱美财

目的 检测白癜风患者血清25-(OH)D3和其他羟基化代谢物水平，探讨该指标与白癜风发病的关系。方法采用真空采血管，空腹抽取140例白癜风患者和60例健康体检者静脉血3 ml，1周内用ELISA法进行检测。按血清25-(OH) D3水平分为足够(74.1～250.0 nmol/L)、正常(47.7～74.0 nmol/L)、不足(25.0～47.6 nmol/L)、缺乏(＜25.0 nmol/L)4种水平，按年龄分为青少年组(5～18岁)、成年组(19～56岁)，分别与各年龄对照组进行比较分析。结果 青少年白癜风组血清25-(OH)D3处于足够、正常、不足和缺乏水平的分别为0、7.4%、59.3%和33.3%，平均值为(30.6±10.5)nmol/L;青少年对照组分别为10.0%、43.3%、46.7%和0，平均值为(50.1±12.1)nmol/L，2组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。成年白癜风组血清25-(OH)D3处于足够、正常、不足和缺乏水平的分别为2.3%、9.3%、51.2%和37.2%，平均值为(33.2±14.5)nmol/L;成年对照组分别为0、20.0%、63.3%和16.7%，平均值为(37.2±10.7)nmol/L，2组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 维生素D严重缺乏与白癜风患者的发病有关，尤其是青少年白癜风患者。

白癜风;25-(OH)D3;羟基化代谢物;相关性研究

白癜风是常见的色素脱失性皮肤病，男女发病率无显著差异，全球发病率0.1%～2%，且近年发病率有上升趋势［1］。该病病因复杂，发病机制尚不清楚，主要有自身免疫学说、黑素细胞自身破坏学说、神经化学因子学说和微量元素缺乏学说等假设［2－3］。目前国内对白癜风患者维生素D的检测分析尚未见报道，笔者对2012年来我院就诊的140名白癜风患者血清25-(OH)D3及其羟基化代谢物进行了测定，并就其与白癜风发病的相关性进行了分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选取我院2012年1～12月门诊就医的140例白癜风患者作为观察对象，其中男72例，女68例，年龄5～56岁，平均28.8岁，所有患者均经临床诊断确诊为白癜风。同时选取健康体检者60例作为对照组，其中男30例，女30例，年龄7～50岁，平均年龄26.5岁，2组患者性别构成比例、年龄分布等一般资料经过统计学分析比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。所有患者均知情同意，并排除严重肝肾疾病。根据美国国家骨质疏松基金会和美国国家肾病基金会推荐标准，将25-(OH)D3检测值分为缺乏(＜25.0 nmol/L)、不足(25.0～47.6 nmol/L)、正常(47.7～74.0 nmol/L)、足够(74.1～250.0 nmol/L)4个水平，按年龄分成青少年组(5～18岁)54例、成年组(19～56岁)86例，分别与对照组相应年龄段(各30例)进行比较。

1.2 方法 (1)标本采集:白癜风患者和健康体检者用真空采血管抽取空腹静脉血3 ml，室温静置30 min后3 000 r/min离心10 min，分离血清，4℃保存，1周内进行检测。(2)仪器、试剂:试剂盒采用英国Immunodiagnostic Systems Limited(IDS Ltd)的25-(OH)D3和其他羟基化代谢物水平检测试剂盒(酶联免疫法)，操作按说明书进行，全部实验和检测定量结果在美国奥斯邦公司的Alicai全自动酶联免疫仪完成。

1.3 统计学处理 各范围组间符合率的比较采用χ2检验，数值采用均数±标准差(±s)表示，组间均数比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 青少年白癜风患者与同年龄段对照组血清25-(OH)D3比较 青少年白癜风组与同年龄段对照组比较，25-(OH)D3处于正常、缺乏水平的百分比和平均值差异均有统计学意义(P＜0.01)。见表1。

2.1 成年白癜风患者与同年龄段对照组血清25-(OH)D3比较 成年白癜风组与同年龄段对照组比较，25-(OH)D3处于缺乏水平的百分比差异均有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

3 讨论

表1 青少年白癜风患者与同年龄段对照组25-(OH)D3水平比较

表2 成年白癜风患者与同年龄段对照组25-(OH)D3水平比较

维生素D是一个脂溶性维生素，1，25-(OH)2D3是维生素D的活性形式，体内多种真核细胞包括黑素细胞表面均存在维生素D受体(VDR)，1，25-(OH)2D3通过与存在于细胞表面及细胞核内的VDR结合发挥广泛的生物学效应［4］，除调节机体钙磷平衡外，还具有抗炎、调节免疫、促进细胞分化、抗肿瘤及促进黑素合成的调节作用［5］。1，25-(OH)2D3半衰期大约15 h，25-(OH)D3的半衰期大约15 d，因而血液中游离的25-(OH)D3被认为是测定机体维生素D状态的最可靠指标。Bik等［2］报道白癜风患者体内存在钙平衡紊乱，提出1，25-(OH)2D3的严重缺乏可能和白癜风的发病有关。

关于白癜风的发病机制进行了大量的科学研究，虽尚无确切定论，但就以往研究结果看，大多数学者公认细胞免疫现象在白癜风的发生中起着直接作用，CD8+的细胞毒性T细胞(CTL)介导的细胞免疫反应可能是自身免疫性白癜风中一个重要的终效应机制［6］。有研究证实，机体的细胞免疫紊乱和1，25-(OH)2D3缺乏可能有关。1，25-(OH)2D3具有免疫调节作用，主要表现为对树突状细胞(DC)、单核细胞、淋巴细胞等增殖分化及其功能的影响［7］。1，25-(OH)2D3能作用于树突细胞，使其发生成熟障碍，并且对促使其成熟的刺激反应钝化，因此不能激活初始T细胞，从而抑制免疫。1，25-(OH)2D3还可抑制单核细胞向DC的分化并抑制其向DC分化后的成熟。CD4+T细胞也存在VDR，也是1，25-(OH)2D3作用的直接靶点，1，25-(OH)2D3在一定程度上导致Th1/Th2朝向Th2的免疫偏移，抑制了免疫反应［8］，因此推测1，25-(OH)2D3严重缺乏会引起细胞免疫亢进现象。

另外，白癜风发病机制研究中发现该类患者体内氧化-抗氧化失衡，表皮H2O2增多，过氧化氢酶明显减少，局部发生氧化应激，造成黑素细胞损伤、死亡［9］。周晓杰等［10］通过对小鼠 25-羟化维生素D1α-羟化酶基因敲除，证实维生素D缺乏会导致小鼠皮肤衰老及氧化应激增强，小鼠皮肤活性氧(ROS)水平明显升高，超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)水平降低、丙二醛(MDA)含量增高等现象。在体外培养的黑素细胞给予一定剂量的1，25-(OH)2D3，黑素细胞的增殖及合成黑素的能力明显提高，白癜风皮损区外用维生素D3衍生物——卡泊三醇能明显提高白斑复色率［11］。这些研究均证明了维生素D3在皮肤黑素细胞的代谢、增殖中的重要作用。

机体维生素D3主要来源于紫外线照射和食物吸收。位于皮下的7-脱氢胆固醇经紫外线照射后转化为维生素D3，这部分占机体需要量的90%。另外，食物中的维生素D3主要存在于脂类食物中，两种途径获得的维生素D3经肝脏和肾脏2次羟化后才能转变为有活性的1，25-(OH)2D3。本研究中白癜风患者均排除肝肾功能障碍，造成白癜风患者尤其是青少年白癜风患者25-(OH)D3偏低的原因，主要是这部分患者在发病前多数有长期饮食不均衡、偏食、缺乏足够室外活动和阳光照射及其他导致25-(OH)D3减少的不良生活方式等。青少年处于生长发育期，维生素D3需求量大，本研究中青少年健康对照组25-(OH)D3平均水平明显高于成年对照组，当25-(OH)D3处于同等缺乏水平状态时也许对青少年健康损伤更明显。另外，从统计结果看，无论是青少年还是成年健康对照组，25-(OH)D3达到国际标准足够水平的人数极少，处于亚健康的人数逐渐增多，这是否与我国近年白癜风患者尤其是青少年患者呈增加趋势有关值得进一步研究。

［1］ Alkhatee B，Fain PR，Thody A，et al.Epidemiology of vitiligo and associated autoimmune disease in Caucasian probonds and their families pigment［J］.Cell Res，2003，16(3):208-214.

［2］ Bik LE，Dg D，Tu CL，et al.Calcium and vitamin D-regulated keratinocyte differentiation［J］.Mol Ced Endocrinol，2001，177(12):154-161.

［3］ Amson Y，Amital H，Shoenfeld Y.Vitamin and autoimmunity new etiological and therapeutical considerations［J］.Ann Rheum Dis，2007，66(9):1137-1142.

［4］ Dusso AS，Brown AJ，Slatopolsky E.Vitamin D［J］.Am JPhysiol Renal Physiol，2005，289(1):8-28.

［5］ Boscoe FP，Schymura MJ.Solar ultraviolet-B exposure and cancer incidence and mortality in the United States，1993－2002［J］.BMC，2006，(6):264.

［6］ Dawson HB，Heaney RP，Holick MF，et al.Estimates of optical vitamin D status［J］.Osteoporos Int，2005，16(7):713-716.

［7］ 王静，王俭勤，王晓玲.1，25二羟维生素D3对系统性红斑狼疮树突状细胞的免疫调节［J］.中华风湿病学杂志，2005，9(2):75-77.

［8］ Ogg GS，Rod DP，Romero P，et al.High frequency of skin-homing melanocyte-specific cytotoxic T lymphocytes in autoimmune vitiligo［J］.JExp Med，1998，188(6):1203-1208.

［9］ Arican O，Kurutas EB.Oxidative stress in the blood of patients with active localized vitiligo［J］.Acta Dermatovenerol Alp Panonica Adriat，2008，17(1):12-16.

［10］周晓杰，苗登顺.活性维生素D缺乏促进小鼠皮肤衰老［J］.南京医科大学学报:自然科学版，2010，30(5):591-596.

［11］Parsad D，Saini D，Verma N.Carbination of PUVAsol and topical calcipotriol in vitiligo［J］.Dermatol，1998，197:167-170.

Detection of serum 25-hydroxy vitam in D3in patients with vitiligo

LIU Cheng-gang，LIJian-biao，SUN Shao-quan，SHILi-mei，CHENG Su-qin，ZHU Mei-cai

(Center of Clinical Laboratory，Air Force General Hospital，Beijing 100142，China)

Objective To detect themetabolism of serum 25-hydroxy vitamin D3(25-OH D3)and other hydroxylatedmetabolites in patients with vitiligo，and also to analyze the relationship between the biological indicator and the pathogenesis of vitiligo.Methods Threemilliliters of fasting blood sampleswere collected from 140 vitiligo patients and 60 healthy controls and separated with an centrifuger at3 000 rpm for 10 minutes，stored at 4℃ and then measured by ELISA.The 25-OH D3levels of vitiligo patients were divided into 4 grades:the sufficient level of serum 25-(OH)D3(74.1－250.0 nmol/L)，the normal level(47.7－74.0 nmol/L)，the insufficient level(25.0－47.6 nmol/L)and the deficient level(＜25 nmol/L).Then，the patients were divided into the youngster group(with an age between 5－18 years)and the adult group(with an age between 19－56 years).The detection results of the youngster group were compared with those of the controlgroupswith differentage ranges and were analyzed with SPSS13.0.Results For the youngster group with vitiligo，the percentages of the patient populations with sufficient，normal，insufficient and deficient25-(OH)D3levelswere 0，7.4%，59.3%and 33.3%respectively，averaging(30.6±10.5)nmol/L，the percentages of the controls were 10.0%，43.3%，46.7%and 0 respectively，averaging(50.1±12.1)nmol/L(P＜0.01).Statistical differences could be noted，when the percentages of the patient populations with normal，deficient and average 25-(OH)D3levels were compared between the 2 groups(P＜0.01).For the adultgroup with vitiligo，the percentages of the patient populationswith sufficient，normal，insufficientand deficient 25-(OH)D3levels were 2.3%，9.3%，51.2%and 37.2%respectively，averaging(33.2±14.5)nmol/L，while the per-centages of the controlswere 0，20.0%，63.3%and 16.7%respectively，averaging(37.2±10.7)nmol/L.Statistical differences could be seen，when the percentages of the patient populationswith deficient25-(OH)D3 levelwere compared between the 2 groups(P＜0.05).Conclusion The pathogenesis of vitiligo was associated with the deficiency of25-OH D3，which was particularly the case in youngsters.

Vitiligo;25-Hydroxy vitamin D3;Hydroxylated metabolites;Correlation study

R758.41

A

10.3969/j.issn.1009－0754.2014.02.017

2013－08－26)

(本文编辑:甘辉亮)

北京市临床特色应用课题(Z111107058811086)

100142 北京，空军总医院临床检验中心

朱美财，电子信箱:liucg1995@sina.com