反相高效液相色谱法同时测定复方氨酚烷胺片中4种组分的含量

陈 健

反相高效液相色谱法同时测定复方氨酚烷胺片中4种组分的含量

陈 健

目的建立采用RP-HPLC同时测定复方氨酚烷胺片中4种组分（对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏）含量的方法。方法色谱柱为Agilent ZORBAX-C18（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-0.01mol/l乙酸铵溶液（13:87，PH=3.0）。柱温为30℃，进样量为20μl，流速为1.0ml/min，检测波长为220nm。结果对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏的线性范围分别为2.05～205.0μg/ml、20.7～517.5μg/ml、5.1～102.0μg/ml、5.2～52.0μg/ml，线性关系良好；该方法的专属性、精密度、稳定性及平均加样回收率均符合分析测定要求。结论本文建立的RP-HPLC法方便快速准确，可用于同时测定复方氨酚烷胺片中4种组分的含量。

复方氨酚烷胺片；RP-HPLC法；含量测定

复方氨酚烷胺片是由对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、人工牛黄、咖啡因组成的复方制剂，适用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的发热、头痛、打喷嚏、鼻塞、咽痛等症状。《中国药典》规定了对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺和咖啡因的含量测定方法[1]，分别为滴定法和紫外分光光度法，方法检验误差及操作难度均较大。本文建立了一种同时测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏含量的反相高效液相色谱法（RP-HPLC），此方法操作简便，快速经济，结果准确，现介绍如下。

1 仪器与试剂

Agilent1200高效液相色谱系统；Agilent1200可变波长扫描紫外检测器；对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏对照品均由中国药品生物制品检定所提供；复方氨酚烷胺片（每片含对乙酰氨基酚250mg、盐酸金刚烷胺100mg、咖啡因 15mg、马来酸氯苯那敏 2mg）为吉林省吴太医药集团有限公司产品；甲醇为色谱纯，乙酸铵、磷酸为分析纯，实验用水为娃哈哈纯净水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱：Agilent ZORBAX-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-0.01mol/L乙酸铵溶液（13:87，PH=3.0）；柱温为30℃；进样量为20μl；流速为1.0ml/min；检测波长为220nm。理论板数以各组分峰计，均不低于3500，各相邻色谱峰的分离度均大于1.5。

2.2 专属性实验供试品溶液的配制：取复方氨酚烷胺片5片，精密称定，研细，精密称取细粉总量的1/50，置于100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。阴性对照溶液的配制：按照该片剂处方比例制备不含测定成分的阴性样品，按上述方法制成阴性对照溶液。

将供试品溶液和阴性对照溶液分别进样检测，结果见图1，显示片剂中辅料及其它组分对测定组分无干扰。

2.3 线性关系的考察精密称定对乙酰氨基酚约100mg、盐酸金刚烷胺约 100mg、咖啡因约 25mg和马来酸氯苯那敏约25mg，置于同一100ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为储备液。分别精密移取储备液0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml、20.0ml于50ml容量瓶中，均用流动相稀释至刻度并摇匀，进样检测。以样品浓度（X）对峰面积（Y）进行线性回归，得对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏的回归方程分别为：Y=31.52X＋5.67；Y=52.33X＋210.50；Y=26.48X＋6.54；Y=5.09X＋48.31。4种组分的线性关系均良好，线性范围分别为2.05～205.00μg/ml、20.7～ 517.5μg/ml、 5.1～ 102.0μg/ml、 5.2～52.0μg/ml。

2.4 精密度试验取2.3项下2.0ml储备液稀释至50ml作为样品液，重复进样6次，记录样品中4种组分峰面积，结果表明，4种组分峰面积的RSD分别为0.52%、0.83%、0.48%和0.69%，显示精密度良好。

2.5 稳定性试验取2.4项下样品液，分别于室温下放置0h、2h、4h、6h、8h、12h后进样测定。结果显示，4种组分峰面积的 RSD分别为 0.46%、0.91%、0.60%和0.73%，表明该片剂溶液在12h内稳定性良好。

2.6 加样回收试验精密量取9份已知含量的供试品溶液4ml于10ml容量瓶中，分别加入2.4项下样品溶液3ml（n=3）、4ml（n=3）、5ml（n=3），加流动相稀释至刻度，摇匀，进样检测各组分峰面积，计算得到4种组分的平均加样回收率分别为99.6%、99.0%、99.5%、99.4%。

2.7 样品含量测定供试品溶液平行进样3次，根据4种组分的平均峰面积，利用2.3项下所得线性方程求出供试品溶液中4种组分的浓度，以“标识含量%”表示分别为99.8%、99.2%、100.4%、98.7%。

3 结论

本文建立的 RP-HPLC法可同时测定对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏的含量，并具有方便、快速、准确、经济的优点，可为复方氨酚烷胺片中4种主要组分的定量测定提供依据。

图1 RP-HPLC色谱图

[1] 中华人民共和国国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].中国医药科技出版社,2010.

R927.2

A

1673-5846(2014)01-0042-02

江苏省第二中医院，江苏南京 210017