黄牛巴氏杆菌病的诊断及治疗

于 浩 宋莎莎

（山东省乳山市南黄镇畜牧兽医工作站，山东乳山 264500）

牛巴氏杆菌病是由巴氏杆菌引起的一种急性、热性传染病，主要经消化道传染，其次，为呼吸道或伤口传染[1，2]。本病一般呈散发性流行，通常是突然发病，发生高热和肺炎，有时表现水肿病变，各脏器出血等[3，4]。

2013年5月，乳山市某肉牛场150余头9月龄左右的育肥黄牛暴发此病。5月初从济宁购进，5月中旬开始陆续发病、死亡，截止6月10日大群发病，死亡10余头，遂采集病料进行病原菌分离鉴定及药敏试验，筛选敏感药物，合理选择用药，为该牛场的病情控制提供及时有效的帮助。

1 试验材料与仪器

1.1 试验材料

采集该牛场粪便、血液，并取病死牛肺、淋巴结、脾脏等病变脏器。

1.2 主要试剂及培养基

三糖铁琼脂培养基、革兰氏染液、麦康凯琼脂培养基、营养肉汤、尿素酶培养基、营养琼脂及微量糖发酵管等。

1.3 试验仪器

自动电热压力蒸汽灭菌器，电热恒温鼓风干燥箱，电热恒温培养箱，超净工作台。

1.4 抗菌药物纸片

环丙沙星、林可霉素、庆大霉素、强力霉素、链霉素及头孢噻呋等。

2 试验方法

2.1 临床症状和病理观察

2.1.1 临床症状观察

观察病牛精神状态、体表特征、粪便颜色和质地、尿液颜色以及检测体温、呼吸数和心率等临床特征，并询问养殖场技术人员病死牛的病程变化情况。

2.1.2 病理剖检观察

对病死牛进行剖检，观察其可视粘膜、胃肠道、脾脏、肺脏、血液等病变情况。

2.2 细菌的分离纯化和镜检

2.2.1 病原菌分离纯化

将病料无菌接种于血琼脂培养基上，于37℃恒温培养箱中培养24 h，观察细菌生长情况、菌落特征。然后挑取可疑菌落再接种于血琼脂培养基上进行纯化，将纯培养细菌接种于麦康凯培养基上，37℃恒温培养24 h，观察记录其生长情况。

2.2.2 镜检

挑取可疑菌落，革兰氏染色、镜检。

2.3 细菌的生化鉴定

2.3.1 糖发酵

将待检菌株分别接种在蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、尿素、枸橼酸微量发酵生化管中，于37℃恒温培培养48 h，观察记录结果。

2.3.2 尿素酶试验

将待检菌种做穿刺划线，接种于尿素酶斜面培养基中，37℃恒温培养24h，观察记录结果。若培养基由黄色变为红色为阳性，否则为阴性。

2.3.3 三糖铁试验

将待检细菌穿刺接种于三糖铁（TSI）琼脂中，37℃恒温培养24 h，观察记录结果。

2.4 药敏试验

2.4.1 菌液的制备

挑取血琼脂培养基上的3～5个菌落，加入无菌的盛有2～3 ml营养肉汤的离心管中。37℃恒温培养12 h，备用。

2.4.2 药敏试验

参照有关资料介绍方法进行[5]。取上述菌液0.1 ml于血琼脂平板上，涂匀，室温干燥5 min，将药敏纸片置于培养基表面。37 ℃恒温培养12 h，观察记录结果。

2.5 药物治疗试验

根据药敏试验结果对牛群进行药物治疗，并记录治疗效果。

3 结果

3.1 临床症状

患牛突然发病，体温升高，达41℃～42℃，精神沉郁，食欲、饮欲不振，反刍次数减少；鼻镜干燥，呼吸困难，由鼻孔流出大量粘性液体；有的带有血色，粪便成稀糊状并混有血液，有的粪便排泄物中带有大块的坏死脱落的肠粘膜。病牛努责频繁，有里急后重的表现。有的病牛眼睛红肿、流泪。酷似感冒，当地兽医按感冒和肠炎进行治疗近1周，结果不但没有抑制病情发展，反而出现死亡病例增多的现象。

3.2 病理变化

全身淋巴结肿大、出血，气管内有大量泡沫样粘液，肺脏充血、出血、淤血，呈大理石样，胸腔和心包积液；肝脏肿大，胆汁潴留，呈墨绿色；大网膜和肠系膜上有大面积弥漫性点状、片状出血，真胃和十二指肠粘膜水肿、增厚、出血，结肠呈紫红色，有的发生坏死。

3.3 细菌分离结果

3.3.1 细菌分离

从所采集病料中共分离出3株巴氏杆菌，由淋巴结中得到的菌株定为1号菌，由粪便中得到的菌株定位为2号菌，由肺中得到的菌株定为3号菌。

细菌在血琼脂平板上生长良好，菌落呈淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落，无溶血现象。在麦康凯培养基上1号细菌不生长，2号、3号细菌生长良好且菌落边缘整齐表面光滑。

3.3.2 染色镜检

细菌呈革兰氏阴性，单个存在，两端钝圆两极浓染。

3.4 生化试验结果

对所分离出的3株巴氏杆菌进行生化试验鉴定，其中，1号菌株蔗糖、尿素、葡萄糖、甘露醇为阳性，其余为阴性。2号、3号菌株蔗糖、尿素、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇为阳性，三糖铁试验和尿素酶试验为阳性，其余为阴性。根据各试验结果可以推断出1号为多杀性巴氏杆菌，2号、3号为产气性巴氏杆菌。生化鉴定结果见表1。

3.5 药敏试验结果

通过药敏试验可知，多杀性巴氏杆菌和产气性巴氏杆菌对头孢菌素和强力霉素较为敏感。药敏试验结果见表2。

表1 生化试验试验结果

表2 不同药物对巴氏杆菌的抑菌圈记录表

3.6 治疗

根据药敏试验结果，发病后，采用头孢噻呋钠10 mg/kg·bw进行治疗连用5 d，效果较好，对于病情严重的牛用葡萄糖静脉注射进行补液，经治疗，除病情严重的1头牛死亡外，其余全部治愈而且再无新病例发生。

4 讨论

牛巴氏杆菌病是一种常见多发的烈性热性传染病，对养牛业危害非常严重。巴氏杆菌为条件病原菌，一些诱发因素如营养不良，寄生虫感染、长途运输、饲养管理条件不良等都可促进本病发生[6，7]。该牛场是在购买后不久发病，探究其发病原因，可能是在长途运输过程中，机体处于长时间的应激状态，神经系统和内分泌系统功能紊乱引起机体营养物质大量消耗，机体免疫力下降，从而导致该病的发生。邢玫等就曾报道过运输应激能导致牛场暴发巴氏杆菌病。此外，在饲养过程中，养殖户要特别注意环境卫生，及时进行环境的消毒。

目前，许多地方兽医盲目使用广谱抗菌药以致使巴氏杆菌产生了广泛的耐药性。因此，在临床治疗时，应先进行药敏试验，不仅能及时有效的治疗疾病而且能最大限度减少耐药性的产生。

多杀性巴氏杆菌致病率高，病死率也高，在防治过程中应该预防为主。对发病死亡牛深埋消毒，污染环境、用具、厩舍彻底清扫消毒；对发病牛和疑似病牛立即隔离进行治疗，健康牛要做好认真观察，同群牛和周围牛进行紧急预防注射；加强饲养管理，增强牛体抵抗力[8]。

[1]Carter，G.R.，Am[J].Vet.Res.，1955，（16）：481-484.

[2]郭大和，郑明，潘松年.我国多杀性巴氏杆菌荚膜抗原的血清学鉴定[J].畜牧兽医学报，1979，10（2）：67-78.

[3]闫海.牦牛巴氏杆菌病的调查与防治[J].甘肃畜牧兽医，2007，37（1）：33-34.

[4]张立成.高原牦牛巴氏杆菌病流行特点与分析[J].中国兽医杂志，2007，43（7）：46.

[5]HEDDLESTON K L，REBERS P A. Fowl cholera：cross-immunity induced in turkeys with formalin-killed in-vivo-propagated Pasteurella mu tocida[J].A-vian Dis，1972，16（3）：578-586.

[6]余旭平，邬栋栋，刘晓宁，等. 血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析[J].畜牧兽医学报，2008，39（2）：245-250.

[7]朱进江，陈建新，余银江，等.牛巴氏杆菌病的诊治[J].贵州畜牧兽医，2008，23（4）：35.

[8]杨玉兰.牛巴氏杆菌病的临床诊断与综合防治[J].农技服务，2009，26（1）：112-118.

[9]李平安，杨莲茹，商晓桂，等.牛溶血性巴氏杆菌的分离鉴定[J].内蒙古农业大学学报，2008，29（1）：1-3.

[10]邢玫，张岚，张波.巴氏杆菌病的诊断与治疗[J].新疆畜牧业，2007，（2）：30-31.