中益健长素对猪瘟疫苗免疫效果的影响

傅规玉 谭德展 禹 菡

（1.湖南飞力格科技有限公司，湖南邵阳 422000；2.邵阳职业技术学院生物工程系，湖南邵阳 422000）

湖南飞力格科技有限公司生产的“中益健长素”（其主要成份为：多株益生菌，特种名贵中草药，特殊保生长因子等）能够起到激活机体免疫力的作用，能刺激动物产生干扰素，提高免疫球蛋白浓度和巨噬细胞的活性，通过非特异性免疫调节因子等来激发机体免疫力的增强。

猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒（PCV2）感染相关的以免疫抑制为特征的一类病毒性传染病，主要侵害猪体的免疫器官，减低机体免疫力，导致高度免疫抑制性，给猪场造成很大经济损失[1]。为探讨中益健长素能否缓解PCV2对猪瘟疫苗免疫效果的影响特进行了本试验。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 30日龄30头来自湖南长虹养殖场圆环病毒阳性猪场，实验前对实验猪进行CSFV和PCV2病原学和抗体检测，CSF的病原学检测为阴性，血清学检测有母源抗体存在，PCV2的病原学检测和血清抗体检测均为阳性。1.1.2 疫苗 政府采购的专用猪瘟活疫苗（脾淋源），以下简称脾淋苗，生产厂家：哈药集团生物疫苗有限公司，批号200847。主要成分和含量：猪瘟兔化弱毒株接种家兔，收获感染家兔的脾脏及淋巴结（简称脾淋），每ml脾淋苗不少于组织毒0.01 g。

1.1.3 试验仪器及试剂 医用注射器；离心机；96孔110 V型医用血凝板；与血凝板大小相同的玻板；微量移液器（20～200 μl）；取液塑料咀；微量振荡器；恒温箱；猪瘟血凝抗原（批号070826，效价1:1024）；猪瘟阴性对照血清（批号070529）；猪瘟阳性对照血清（批号070622）；稀释液（批号070627）。以上试剂均为中国农业科学院兰州兽医研究所生产。

1.2 方法

1.2.1 实验分组及处理

30头猪随机分为3组，实验组1饲料中加0.1%中益健长素饲喂40 d，实验组2饲料中加0.15%中益健长素饲喂40 d，对照组不饲喂中益健长素。分组30 d后注射猪瘟脾淋苗，免疫后定期采血检测猪瘟抗体滴度。

表1 实验分组及处理

1.2.2 血样采集和处理 采用前腔静脉采血，收集3组实验动物猪瘟疫苗首免前、首免后10 d、二免后10 d的血清进行猪瘟抗体检测。

1.2.3 抗体滴度的测定 按照《动物疫病实验室检验技术》提供的方法进行猪瘟抗体正向间接血凝试验。

1.2.4 实验结果判定 先观察阴性血清对照孔和稀释液对照孔，红血球应全部沉入孔底，无凝集现象（-）或呈（+）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈（+++）凝集为合格。在以上3孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝集的待检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到1:16为免疫合格。

2 结果与分析

2.1 接种前3组实验动物猪瘟抗体水平滴度

表2 接种前3组实验动物猪瘟抗体水平滴度

由表2可知：接种前，3组实验动物猪瘟母源抗体效价基本相

同，3组的猪瘟抗体阳性率都为0。

2.2 首免后10 d 3组实验动物猪瘟抗体水平滴度

表3 首免后10 d 3组实验动物猪瘟抗体水平滴度

由表3可知道，首免10 d后组实验组1阳转率为20%，实验组2阳转率为30%，对照组1阳转率为0。实验组阳转率与对照组阳转率相比提高了25%，达到显著水平（P＜0.5）。实验组1的阳转率低于实验组2。

2.3 再免后10 d 3组实验动物猪瘟抗体水平滴度

由表4可知道，首免10 d后组实验组1阳转率为90%，实验组2阳转率为90%，对照组1阳转率为40%，实验组阳转率与对照组阳转率相比提高了50%，达到显著水平（P＜0.50）。实验组1的阳转率等于实验组2，而且抗体滴度水平相差不大。

表4 再免后10 d 3组实验动物猪瘟抗体水平滴度

3 讨论

圆环病毒对猪瘟疫苗免疫力有一定影响，有实验也证明PCV2感染会降低猪瘟疫苗的免疫效力，而“中益健长素”主要成分是：多株益生菌、特种名贵中草药及特殊保生长因子。益生菌主要是芽孢杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌等，Vesely和陈延柞认为嗜酸性乳酸杆菌的作用是刺激免疫系统，特别是巨嗜细胞NK细胞和B细胞。刘克琳和Inooka用蜡样芽孢杆菌喂肉鸡，对1、3、6周龄的中枢和外周免疫器官进行测量，结果表明，实验组免疫器官较对照组生长迅速和成熟快；王立生等研究表明，双歧杆菌具有免疫赋活作用，能激活免疫系统中的巨嗜细胞NK细胞和B细胞。医学研究表面，补益类中草药多数具有免疫调节机能。杜改梅研究表明，应用中草药添加剂实验组猪瘟抗体水平显著高于对照组。从理论上分析，“中益健长素”能够激活机体免疫能力，解除圆环病毒免疫抑制是可行的。

本研究发现，PCV2阳性猪在免疫接种前实验组和对照组抗体滴度基本相同，无免疫保护作用；首免10 d后，实验组阳转率显著高于对照组，而且实验组1阳转率低于实验组2，说明短期内中益中益健长素的用量多免疫效果更好。二免后，实验组阳转率显著高于对照组，实验组1的阳转率等于实验组2，而且抗体滴度水平相差不大，说明长时间使用，1%的中益中益健长素的用量已完全能达到提高猪免疫功能、缓解圆环病毒的免疫抑制，显示中益健长素能作为免疫增强剂，提高感染了PCV2处于免疫抑制的猪接种疫苗后的免疫效果。

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