趋化因子受体CXCR7在非小细胞肺癌中的表达及意义

袁 军，张胜超，郑如恒

趋化因子受体CXCR7在非小细胞肺癌中的表达及意义

袁 军，张胜超，郑如恒

（复旦大学附属中山医院青浦分院胸外科，上海201700）

目的探讨非小细胞肺癌组织中趋化因子受体CXCR7的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测经外科手术切除的86例非小细胞肺癌组织及34例癌旁组织标本中CXCR7的表达情况。结果全部非小细胞肺癌组织均异常表达CXCR7，高表达率达52.3%（45／86），在对照组中CXCR7均为阴性表达。CXCR7在有淋巴结转移组的高表达率为62.96%（34／54），在无淋巴结转移组的高表达率为34.38%（11／32），两者差异有统计学意义（P＜0.05）；CXCR7的高表达率均随TNM分期的增高而逐渐增高，且Ⅱ、Ⅲ期的高表达率明显高于Ⅰ期，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论CXCR7高表达与非小细胞肺癌的淋巴转移及临床分期相关，提示CXCR7与非小细胞肺癌的发生发展存在相关性。

肺癌；趋化因子受体；CXCR7

（Chin J Lab Diagn，2014，18：1954）

目前，肺癌是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。趋化因子／受体参与多种生物学过程，肿瘤、炎症以及免疫机制等也需要趋化因子及其受体网络紧密的将其联系起来，在肿瘤的发生、侵袭及转移等多个环节均发挥着重要的作用［1］。过去认为，趋化因子CXCL12的唯一受体是CXCR4，然而，最近的研究发现尚存在CXCR7这一新的受体，在肿瘤发展过程中，CXCL12／CXCR7生物轴起着重要作用［2］。本文通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的CXCR7表达情况，探讨CXCR7在NSCLC发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1材料

收集我院2011年1月至2013年6月接受手术治疗的NSCLC患者标本86例，术前均未接受化疗。其中男52例，女34例，年龄38－80岁，平均年龄（59.3±11.6）岁；肺鳞癌51例，肺腺癌23例，肺腺鳞癌12例；伴有淋巴结转移的54例，无淋巴结转移的32例；按WHO肺癌TNM标准分级、分期：低分化42例，中分化33例，高分化11例；I期28例，Ⅱ期24例，Ⅲ期34例。另取34例患者的癌旁组织（距癌组织5cm以上）作为对照组。

1.2方法

1.2.1 免疫组织化学染色

采用免疫组织化学SP法，由福州迈新公司提供SP试剂盒。所获标本经10%甲醛溶液固定后，常规石蜡包埋，切片，厚度为4μm。高压抗原热修复，3%H2O2阻断内源性过氧化物酶，滴加1∶100小鼠抗人单克隆抗体，4℃过夜，PBS冲洗，滴加生物素标记二抗工作液，室温孵育10min；滴加链霉菌抗生物素－过氧化物酶溶液，室温孵育10min，PBS冲洗；DAB显色，苏木素复染。阳性对照用已知的阳性切片，阴性对照采用PBS代替一抗。

1.2.2 结果判定标准

以细胞质和（或）细胞膜出现黄色或棕黄色颗粒为阳性。评定和分析标准：每例均随机观察≥5个高倍视野（＞400），每个视野计数100个细胞，阳性细胞率＝阳性细胞数／观察细胞数×100%。阳性细胞率计分标准：0分为＜5%，1分为6%－25%，2分为26%－50%，3分为51%－75%，4分为75%以上。染色强度：1分为浅黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色。阳性细胞率乘以染色强度即为最后得分：0分为阴性（－），1－2分为弱阳性（＋），3－6分为中度阳性（＋＋），超过6分为强阳性（＋＋＋）。低表达为（－）和（＋），高表达为（＋＋）和（＋＋＋）。

1.3统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，两样本率的比较釆用四格表资料的χ2检验，多样本率的比较采用行×列表资料的χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1CXCR7在非小细胞肺癌组织和正常组织中的表达

全部NSCLC组织均异常表达CXCR7蛋白，NSCLC组织中的高表达率达52.3%（45／86）；在对照组中CXCR7均为阴性表达。

2.2CXCR7与NSCLC临床病理特征的关系

组间差异比较结果显示，CXCR7高表达率与入组患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学分型及分化程度无关（P＞0.05）。CXCR7在有淋巴结转移组的高表达率为62.96%（34／54），在无淋巴结转移组的高表达率为34.38%（11／32），两者差异有统计学意义（P＜0.05）；CXCR7的高表达率均随TNM分期的增高而逐渐增高，且Ⅱ、Ⅲ期的高表达率明显高于Ⅰ期，差异有统计学意义（P＜0.0 5）。见表1。

3 讨论

趋化因子指的是具有趋化作用的细胞因子，能将免疫细胞吸引至免疫应答部位，参与免疫调节和免疫病理反应。一般认为，不同的器官由于不同趋化因子的存在，因此产生不同的趋化或募集作用，驱使肿瘤细胞向相应器官选择性地转移。CXCL12／CXCR4轴可通过活化胞内信号通路使得多种肿瘤细胞的生长和增殖加快。在未发现CXCR7时，认为在某些情况下，CXCL12和CXCR4功能和分布的匹配尚不能做到，即当CXCLl2发挥作用时，CXCR4的有效浓度不是很高［3］。CXCR7属于趋化因子受体家族CXCR类的成员之一，在正常的细胞表面基本不表达或仅有微弱的表达，但在肿瘤细胞的表面的表达明显的上调。在肿瘤的发生发展中，CXCR7同样起着重要的作用［4］。Miao［5］等通过免疫组织化学法检测出人类大多数常见肿瘤，比如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、肾癌和横纹肌肉瘤，结果发现在各种肿瘤组织中均有CXCR7表达。

表1 不同临床病理指标的NSCLC中CXCR7蛋白的表达

本实验运用免疫组化方法观察到，在NSCLC组织中CXCR7呈异常表达，CXCR7的高表达率达52.3%，而在癌旁组织中未见CXCR7表达，提示CXCR7可能与NSCLC的发生有关。Hartmann等［6］研究表明，癌细胞上的CXCR4－CXCR7在跨膜转移过程中首先与CXCLl2相互作用，产生并激活整合LFA－l和VLA－4，再黏附到CXCL12＋内皮细胞上，CXCR4和CXCR7均独立发挥作用。本研究还发现，CXCR7的高表达也与NSCLC的临床分期、淋巴结转移密切相关，提示通过检测CXCR7有助于了解NSCLC的淋巴转移、临床分期等情况，可能成为判断病人预后的指标之一。Grymula等［7］对横纹肌肉瘤研究发现，在CXCL12的激活下，高表达的CXCR7可以使（M A PK）p42／44及AKT磷酸化通路激活，使细胞的移动能力、迁移方向、细胞黏附力及金属蛋白酶（M M P）的表达量受到调节。在免疫缺陷小鼠体内经CXCR7转染的人肺癌细胞株能长成较大的肿瘤，siRNA下调CXCR7表达的细胞株肿瘤体积则相对较小，说明CXCR7能够使肿瘤细胞的存活和增殖加快。研究发现，在非小细胞肺癌中CXCR7高表达者肿瘤转移、复发率明显增高［8］。

总之，CXCR7的高表达与NSCLC的发生、发展、浸润、转移均有着十分密切的关系，有望成为评估NSCLC进展和判断预后的一个重要的指标。在今后，应加强在NSCLC中CXCR7与肿瘤转移的具体作用机制及信号通路的实验研究。

［1］Raman D，Baugher PJ，Yee MT，et al.Role of chemokines in tumor growth［J］.Cancer Lett，2007，256（2）：137.

［2］邱明远，李健文，郑民华.CXCR4和CXCR7在肿瘤中的研究进展［J］.中国癌症杂志，2010，20（3）：222.

［3］胡旭民，胡晓光，张常华.CXCR7在疾病发生和发展中的作用［J］.现代肿瘤医学，2010，18（7）：1455.

［4］侯恺林，张连华，薄隽杰，等.趋化因子受体7在膀胱癌组织中的表达及其临床意义［J］.中华泌尿外科杂志，2011，32（1）：42.

［5］Miao Z，Luker KE，Summers BC，et al.CXCR7（RDC1）promotes breast and lung tumor growth in vivo and is expressed on tumorassociated vasculature［J］.Proc Natl A cad Sci USA，2007，104（40）：15735.

［6］Hartmann TN，Gmbovsky R，Pasvolsky Z，et al.A crosstalk between intracellular CXCR7and CXCR4involved in rapid CXCL12triggered integrin activation but not in chemokine－triggered motility of human T lymphocytes and CD34cells［J］.Leukocyte Biol，2008，84：1129.

［7］Grymula K，Tarnowski M，Wysoczynski M，et al.Overlapping and distinct role of CXCR7－SDF－1／ITAC and CXCR4－SDF－1axes in regulating metastatic behavior of human rhabdomyosarcomas［J］.Int J Cancer，2010，127：2554.

［8］王娜娜，支 宇，白 鹰.趋化因子受体CXCR7及其与肿瘤的关系［J］.国际肿瘤学杂志，2013，40（6）：431.

Expression and significance of chemokine receptor CXCR7 in non small cell lung cancer

YUAN Jun，ZHANG Shengchao，ZHENG Ru－heng.（Department of Thoracic Surgery，Zhongshan Hospital Affiliated to Fudan University Qingpu Branch，Shanghai 201700，China）

ObjectiveTo investigate the expression of chemokine receptor CXCR7in non small cell lung cancer and its clinical significance.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of 86cases of non small celllung cancer surgical operation excision and 34cases of paracancerous tissues in CXCR7.ResultsAll the non small cell lung cancer tissues were abnormal expression of CXCR7，the high expression rate was 52.3%（45／86）.There had negative expression of CXCR7in the control group were.The high expression of CXCR7in lymph node metastasis rate was 62.96%（34／54），in the absence of high expression of lymph node metastasis rate was 34.38%（11／32），the difference was statistically significant（P＜0.05）.The high expression of CXCR7increased as the TNM staging was gradually increased，and the high expression ofⅡ，Ⅲperiod was significantly higher than that of I，the difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionThe high expression of CXCR7and lymph node metastasis and clinical staging of non small cell lung cancer and correlation，suggesting that CXCR7in non small cell lung cancer and had significant correlation development.

lung cancer；chemokine receptor；CXCR7

R734.2

：A

袁军（1974－），男，主治医师，研究方向：肺癌综合治疗。

2014－02－15）

1007－4287（2014）12－1954－03