尿微量白蛋白检测方法和临床应用的探讨

吴奇福　林灿英　陈小婷　林华丽

【摘要】微量白蛋白尿是指尿液白蛋白超过正常水平、但低于常规方法可检出的范围。尿mAlb主要用于早期肾损害的诊断，在此对尿mAlb检测方法和临床应用进行探讨。

【关键词】尿微量白蛋白；检测方法；临床应用

1检测原理及方法学评价

尿mAlb测定方法较多，早期方法因操作复杂、灵敏度低、特异性差，多已被淘汰，随着实验医学的发展，出现了许多新方法。临床上常用的检测方法有4种，具体如下：

1.1放射免疫法（RIA）是以放射性核素为标记物的免疫分析法，其基本原理是标记抗原（Ag*）和非标记抗原（Ag）的竞争性结合有限量特异性抗体（Ab）的反应。标记用的核素应用最广泛的是125I。放射免疫法24小时尿微白蛋白排泄率为国际公认的检测微量白蛋白尿的金标准。该方法灵敏度高，达纳克甚至皮克水平，特异性强、精密度高、准确性好，回收率接近100%，操作简便，适用于批量测定。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应、样品处理不够迅速，不能灭活降解酶和盐，有时会影响结果等。但核素的放射性对人体有一定危害性，放射性标记物125I的测定，需要一定的仪器设备。

1.2酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）该方法运用酶标记免疫技术进行液体标本中微量物质测定，其基本原理是把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品（含待抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物；反应终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量（免疫复合物）即与标本中待檢抗体或抗原的量成一定比例，经洗涤去除反应液中其他物质，加入酶反应底物后，底物即被固相载体上的酶催化变为有色产物，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量。常用的方法有：①双抗体夹心法；②间接法；③竞争法；④捕获法。ELISA方法具有高度的灵敏度和特异性，几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用于检测，最小可测值达纳克甚至皮克水平。其优点在于标记试剂比较稳定，无放射性危害。但其检测敏感范围有限，检测时间较长，当抗原抗体的比例不适当时，又会引起钩状效应。

1.3免疫浊度测定将现代光学测量仪器与自动分析检测系统相结合应用于沉淀反应，可对各液体介质中的微量抗原、抗体和药物及其他小分子半抗原进行定量测定。当可溶性抗原与相应的抗体特异结合在二者比例合适时，在特殊的缓冲液中快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。形成的复合物随抗原增高而增高，反应液的浊度也随之增高。免疫浊度测定有：①透射比浊法；②散射比浊法：速率散射比浊法和终点散射比浊法；③免疫胶乳比浊法。该方法操作简便、灵敏度高、精确度高、稳定性好、测定时间快，可应用于仪器自动分析。透射比浊法只需分光光度计，易于常规实验室使用，或在生化分析仪上进行自动分析。散射比浊法灵敏度高于前者，但需特殊仪器激光比浊计。

1.4化学发光免疫检测技术是利用催化剂存在的条件下使发光物质形成激发态产免疫测定技术（ECLI）。该检测技术集灵敏的化学发光分析和特异的抗原抗体免疫测定于一体，特异性高、敏感性高、分离简便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化。2临床应用

微量白蛋白尿的发生与多种因素相关，其中高血糖和高血压是最常见和最主要的两个危险因素。

2.1尿m-Alb与糖尿病肾病尿微量白蛋白的出现常反映肾脏结构与功能已经轻度受损，测定UMA有助于糖尿病肾病的早期诊断和早期预防[1]。

2.2尿m-Alb与心血管疾病首先最常见的是高血压，高血压是加重肾功能恶化的重要因素之一，实验证明尿m-Alb检测可作为高血压早期肾损害的敏感指标，采样方便、无创伤性、方法简单、快速，对于高血压肾病的早期发现、诊断和治疗具有重要价值，值得临床推广应用[2]。其次是冠心病，在冠心病患者中，尿微量白蛋白是预测心血管事件及病死率的独立危险因素，随着冠心病患者微量白蛋白尿的增高，冠状动脉粥样硬化的病变程度也逐渐加重，尿m-Alb可以作为判断心血管事件发生及严重程度的指标之一[3]。再者是心力衰竭，慢性心力衰竭（CHF）是一种严重的临床综合征，它不仅表现为心泵功能的衰退，常同时伴有神经内分泌激素分泌和其他器官功能（包括肾脏、肝脏等）的异常，影响心力衰竭的发展和预后，裴小锐[4]的研究表明了①尿微量白蛋白与尿肌酐比值UACR水平随着心衰患者心功能分级增高而升高，UACR与BNP、心功能分级呈高度正相关，与左心射血分数LVEF呈中度负相关，与心衰的病因无关，提示UACR水平能评估CHF患者病情严重程度。②UACR水平越高，患者因心血管疾病导致死亡或因心衰病情加重而再入院的情况就越多，提示以UACR水平定义的微量白蛋白尿对判断心衰患者预后有一定价值。

2.3尿m-Alb与呼吸系统疾病哮喘急性重度发作期肾损害中检测尿微量白蛋白对哮喘急性发作期患者病情的判断和预后估计有一定的临床价值，尿微量白蛋白的出现，表明急性哮喘在急性重度发作期患者已有肾功能的损害，因此，进行治疗时，尽量避免使用对肾功能有损害的药物[5]。

2.4尿m-Alb与自身免疫性疾病系统性红斑狼疮性肾炎是在某些触发因素作用下，发生以自身组织为靶目标的异常免疫反应，抗原抗体免疫复合物沉积或抗体结合于肾小球基膜处，基膜孔径屏障遭到破坏，同时表面负电荷渐失，造成肾小球滤过功能受损，尿蛋白排出，因此系统性红斑狼疮患者检测尿m-Alb就相当有必要了。另一类自身免疫性疾病是类风湿关节炎也易导致肾损伤，对类风湿性关节炎患者进行尿液微量蛋白的检测，有利于早期发现肾脏损伤，优于尿常规尿蛋白和eGFR联合监测[6]。

2.5尿m-Alb与有机磷中毒刘拴虎有机磷中毒患者尿白蛋白和尿β2微球蛋白的临床意义表明联合检测有机磷中毒患者的尿白蛋白和尿β2微球蛋白，及同时检测心肌酶谱与肌钙蛋白，有助于早期发现肾损害及中毒程度，提高抢救成功率和判断预后[7]。

2.6尿m-Alb与衰老，尿微量白蛋白随年龄增加而升高，这是因为高血压，高脂血症，肥胖等老年性疾病可引起心血管疾病而导致尿微量白蛋白阳性。因测定尿微量白蛋白对老年性疾病的早期诊断治疗非常重要。没有疾病的老年人发现有尿微量白蛋白升高时，提示今后有较高的心血管发病率和死亡率[8]。

综上所述，鉴于尿微量白蛋白在疾病的早期诊断，病情的严重程度还有预后观察都有一定的相关性，因此建议尿m-Alb与尿常规作为相关疾病的常规检查项目，各临床实验室应该根据各自的需要选择适合检测方法开展尿m-Alb检测，为相关疾病提供有用的信息及实验室指标。

参考文献

[1]王秀梅.82例早期糖尿病肾病患者尿微量白蛋白的检测结果分析.内蒙古医学杂志，2010，42（05）：548-549.

[2]裴京明，郜秋英.高血压患者尿微量白蛋白检测分析.中国现代医生，2011，36.

[3]马慧霞，金笛.119例冠心病患者尿中微量白蛋白测定临床意义.右江民族医学院学报，2010，32（4）.

[4]裴小锐.微量白蛋白尿在评估慢性心力衰竭严重程度及预后中的意义，硕士论文.

[5]王宇彬，李爱英，王晓玲，史有奎，马娟.尿微量白蛋白检测在哮喘急性重度发作期肾损害的诊断价值.潍坊医学院学报，2006，28（1）：26-27.

[6]安成，周育平，程实.类风湿性关节炎患者尿微量蛋白的表达.中国实验诊断学，2012，16（5）：883-885.

[7]刘拴虎，王志祥，王春霞，刘雅丽.有机磷中毒患者尿白蛋白和尿β2微球蛋白的临床意义.现代预防医学，2011，38（11）：2176-2179.

[8]李宏，迪力努尔.尿微量白蛋白与衰老关系的调查分析.中外健康文摘，2009，17.