高效液相色谱法测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量

钟茂团等

【摘要】目的建立散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱含量的高效液相色谱测定方法。方法样品用超声提取，过滤，取续滤液，采用高效液相色谱法直接测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈：0.1%磷酸溶液=9：87为流动相，流速为1.0ml/min，进样量10μl，检测波长为207nm。结果盐酸麻黄碱的线性范围为2.396-21.564μg/ml，平均加样回收率为99.41%，RSD=0.59%（n=6）。结论此方法准确度较高，可用于测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量，为散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱含量测定提供了一种切实可行的方法。

【关键词】散痰宁糖浆；高效液相色谱法；盐酸麻黄碱

散痰宁糖浆是《卫生部药品标准》中药成方制剂第七册收载的品种，处方为桔梗、远志（制）、桑白皮、氯化铵、盐酸麻黄碱、薄荷脑。[1]是临床用于支气管炎，咳嗽痰多等呼吸道疾病治疗的常用药品。但是标准中没有对处方中的盐酸麻黄碱进行含量测定，《中国药典》2010年版一部对麻黄药材用高效液相色谱法测定盐酸麻黄碱的含量[2]，笔者参考该法测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量，结果专属性强、耐用性好、精密度高，认为此法可以测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量。具体实验方法如下：1仪器与试药

SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色谱仪，UV762型双光束紫外分光光度计，FA2004电子分析天平。乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。2检测波长

取盐酸麻黄碱对照品的甲醇溶液，在200-600nm波长处进行扫描测定，最大吸收波长为207nm，所以选择检测波长为207nm。3测定条件

以乙腈–0.1%磷酸溶液（9：87）为流动相，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速为1.0ml/min，柱温为23℃。4专属性考察

取缺鹽酸麻黄碱的全处方量的阴性样品，按上述的含量测定方法进行测定，阴性无干扰。5供试溶液的制备

5.1对照品溶液的制备精密称取置五氧化二磷干燥器中减压干燥12小时的盐酸麻黄碱对照品9.9mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含盐酸麻黄碱7.92μg）。

5.2提取溶剂的考察精密量取样品（批号100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加50%甲醇、甲醇、乙醇各40ml，超声处理20分钟，分别加50%甲醇、甲醇、乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果以甲醇为提取溶剂，提取效率优于50%甲醇、乙醇，因此选用甲醇为提取溶剂。

5.3提取方法的考察精密量取样品（批号100901）10ml，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，一份超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟；另一份置水浴中加热回流20分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果两种方法提取含量测定结果几无差异，因此以上选用方便简单的超声处理进行提取。

5.4提取时间的考察精密量取样品（批号100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加入甲醇各40ml，分别超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟、30分钟、40分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，再精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果几种提取时间均能较完全提取，含量测定的结果几无差异，因此提取时间选择为20分钟。

综上所述，供试品溶液的制备方法为：精密量取样品10ml，置50ml量瓶中，加入甲醇40ml，超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。6耐用性试验

6.1稳定性试验精密量取样品（批号100901）10ml，按以上拟定的供试液的制备方法制备，室温下保存，取对照品溶液及供试品溶液分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时，按以上拟定的含量测定方法，分别进样10μl，并以含量计算其RSD值，结果为0.22，可见对照品溶液与供试品溶液在配制后10小时内测定，结果稳定。

6.2不同比例的流动相实验曾以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）、乙腈-0.1%磷酸溶液（10∶90）、乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85）为流动相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱（5μm，4.6×250mm）为分析柱，柱温22℃，进行试验研究，均能达到满意的分离，测定结果分别为0.504、0.508、0.509，RSD为0.39%。

6.3不同的色谱分析柱实验曾用ZIVCHROMI柱（5μm，4.6×150mm）、SHIMADZU C18柱（5μm，4.6×250mm）与Kromsil C18柱（5μm，4.6×150mm）为分析柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）为流动相，测定结果分别为0.505、0.509、0.510，RSD为0.39%。

综合以上试验，该方法的耐用性较好。

流动相的比例略作变化，盐酸麻黄碱与其他组分均能达到基线分离，系统适应性较好。分别用ZIVCHROMI、SHIMADZU和Kromsil三种品牌的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，盐酸麻黄碱与其他组分均能达到基线分离，系统适应性好。7含量测定方法学研究

7.1标准曲线与线性范围精密称取盐酸麻黄碱对照品11.98mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取该溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。每1ml含盐酸麻黄碱分别为2.396ug、7.188ug、11.980ug、16.772ug、21.564ug，作为供试品溶液。分别精密吸取上述供试品溶液各10μl，按以上色谱条件进行分析，测定峰面积，结果盐酸麻黄碱浓度在2.396-21.564μg/ml范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：A=5075872C-7919，γ=0.9997（C为盐酸麻黄碱浓度，单位μg/ml，A为峰面积）。

7.2重复性试验按以上拟定的含量测定方法，取样品（批号为100901）共6份，精密量取10ml，分别制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，结果RSD=0.59%，表明重复性良好。

7.3精密度从同一瓶散痰宁糖浆样品（批号100901）中，同时取样5份，按以上拟定的方法，分别制备样品供试液测定。结果各样含量的RSD为0.75%，表明精密度较好。

7.4加样回收率试验分别精密量取批号为100901（已知含量为0.5102mg/ml）的样品5ml，置6个100ml的量瓶中，再分别精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液（浓度为3.7568mg/ml）各1.0ml，按以上拟定的供试品溶液制备方法和色谱条件，制备加样回收供试品溶液，并精密量取10μl，注入高效液相色谱仪中，测定含量，计算回收率，结果回收率在96.88%-101.89%之间，加样回收良好。

注：限于版面，数据及图表略。

参考文献

[1]国家药典委员会.散痰宁[Z].卫生部药品标准.中药成方制剂[S].第7册.第1版.北京：中国医药科技出版社，2011.04.

[2]中药质量标准.麻黄[Z].中国药典[M].一部.北京：中国医药科技出版社，2010.