临床EDTA依赖性血小板减少的计数方法的探讨

司晓盼

【摘要】目的对于EDTA依赖性血小板减少的标本如何计数血小板。方法抽取正常人静脉血，分别用EDTA-K2和枸橼酸钠抗凝，同时取其末梢血涂片，用血细胞分析仪XS_800i分别计数血小板，用EDTA-K2和橼酸钠两种抗凝剂分别抽取4例EDTA-K2依赖性血小板减少患者静脉血与血细胞分析仪上计数，同时取其末梢血进行人工计数。结果两种抗凝剂在一定的时间内血小板计数无统计学差异。

【关键词】EDTA-K2；枸橼酸钠；血小板减少

血小板计数是临床最常用的实验室检测指标之一，其结果的准确性直接影响患者的诊断和治疗，随着血细胞计数仪在临床的应用，引起血小板假性减少的原因逐渐增多，其中较常见的原因就是EDTA-K2抗凝剂引起的血小板减少，可发生于正常人和患者，虽然发生率很低（0.07%-1%），但给临床带来了巨大的困扰。本文就EDTA-K2抗凝剂依赖性引起的假性血小板减少的血小板计数方法经性探讨。

1资料和方法

1.1临床材料收集我院健康体检人40例，其中男20例，女20例，年龄在18-65岁，平均年龄（40±12）岁，血常规检查各项指标正常，EDTA-K2依赖性血小板减少患者4例，除血小板检查减少外，其余肝、脾、淋巴结无肿大，皮下黏膜无出血。

1.2仪器法XS_800i血细胞分析仪试剂是厂家配套的试剂和质控品，EDTA-K2抗凝静脉血2ml，109mmol/l枸橼酸钠抗凝血2ml，分别混匀，严格按XS_800i血细胞分析仪标准操作规程全血模式测定，记录PLT。每份标本同时涂片两张，进行瑞—吉染色。

1.3手工法按第三版《全国临床检验操作规程》，准确吸取手指末梢血20μl加入到0.38ml草酸铵血小板稀释液中充分混匀，待完全溶血后再次混匀，取血小板悬液1滴冲入计数池内，静置10-15min后，高倍镜计数血小板数量。

2结果

2.140例正常人EDTAK2抗凝血、枸橼酸钠抗凝血不同时间血小板计数见表1。

3讨论

乙二胺四乙酸（EDTA）能与血液中Ca2+结合成螯合物，而使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。EDTA-K2具有对血液标本中的细胞形态和计数影响非常小等优点，国际血液学标准化委员会（ICSH）1993年建议将EDTA-K2作为血常规检验的抗凝剂。随着全自动血细胞分析仪的推广使用，EDTA-K2已在临床广泛使用[1]。

EDTA-K2作为血细胞分析的常用抗凝剂有很大的优点，但对有些患者或者健康人的血液的血小板有一定的聚集作用，造成假性血小板减少，分析原因有以下两点：①EDTA-K2可使血液发生免疫介导，产生冷抗血小板抗体，使血小板互相发生凝集现象，这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体还能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时这种与血小板结合后的自身抗Fc端又可与淋巴细胞或单核细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象。②EDTA-K2可导致血小板活化，使血小板形态发生改变，导致血小板膜表面某种隐匿性抗原表位发生构象改變，这些活化的血小板与血浆中的自身抗体结合后，激活了细胞膜中的某些能活化血小板纤维蛋白的原受体的活性物质，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团[2]。这两种原因在表象上都表现为血小板的体积增大，EDTA依赖性假性血小板减少症可见于正常人，但多数情况下伴某些疾病，如癌症、自身免疫性疾病、肺心病、肝病及一些原因不明的疾病。虽然发生率不高，但应加以重视。

当临床上发现血小板减少而无出血症状的患者，应首先做血涂片，观察血小板的大小形态，聚集，确定是否为EDTA-K2引起的血小板聚集，再用枸橼酸钠抗凝静脉血做血小板计数，10分钟内做完，获得准确的血小板计数，虽然手工法也可以准确计数，但较繁锁，影响因素也较多，可作为复查的方法。

参考文献

[1]邦显，刘思景.抗凝剂EDTA-K2引起的血小板减少原因分析[J].检验医学与临床，2011，8（19）：2357.

[2]高琼.EDTA盐依赖性血小板减少症1例分析[J].中国误诊学杂志，2012，12（3）：584.