不同物质对唐菖蒲继代培养试管苗芽增殖的影响

2014-04-29 19:01申芸萍
安徽农业科学 2014年19期

申芸萍

(互助县农业示范园区管委会,青海互助 810500)お

摘要

[目的]探讨不同物质对唐菖蒲继代培养试管苗芽增殖的影响。[方法]在唐菖蒲试管苗芽增殖过程中,添加不同植物生长调节剂、碳源、活性炭,考察不同物质对芽增殖影响。[结果]浓度0.5 mg/L奈乙酸与浓度1.0 mg/L的6-苄基腺嘌呤植物生长调节剂组合下,苗增殖效果好而且苗较壮,增殖倍数为5。0.2%的活性炭,在30 d内有利于试管苗株高的增加,但对芽的诱导无明显作用。[结论]用50 g/L市售白糖代替40 g/L纯蔗糖作为培养基的碳源是可行的,这样降低了配制培养基的成本,而且对试管苗的增殖和质量无┯跋臁*

关键词唐菖蒲(獹ladiolus gandavensis 玍an Houtte);继代培养;芽增殖

中图分类号 SB188文献标识码 A文章编号 0517-6611(2014)19-06172-02

Effects of Different Materials on Subculture Plantlet Bud Proliferation of 獹ladiolus gandavensis

SHEN Yun瞤ing

(Huzhu County Agricultural Demonstration Zone Administrative Committee, Huzhu, Qinghai 810500)

Abstract [Objective] To discuss effects of different materials on subculture plantlet bud proliferation of 獹ladiolus gandavensis. [Method] Adding different plant growth regulator, carbon source, active carbon in proliferation process of G. gandavensis tube seedlings, effects on bud proliferation were investigated. [Result] The proliferation effect is good andseedlings are strong under the plant growth regulators of 0.5 ﹎g/L NAA and 1.0 mg/L 6瞓enzyladenine, the proliferation times is 5. 0.2% active carbon is conductive for plant growth of tube seedlings, but it has no obvious effect on induction of bud. [Conclusion] 50 g/L sugar takes place of 40 g/L pure sucrose as carbon source of culture medium is feasible, which can reduce cost and have no effects on proliferation and quality of tube seedlings.

Key words獹ladiolus gandavensis; Subculture; Shoot proliferation

作者简介

申芸萍(1976-),女,土族,青海海东人,农艺师,从事农业技术推广研究。

收稿日期 20140605

唐菖蒲(獹ladiolus gandavensis 玍an Houtte)原种产于南非。花有单色和复色共5种,花冠呈漏斗形,是“世界四大切花”之一。试验通过对唐菖蒲继代培养的研究,以利于唐菖蒲的进一步扩繁,获得更多的种源。

1材料与方法

1.1 材料

供试材料为市售唐菖蒲“奥斯卡(Oscar)”的健壮植株茎尖。试验地点设在青海大学组培实验室。

1.2 方法

在无菌条件下,从健壮的唐菖蒲植株上,用镊子取下茎尖进行第一代试管苗的培养。然后将新长出的苗剪成1.5 cm长的切段,要求每个切段都已分化出一个芽。 然后将供试材料分别接种于基础MS培养基和生长调节剂6睟A、KT、NAA培养基中,每10 d记录试管苗增殖生长情况,培养室温度为24 ℃,湿度为78%,光照(1400~1600)lx,10~12 h/s,碳源和水质试验以市售白糖代替化学纯蔗糖作为培养基的碳源。

2 结果与分析

2.1不同生长调节剂对试管苗增殖的影响

2.1.1

不加生长调节剂对试管苗增殖的影响。由表1可知,试管苗在添加生长素的培养基上芽分化倍数均高于不添加任何物质的MS培养基,芽的长势,个数和株高也高于不添加任何物质的MS培养基上的。在基础培养基上,芽的增殖倍数仅为1.5,芽数为45个,苗高为5.3 cm。各项指标都远远低于添加了调节剂的培养基上所增加的值。

2.1.2

6-苄基腺嘌呤对试管苗增殖的影响。对添加生长调节剂的培养基上,不同生长调节剂的组合使用对芽增殖效果好于单一调节剂的使用。在添加一种生成素的情况下,添加6-苄基腺嘌呤的芽增殖数为2.4,苗高为6.4 cm,芽数为72个,而添加激动素的培养基芽增殖数为2.0,苗高为5.9 cm,芽数为60个;从数据可以看出,添加6-苄基腺嘌呤的芽增殖效果好于添加激动素的培养基。

2.1.3

不同生长调节剂组合对试管苗增殖的影响。生长调节剂组合使用的培养基上,不同的组合对芽增殖效果不同,NAA与6睟A的组合其增殖分别为5.4和5.1,苗高平均为9.0 cm,芽数平均为158个;而NAA与KT组合的培养基上芽增殖数为4.1和4.5,苗高分别为8.1和7.9 cm,芽数平均为129个;由此可以,知道NAA与6睟A的组合其效果均好于NAA与KT的组合效果。

相同的培养基组合中不同的浓度对芽的长势也不同,NAA和6睟A的组合中,0.5 mg/L NAA 和1.0 mg/L BA组合下,苗较粗壮,株高也明显高于0.5 mg/L NAA和0.5 mg/L BA组合下苗的长势;NAA和KT的组合中,MS+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L KT组合下无论是苗高,芽数还是芽增殖数均优于MS+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L KT组合。

通过试验说明,最适合唐菖蒲试管苗生长的生长素组合为0.5 mg/L奈乙酸与1.0 mg/L 6睟A。

2.2 不同碳源对试管苗增殖的影响

由表2可知,40 g/L市售白糖为碳源对切段进行培养,芽的分化数及增殖倍数都明显低于40 g/L的蔗糖,分化苗较长势弱。原因在于白糖不纯,碳源浓度不够,满足不了芽增殖生长的需要。以60 g/L的白糖作为碳源,芽增殖的个数,倍数及株高同样存在显著差异,原因在于给芽提供的碳源过多,反而抑制了芽的生长。但和40 g/L市售白糖相比,芽增殖倍数、个数、株高均有所增加;而以50 g/L的白糖作为碳源和40 g/L的蔗糖相比,芽增殖个数和倍数及株高均无显著差异,苗也壮,芽势也好,苗壮,可见唐菖蒲试管苗增殖培养基中,以50 g/L白糖作碳源是可行的。

表1 生长素对试管苗的影响

培养基组成 切段数じ 发芽な∥个 40天后增殖け妒∥倍 差异性ぃ0.5%) 苗高(CM)こな

MS∥mg/L 30 45 1.5A 5.3 最弱

MS+1.0∥mg/L KT30 60 2.0B 5.9 较弱

MS+0.5∥mg/L 30 72 2.4B 6.4 弱

6睟A

MS+NAA 0.5+ 30 162 5.4C 9.6 强

6睟A 1.0 mg/L

MS+NAA 0.5+ 30 153 5.1C 8.3 较强

6睟A 0.5 mg/L

MS+NAA 0.5+ 30 123 4.1D 7.9 中

KT 1.0 mg/L

MS+NAA 0.1+ 30 135 4.5C 8.1 中

KT 0.5 mg/L

注:试管苗长势标准:长势好的植株直径大于2 mm,正常绿色;长势中为植株直径在2.0~2.5 mm,浅绿色;长势差的植株直径1~2 mm,颜色发黄。

表2 不同碳源对试管苗增殖的影响

糖种类g/L 切段数じ 发芽数じ 苗高cm 40 d后增殖け妒∥倍 0.5%げ钜煨

蔗糖40 25 127 7.5 5.1 A

白糖40 25 90 5.6 3.6 B

白糖50 25 130 7.4 5.2 A

白糖60 25 99 6.5 4.0 B

表4活性炭对芽的影响

0.2%せ钚蕴 接种数じ 芽数じ 株高cm 增殖率け妒 差异显著性ぃ0.1%)

有 20 30 11.0 1.5 A

无 20 100 9.7 5.0 B

注:培养基为0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L BA。

在培养基中加入0.2%活性炭和未加入活性炭相比较得知,当加入活性炭或芽增殖倍数明显降低(表4)在20 d时才有芽的少量分化,经40 d的培养,芽增殖倍数仅为1.5,株高在接种后30 d内增加迅速,株高为11 cm,比未加活性炭的高出1.3 cm,主要表现在节间的增长上,并且长势弱,苗细长,叶色发黄,在30 d后株高增加相对于前期下降,随着时间的推移。加活性炭和不加活性炭的植株株高趋于相等。

从试验结果看活性炭对唐菖蒲试管苗芽的分化有抑制作用,是因为活性炭对生长调节剂起来吸附作用,大量文献表明活性炭可以抵消生长调节剂的作用,故苗长势弱,分化强度非常小。在培养前唐菖蒲试管苗株高增加迅速,主要是活性炭吸附了琼脂中的杂质及蔗糖在高温灭菌过程中降解产生的5-羟甲糠醛等的杂质,从而造成苗的徒长,后期由于上述作用减弱,徒长消除,所以株高与未加入活性炭的培养基上的株高趋于相等。试验说明0.2%的活性炭对芽增殖无作用。

3结论

唐菖蒲试管苗分化不仅时间长,而且量大,这是快繁的优势所在,但在继代培养过程中弱势化苗的出现也不容┖鍪印*

从市场效益分析,市售白糖可以替换化学蔗糖作培养基的碳源,替换的最佳组合为50 g白糖替换40 g蔗糖,这样的话试管苗培育的成本降低90%以上,对唐菖蒲的快繁作用┖艽蟆*

试验中,对活性炭的作用只作初步的研究,其浓度为0.2%是从大量资料查得,至于浓度是否得当有待于以后的试验研究。

参考文献

[1] 刘慧民,胡冰.花卉类植物组织培养技术发展概述[J].北方园艺,2000(1):62.

[2]师素恩.唐菖蒲体细胞胚发生和植株再生[J].北方园艺,1997(3):61-62.

[3] 刘文萍.脱毒唐菖蒲的微繁技术[J].中国林副特产,1997(4):32.

[4]赵秀梅,王红梅.唐菖蒲利用花瓣组培快繁试验初报[J].甘肃农业科技,1999(6):44-45.

[5] 曾小龙.不同培养基对虎头兰原球茎器官分化的影响[J].广东农业科学,1998(5):21-22.

[6] 黄家平,戴思兰.兰花组织培养研究综述[J].广东园林,1997(2):28-31.