临床免疫检测灰区判读研究

陈艳 郭天坤 王利华

【摘要】目的：酶聯免疫检测的灰区应该有一个可操作性“规定”，在没有一个统一规定的情况下，我们的实验室如何去规范操作，是我们实验室应该做的一件大事，不认真对待灰区的出现，就会引发和滋生。方法：通过114292例酶联免疫检测，总结出来灰区出现如何处理的路子-方法。结果：根据总结的方法完成制度管理和SOP文件，按照执行这些方法和文件，让我们在灰区出现时能够正确处理，近两年来，我们按照科室制定的制度执行操作，没有在灰区的问题上出现误差和失误。

【关键词】灰区；复检；标本

【Abstract】objective： enzyme-linked immune detection of grey area should have a maneuverability ＼"rules＼"， in the absence of a unified regulation， how to standardize the operation， in our laboratory is one of the lab should do something， not serious about the grey area， will cause and breeding. Methods： 114292 cases by enzyme-linked immune detection， summarized out way - method of how to deal with the grey area. Results： the method to complete the system management according to the summary and SOP files， according to implement these methods and file， let us can correctly handle， in the presence of grey area in the past two years， we according to the system performs operations， the department did not have errors and mistakes in the grey area issues.

【key words 】gray area re-inspection specimens

【中图分类号】R722.12 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）10-0021-02

酶联免疫检测，这个定性试验，经过多年的实验室应用，为检验事业的发展、为免疫性疾病患者解决了不可磨灭的功劳，也为医务工作者争得了名誉。但对于检验工作者，也带来了一些不好解决的难题—灰区[1] [2] [3]问题；酶联免疫检测结果报告，按照相关规定，只能出具阴性或者阳性报告，模棱两可的报告确实难倒了检验工作者。用ELISA方法检测的各种免疫试验，如乙肝两对半、丙型肝炎、艾滋病、丁肝、戊肝、ANA、甲肝等，都存在着灰区的问题，我们如何在工作上，对这个问题进行分析处理，我们做了这方面的研究分析。

1、对象与方法

1.1、研究对象

选择2012年至2013年，两年在我院的乙肝表面抗原48997例、丙型肝炎抗体检测29230例、艾滋病抗体检测31034例、丁型肝炎抗体483例、戊型肝炎抗体检测661例、甲型肝炎抗体检测1110例，ANA2777人次，检测样本共计114292例。

1.2、方法

其中乙肝两对半是用达安的时间分辨检测的，灰区相对要少些；ANA采用欧蒙酶联免疫检测试剂盒；其他项目全部采用北京万泰的酶联免疫检测试剂盒。

2、结果

通过两年的检测，共检测出灰区157例，其中乙型肝炎表面抗原36例，采用的是时间分辨检测，检测灰区值最高0.58，最低0.43。下面的项目采用的酶联免疫检测；HIV11例，丙型肝炎抗体测定12例，丁肝4例，戊肝6例，甲肝11例，ANA77例；检测的SCO值最高1.1453，最低0.8571。

3、讨论

3.1、酶联免疫法和时间分辨荧光分析法都存在灰区，灰区如何处置，我们通过检测数据；把乙型肝炎表面抗原设定为0.425～0.575ng/L为灰区，乙肝表面抗原灰区的结果应检测其HBe抗体和HBc抗体，特别是后者，如果HBc抗体是阴性的，则HBsAg的阳性基本不太可能，可以发阴性报告；如是阳性，则：将标本10000g，10min离心，然后复检[4] [5]（如果离心机没有g的标注，用10000转/min的高速离心也可达到这个目的）。如果高速离心后复检为阴性，应报告阴性结果，若仍为弱阳性：应换用另一款比较公认的试剂，比如雅培Architect的化学发光法试剂，重新检测；如果没有这样的进口试剂，用其他厂家的HBsAg检测一下，如果是阴性，可发阴性报告，如果也是阳性，则需要慎重对待，可以进行血清HBV PCR检测，当然PCR阳性的话基本就可以发送HBsAg阳性报告，而PCR阴性也不能排除HBsAg阳性可能。所以，最后这种情形下确认HBsAg确实比较复杂。总之，乙肝的诊断是一个很考验临床知识的项目，要综合考虑，不可过于匠气，给患者带来不必要的负担。.

3.2、其他的酶联免疫法设定为S/CO在0.85～1.15之间为灰区，在灰区内的检测数据进行复查，根据复查结果进行判断，如果复查仍然在灰区，担心标本污染；为了严谨，保证结果质量，体现全面质量管理的理念。写上S/CO值，告诉临床医生一定要注意该病人了；模板：“该标本检测结果为弱阳性，S/CO=*.**，建议结合临床情况诊断或选择其他方法做确认试验。”不同项目也有不同的描述，如果是有诊断意义的指标，备注后面可以说明定期复查，建议一个月后复查之类的。 门诊患者，一是向患者说明，重抽标本复查。二是，如果患者不愿意重新采血复查，应在检验报告单上说明三个月后或定期复查。

3.3、科室根据ISO15189 [6]的有关规定，制定了SOP文件，写清楚了3.1的内容和复查操作规定。

综上所述，按照执行这些方法和文件，让我们在灰区出现时能够正确处理；近两年来，我们按照科室制定的制度执行操作，没有在灰区的问题上出现误差和失误。

参考文献

[1] Kearney H， Schneider T， Yiannakas MC， Altmann DR，Wheeler-Kingshott CA， Ciccarelli O， Miller DH.J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2014 Aug 5. pii： jnnp-2014-308241. doi： 10.1136/jnnp-2014-308241.

[2] Riera R， Becerro MA， Stuart-Smith RD， Delgado JD， Edgar GJ.Mar Pollut Bull. 2014 Aug 1. pii： S0025-326X（14）00450-0. doi： 10.1016/j.marpolbul.2014.07.014.

[3] Castellano G， Manzano ML.Gastroenterol Hepatol. 2014 Jul；37 Suppl 2：15-21. doi： 10.1016/S0210-5705（14）70064-0. Spanish.

[4] Leucht S， Helfer B， Hartung B.Cochrane Database Syst Rev. 2014 Jan 15；1：CD002832. doi： 10.1002/14651858.CD002832.pub3. Review.

[5] Hao Q， Shi X， Zhang X， Zhu J.Zhongguo Yi Liao Qi Xie Za Zhi. 2013 Sep；37（5）：373-5， 378. Chinese.