高春梅
【摘 要】 目的 探讨快速血浆反应素试验(RPR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体凝胶颗粒凝集试验(TPPA)三种方法的应用价值,制定出结合实际的梅毒螺旋体血清学检测方案。方法 同时采用RPR、ELISA、TPPA三种方法进行检测。结果 RPR、ELISA、TPPA三种方法联合检测的灵敏度和诊断符合率最高,漏诊率为0,特异度也高达98%。结论 RPR、ELISA、TPPA三种方法联合检测是临床工作中梅毒筛查和诊断的最佳方案。
【关键词】 梅毒;快速血浆反应素试验;酶联免疫吸附试验;梅毒螺旋体凝胶颗粒凝集试验
【中图分类号】 R275.3 【文献标识码】 A
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性性传播疾病。近年来其发病率有明显的上升趋势。目前临床诊断梅毒的血清学方法有两类:一类是检测梅毒螺旋体特异性抗体,有梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、ELISA、TPPA法等;另一类是检测非梅毒螺旋体抗体,有RPR、甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)等[1]。根据本实验室的具体情况和联合检测在梅毒诊断和疗效评价中的价值,本文分别采用RPR、ELISA、TPPA三种方法对362例梅毒患者进行检测,并对检测结果进行分析比较,找到目前梅毒检测最有效、最准确的联合方案。
1 对象与方法
1.1 研究对象 选取2010年1月至2013年6月来商丘市第一人民医院就诊的梅毒患者362例作为梅毒组,其中男性235例,女性127例。对照组为同期就诊的非梅毒患者150例。
1.2 试剂 RPR试剂盒(上海科华生物技术有限公司)ELISA试剂盒(上海科华生物技术有限公司)TPPA试剂盒(日本富士株式会社)。
1.3 仪器 酶标仪(TECAN freedom evolyzer),振荡器(TE-B型 江苏姜堰市康健医疗器具厂)。
1.4 检测方法 对所有标本同时进行RPR、ELISA、TPPA三种方法的检测,均需按照说明书严格操作。
根据实验结果,计算出灵敏度、特异度、漏诊率和诊断符合率等流行病学的评价指标。灵敏度=真阳性数/(真阳性数+假阴性数)×100%;特异度=真阴性数/(真阴性数+假阳性数)×100%;漏诊率=假阴性数/(假阴性数+真阳性数)×100%;诊断符合率=(真阳性数+真阴性数)/(真阳性数+假阴性数+真阴性数+假阳性数)
2 结果
2.1 梅毒组和对照组三种检测方法的结果见表1。
2.2 梅毒组和对照组三种检测方法及其联合检测结果的综合评价见表2。
3 讨论
RPR为非梅毒螺旋体抗原血清学试验,其检测原理是采用心磷脂作为抗原,检测血清中的心磷脂抗体[2]。由表2可以看出其灵敏度仅为32.3%,远低于其它两种方法。并且在某些疾病如疟疾、麻风、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等由于感染或免疫紊乱会使机体产生与梅毒相交叉的反应抗体,造成生物学假阳性[3],使诊断的符合率较低,本次研究仅为51.8%。但是RPR的滴度与梅毒的活动性有关,可用作定量实验,由于检测梅毒的复发与临床治疗的效果的监测。
TP-ELISA是利用基因重组梅毒螺旋体的特异性抗原包被微孔反应板,采用双抗原夹心法检测梅毒螺旋体特异性抗体。此方法易于自动化,可用于大批量的检测。是目前临床上常用的一种筛查和检测梅毒的方法[4,5]。由表-2看出,TP-ELISA的灵敏度、特异性、漏检率等各项指标较RPR都有明显的提高。
TPPA是将梅毒Nichols株的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒子上。这种致敏粒子和血清中的梅毒螺旋体抗体进行反应发生凝集,产生粒子凝集反应。此方法对梅毒螺旋体抗体检测具有高度的特异性和灵敏度。由表-2可见,TPPA的特异性高达100%。此方法是目前公认的梅毒确证实验。但此方法操作复杂,结果需人工判定,无法保存原始数据,不易于自动化,限制了临床其大规模标本的筛查[6]。
由于梅毒检测方法都存在一定的缺陷,使得梅毒诊断的准确性受到了限制,并由此可能牵涉到一系列的社会和法律问题。因此,选择先进的检测方法、合理检测程序以提高梅毒诊断的准确性是十分必要的[7]。
本次研究发现TPPA和ELISA在检测梅毒螺旋体抗体方面与RPR比较都有较高的灵敏度和特异性,漏诊率远远低于RPR。特别是三种检测方法联合检测后,对梅毒的漏诊率为0,大大地降低了梅毒传播的风险。而且梅毒患者即使经过正规的治疗其特异性梅毒螺旋体抗体仍持续存在,甚至可终生存在。因此,TPPA和ELISA检测阳性有可能是既往感染,也有可能是正在感染。而这两种情况可以用RPR来加以区分。
综上所述,RPR、ELISA、TPPA三种方法的联合检测是目前梅毒检测灵敏度最高;漏检率最低;诊断符合率最高的方案。
参考文献
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