143例育龄人群地中海贫血基因诊断结果的分析

【摘 要】目的：了解本县地中海贫血基因型的分布情况，为本县育龄人群优生优育提供遗传咨询。方法：采用PCR和反向斑点杂交技术检测293例筛查阳性标本。结果：293例中143例基因诊断为地中海贫血携带者，α-地中海贫血基因携带者98例（其中HbH病4例），β-地中海贫血携带者37例，α-地贫复合β-地贫携带者8例 。结论：广泛宣传地贫知识、扩大筛查范围、加强基因诊断是地贫高发区提高人口质量、阻断重型（包括中间型）地贫患儿出生的有效途径。

【关键词】地中海贫血；基因诊断； 筛查

【中图分类号】R556 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）02-0574-02

地中海贫血是一组严重威胁人类健康的致死、致残的遗传性血液病，该病在我国南方有较高的发病率，广西地区α-和β-地中海贫血的发病率最高，其中α-地中海贫血基因携带率17.75%，β-地中海贫血基因携带率6.54%[1]，每年重型地中海贫血出生新生儿>3000人（包括中间型地中海贫血）[2]，而重症地贫目前尚无理想的治疗方法且需付出高昂的代价，预防措施是通过基因诊断阻止重型地贫患儿的出生。地中海贫血基因突变有明显的地域群体差异性，现将 143份诊断结果分析如下：

1 研究对象和方法

1.1 研究对象、标本采集和保存

在宾阳妇幼保健院进行孕检、婚检和全县各乡镇卫生院RBC指标MCV和（或）MCH筛查阳性的孕妇及其配偶共293例，每例均是自愿检查并签订地贫基因诊断知情同意书。抽取RBC指标筛查阳性的患者静脉血4ml，2 ml置ETDA-K2抗凝管抗凝2-8℃保温运送本地区指定的产前筛查中心，未能及时送检标本4℃冰箱保存，一周内送检，另2ml用ETDA抗凝做血红蛋白分析。

1.2 方法

采用全自动血细胞分析仪分析RBC指标（MCV、MCH），血红蛋白组分分析采用Bio-RadVARIANTTMⅡ HPLC血红蛋白分析系统。6种常见α-地中海贫血和17种β-地中海贫血基因检测送本地区指定的产前基因诊断中心。

1.3 筛查判断标准

血液红细胞指标MCV/MCH阳性标准：MCV<82fl、MCH≤27pg（广西卫生厅标准），血红蛋白HPLC分析HbA2正常值2.8%，HbA2>4.0%疑为β-地贫，其他类型血红蛋白参照相应的HPLC分析数据库及色谱予以判断。

1.4 基因诊断检测类型 α-地中海贫血基因检测常见3种缺失类型（（即：东南亚缺失型（--SEA/）、右缺失型（-α3.7/）、左缺失型（-α4.2/）和3种非缺失类型类型（即：αcs/α、αQsα/、αWsα/），β-地中海贫血基因检测中国人常见17种点突变类型即：CD41-42、CD71-72、CD27-28、CD14-15 CD31、CD17、CD43、Int、CAP、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、IVS-Ⅱ-654、βE、-32、-29、-28、-30。

2 结果

293例RBC指标（MCV、MCH）和/或低于判断标准的双阳夫妇中，检出α-地贫98例（包括HbH病4例）。β-地中海贫血37例，诊断为β-地贫携带者的HbA2均≥4.1%，α-地中海贫血复合β-地中海贫血携带者8例HbA2均≥5%，HbCS、HbH病全部检出出CS、HbH，基因检测6中常见类型α-地中海贫血均被检出，检出5种β-地中海贫血突变位点，4例HbH病的基因型为：--SEA/-α3.71例、--SEA/ -α4.21例、--SEA/αcsα 2例。143地中海贫血基因诊断结果见下表一和表二：

3讨论

293份RBC表型筛查阳性标本，有143例基因诊断为地中海贫血基因携带者，确诊率占地中海贫表型筛查阳性的48.81%（143/293），尤其β-地贫携带者初筛和基因诊断完全吻合，充分证明在地中海贫血高发区对育龄人群大规模实行RBC指标（MCV、MCH） 筛查和血红蛋白初诊的重要性。143例地中海贫血基因携带者中，α-地中海贫血占68.5%（98/143），以--SEA/、αc s α/、-α3.7/ 3种类型多见，结果与报道的南宁[3]、横县[4]、梧州[5]相似，其中非缺失型α-地贫也占到27.66%与广州的相同[6]，而αcsα/高于αWsα/，与有关资料不同[7]，原因可能是αcsα/能引起较重的血液学表型而被纳入基因确诊的范围有关，轻型α-地贫、轻型β-地贫、α复合β地贫和中间型地贫一般引起MCV、MCH的明显变化，表现出典型的小细胞低色素性贫血，临床上相对不容易漏诊，而静止型地贫的 MCV、MCH通常都没有明显异常，临床上极容易漏诊，所以当配偶基因诊断为轻型地贫时，另一方必须做地贫基因诊断以避免中间型地贫患儿的出生（此型患者临床表现轻重不一，轻者只有轻度贫血，重者需要依靠输血才能维持生命），但由于地贫知识的缺乏和没有足够的重视，没有表型阳性的一方通常忽视医生的建议而不做基因诊断。37例β-地中海贫血携带者检出5种基因突变类型，以CD41-42和CD17的突变为主，而较少见的IVS-Ⅰ-1（G>T ）在送检标本不多（293份）的情况被检出与有关资料不同 [8]，说明地中海贫血突变基因具有高度的异质性，某些突变甚至表现出明显的地域性或群体特异性。广西是α和β地贫高发区，必然存在较多见的α地贫和β-地复合形成的遗传类型，由于α-复合β-地贫表型筛查表现为轻型β-地贫的特征，因此在进行基因诊断和遺传咨询时，对筛查为β-地贫的携带者一定考虑合并α-地贫的可能。缺铁性贫血和轻型、中间型α、β地贫都表现小细胞低色素性贫血，而缺铁性贫血在妊娠中较常见，基因诊断能明确病因对症治疗，从而避免滥用补血剂和感染时误服氧化性药物，而且对地贫携带者的保健提供指导和及早发现地贫基因遗传家族也具有重要意义。现今广西的免费筛查仅限于婚检人群，基因诊断补助对象也仅限于表型筛查双阳的夫妇，而该地区地贫和异常血红蛋白病总携带率高达24.55%，同型地贫婚配的发生率也较高，同时如今临床的基因检测也存在缺陷，只检测我国95-98%的地贫基因，所以有关机构支持和推进地中海贫血相关研究就显得非常重要，由于静止型、轻型地贫携带者的生理、智力、寿命都不受影响无需治疗，而重型、中间型地贫却致死、致残，如果把筛查范围扩大到新生儿、儿童、青少年，阳性者告知其进行基因诊断并出具检测卡，并提供将来婚配遗传风险咨询，让公众广泛认识地贫是可防可控的遗传性疾病，提高基因诊断与产前诊断重要性的认识，是预防重型地贫患儿出生的有效途径。

参考文献：

[1] 尹晓林，张新华.地中海贫血高发地区的贫血性疾病诊断思维[J].医学与哲学（临床决策论坛版）2010.3（12）

[2] 徐湘民，张新华，陈荔丽. 地中海贫血预防控制操作指南[M].人民军医出版社，2011年3月第一版：P26.

[3] 张新华，周英杰，李平萍等.广西南宁市农村育龄人群地中海贫血筛查及基因型和血液参数分析[J].中华流行病学杂志，2006，27（9）：769.

[4] 黄忠，吕福通，张天朗等.11446对新婚夫妇a-地中海贫血筛查结果分析血[J].中国优生与遗传，2011，19（11）：115.

[5] 余永雄，黄丽，陈唯.梧州婚配群体的a-地中海贫血携带者筛查与基因诊断分析[J].重庆医学，[2012，41（10）：1002.

[5] 屈艳霞，陈桂兰，唐盈等.101非非缺失型a-地中海贫血基因分析[J].中国优生与遗传，2012，20（8）：19.

[6] 徐湘民，张新华，陈荔丽， 地中海贫血预防控制操作指南[M].人民军医出版社，2011：P29.

[7] 王珺，云妙英，崔箭，广西壮族地区β-地中海贫血的研究进展[J].中央民族大学学报（自然科学版），2010，19（2）：81.

[8] 徐湘民，张新华，陈荔丽. 地中海贫血预防控制操作指南[M].人民军医出版社，2011年3月第一版：P20.

作者简介：

文谨，女，主管技师，研究方向：医学检验，Email：2771882359@qq.com