分光光度法测定植酸含量

郝红英　周芳　周彩荣　叶文见

摘要 [目的] 为了寻找适合于标准植酸的测定及微量测定的方法。[方法] 采用可见分光光度法， 测定植酸的含量。[结果] 在标准曲线下，植酸浓度在0～32 μg/ml范围内与吸光度呈良好线性关系，方程为：Y=-2.284 2X+0.384 1（R=0.997 3），平均回收率为97.35%，RSD为4.82%（n=4）。[结论]该方法操作简便、快速、准确，可作为植酸的定量分析方法。

关键词 植酸；含量；可见分光光度法

中图分类号S121文献标识码A文章编号0517-6611（2014）07-01907-01

植酸是一种重要的有机磷系添加剂，具有独特的生理功能和化学性质，在食品、医药、金属防腐、日化工业及塑料加工等方面具有广泛的应用[1]。植酸的测定方法主要有硝酸钍滴定法、测磷分光光度法、高压液相色谱法、测铁分光光度法[2-5]。其中，硝酸钍滴定法操作简单快速，但结果偏高；测磷分光光度法测定准确度高， 精密度好，但硝化较麻烦；高压液相色谱法测定结果准确，但仪器昂贵；测铁分光光度法采用植酸为标准，测定准确度与测磷法相近， 但它无需硝化，操作简便，适合于有标准植酸的测定及微量测定。该研究采用三氯化铁比色法测定植酸含量。

1材料与方法

以磺基水杨酸为显色剂，在505 nm波长下，pH为2～3左右的酸性介质中，磺基水杨酸与Fe3+形成紫红色络合物，可满足铁含量测定的要求。在酸性介质中植酸能与三价铁盐专一定量沉淀，沉淀形式为[（C6H6）（OH）H3（PO4）5]3Fe7，而不受其他酸溶性磷的影响。滤去沉淀物，用紫外分光光度计测定剩下铁的浓度，即可测得与菲丁结合的铁浓度[6-7]。

取植酸提取液2 ml，加入浓度15%TCA 2 ml，在10 ml硬质玻璃试管中混匀，于4 ℃冰箱中静置2 h后，4 000 r/min离心30 min；吸取上清2 ml，用0.75 mol/L NaOH调节pH为6.0～6.5，加蒸馏水至30 ml，混匀。取3 ml稀释液，加1 ml浓度0.3%磺基水杨酸、浓度0.03%FeCl3·6H2O试剂，混匀后于505 nm处比色。

植酸含量=100×0.384 1-吸光度12.284 2

2结果与分析

2.1入射光波长的选择入射光的波长应根据吸收光谱曲线，以选择溶液具有最大吸收时的波长为宜。取7号液，以1号空白液为参比溶液，扫描出最大吸收波长为505 nm。

2.2显色时间的选择准确吸取一定量的试样，每次只改变一个时间因素，测定吸光度（A），选出适宜的显色时间。由图1可知，显色时间以15～20 min为宜。

图1吸光度与显色时间的关系2.3酸度的影响酸度对测定结果有较大的影响。随着pH的变化，磺基水杨酸与Fe3+的显色反应呈现不同的颜色。在pH为2～3时，生成紫红色络合物；在pH为4～7时，生成棕橙色络合物；在pH为8～10时，生成黄色络合物。所以，在显色反应时，应严格控制pH。该试验选用的pH为2～3。

2.4 工作曲线分别取0.1 g/L 植酸标准液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.4 ml于10 ml 玻璃试管中，分别加蒸馏水3.0、2.8、2.6、2.4、2.2、2.0、1.6 ml，分别加1 ml浓度0.03%FeCl3·6H2O、浓度0.3%磺基水杨酸试剂，摇匀，待测。 在505 nm处，以1号为参比溶液，测定所配制的2～9号溶液的吸光度，并作出工作曲线（图2）。按照确定的试验条件，加入标准植酸，测定回收率。由表1可知，4个样品的添加量的回收率范围为93.3%～104.0%，总平均为97.35%，表明采用三氯化铁比色法测定标准植酸的含量时回收率较好，结果稳定。