荣丽红
【摘 要】 目的: 研究药物转运体SLO1B1 521T>C和药物代谢酶CYP3A4*18的联合突变对口服降糖药那格列奈药效学的影响。方法 :对21名健康志愿者(6位SLCO1B1 521TT/CYP3A4基因型,7位SLCO1B1 521TT / CYP3A4*18基因型,3位SLCO1B1 521TC/CC/CYP3A4基因型,5位SLCO1B1 521TC/ CYP3A4*18基因型)单次口服120mg那格列奈,分别在给药前和给药后0.25,0.5,0.75,1,1.5,2,3,4,6,8h采血,用自动生化分析仪进行血糖浓度分析。结果:单一的SLO1B1 521T>C多态和CYP3A4*18多态对于那格列奈的降血糖效果与野生型对照组没有统计学差异。联合突变组在最大血糖升高值,0-4h和0-8h的血糖浓度平均变化值与野生型组不存在显著差异,但是在最大血糖降低值与野生型对照组和SLO1B1 521T>C突变组存在显著差异(P=0.034 P= 0.041)。 结论:在健康受试者, SLO1B1和CYP3A4联合突变对那格列奈降血糖效果产生显著影响;但是在2型糖尿病病人中,有关影响需要进一步的研究。
【关键词】 那格列奈 SLO1B1 CYP3A4,多态性 血糖浓度
【中图分类号】 R917 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-8801(2014)03-0308-02
那格列奈是一种新型的快速胰岛素促泌剂[1],在肝脏可被CYP3A4和CYP2D6.所代谢,但其中CYP3A4的作用较突出[2]。研究表明,CYP3A4具有遗传多态性,CYP3A4*18是一种新的突变单倍型,文献报道CYP3A4*18基因型者口服那格列奈后,药物清除率等药动学参数较之于野生型个体显著降低;但在一项药效学研究中发现,服用那格列奈后,虽然CYP3A4*18个体AUC等药动学指标与野生型存在差异,但血中葡萄糖,胰高血糖素,胰岛素水平在CYP3A4不同基因型之间却没有显著差异[3]。有机阴离子转运体1B1(OATP1B1, 也称 OATP-C、OATP2),是摄入型转运体中的一大类,可吸收和转运多种内源性物质和药物进入肝细胞进而代谢和清除之,OATP1B1拥有非常广泛的底物,包括降糖药和降脂药[4]; 该基因具有高度多态性,其中SLCO1B1 521T>C,也就是 *5, *15 或 *17单倍型,有研究发现此突变引起那格列奈的血浆浓度显著升高,这个结果揭示OATP1B1介导的主动转运可能在肝脏对那格列奈的摄取中发挥重要作用。
那格列奈最为显著的效应是降低餐后血糖,SLCO1B1是转运药物进入肝细胞的主要载体而CYP3A4是那格列奈的主要代谢酶,药动学的差异在一定程度上既与这个转运系统的多态性表达有关也与药物代谢酶的多态性有关[5],前已述 SLCO1B1 和 CYP3A4多态性都可以影响那格列奈的药动学参数,但是SLCO1B1 521T>C以及SLCO1B1 521T>C与CYP3A4*18的联合突变对那格列奈的疗效是否产生影响国内目前尚无系统的相关研究。我们的研究旨在查明SLCO1B1 521T>C ,CYP3A4*18突变以及二者的联合突变对那格列奈的引起的血糖降低在不同基因型个体是否存在差异。
1 方法
1.1 实验对象
我们对322名健康志愿者进行了SLCO1B1 521T>C ,CYP3A4*18突变基因型的筛查,所有受试者无心、肝、肾、消化道、代谢异常、神经系统疾病等病史,无药物过敏史,经生化和实验室检查未发现异常且在参与临床试验前均签署了知情同意书,告知实验前两周及实验期间不能服用其它任何药物,实验期间禁烟、酒及含咖啡等饮料。最终21人入选进入臨床药效学研究。基因组DNA提取采用标准酚-氯仿法,SLCO1B1 521T>C ,CYP3A4*18多态性的基因分型采用ARMS-PCR和PCR-RFLP(聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性)方法。SLCO1B1 521TT/CYP3A46人, SLCO1B1 521TT/ CYP3A4*18 7人, SLCO1B1 521TC/CC/CYP3A4 (521TC, 521CC)3人, SLCO1B1 521TC/CYP3A4*18 5人。空腹12小时后,单次给与120mg那格列奈,100ml温水送服,15分钟后,所有受试者统一给标准餐,10分钟后进餐完毕,告知静坐3小时45分钟,之后再给标准餐;分别在给药即刻、0.25、0.75、 1、 1.5、 2、3、 4、 6、 8小时抽取5 mL血样,用自动生化分析仪(东京日立公司7170S)进行血糖浓度分析。
1.2 药效学分析
那格列奈的药效学以血糖平均值,最大血糖升高值和最大血糖降低值表示,均值改变由时间浓度曲线中按照相应的间隔划分曲线下净面积获得。
1.3 统计学分析
表中所列数据均以均数±标准差表示。所有数据运用SPSS11.0软件进行分析。不同基因型者药效学差异采用两两比较单因素方差分析。P < 0.05被认为有统计学意义。
2 结果
入选受试者基本情况 .每个基因型组间在年龄,身高,体重,肥胖指数等方面无差异,我们发现,SLCO1B1,CYP3A4单个突变对那格列奈引起的血糖降低值无显著影响,(表1).联合突变可以引起血糖的明显改变(表2)在四种联合突变基因型个体中,最大血糖升高值和均值改变未发现明显差异。
3 讨论
2型糖尿病的发病机制被认为与胰岛素抵抗,胰岛素分泌机制损伤以及肝糖输出量增加有关。2型糖尿病的进展和餐后糖代谢调节失灵密切相关,新型的胰岛B细胞分泌激动剂,包括那格列奈,近年来已经逐渐成为治疗2型糖尿病的有效药物,无论是餐中还是餐后服用都可有效增加胰岛素的分泌,从而降低餐后血糖。SLCO1B1多态性与那格列奈的药动学密切相关,那么SLCO1B1 和 CYP3A4突变就可能共同成为那格列奈体内血药浓度的独立预测因子[6],所以在本研究中,我们把视角转向SLCO1B1 和 CYP3A4的联合突变,探讨这些变异是否会影响那格列奈的药效学如血糖降低等作用,结果发现,口服那格列奈后,单一的SLCO1B1 521T>C和CYP3A4*18突变都不能改变血糖降低水平,最大血糖升高值和均值改变在四种联合突变的不同基因型个体间没有差异,但是联合突变组的最大血糖降低值与野生型对照组和SLO1B1 521T>C突变组存在显著差异(P=0.034 ,P=0.041)。本研究提示在临床用药过程中,联合突变基因型个体服用那格列奈后,最大血糖降低值偏高,尤其是SLCO1B1 521TC/CYP3A4*18 基因型个体血糖降低幅值较大,因此发生低血糖反应的机会可能与其他基因型者存在差异,应该给与足够重视。
參考文献
[1]詹伟彬,黄公才.那格列奈治疗新诊断2型糖尿病临床效果观察. 实用医学杂志,2007,23(8):1240-41
[2]Kirchheiner J, Roots I, Goldammer M, et al. Effect of Genetic Polymorphisms in Cytochrome P450 (CYP) 3A4 and CYP2C8 on the Pharmacokinetics of Oral Antidiabetic Drugs. Clin Pharmacokinet, 2005, 44 (12):1209-1225.
[3]Niemi M, Backman JT, Kajosaari LI, et al. Polymorphic organic anion transporting polypeptide 1B1 is a major determinant of repaglinide pharmacokinetics. Clin Pharmacol Ther, 2008, 77(6):468-478.
[4]Ortiz MG, Salazar EH, Abundis EM, Effect of the administration of a single dose of nateglinide on insulin secretion at two different concentrations of glucose in healthy individuals. Journal of Diabetes and Its Complications, 2005, 19:356– 360.
[5]Zhang W, He YJ, HanCT, et al, Effect of SLCO1B1 genetic polymorphism on the pharmacokinetics of nateglinide. Br J Clin Pharmacol, 2008, 62(5): 567–572.
[6]Kirchheiner J, Meineke I, Muller G, et al. Influence of CYP3A4 and CYP2D6 Polymorphisms on the Pharmacokinetics of Nateglinide in Genotyped Healthy Volunteers. Clin Pharmacokinet 2007, 43 (4): 267-278.