鼻舒适片质量标准研究

阳文武，肖 琦

（重庆市万州区食品药品检验所，重庆 万州 404100）

鼻舒适片是由苍耳子、野菊花、鹅不食草、白芷、防风、墨旱莲、白芍等11味药组方，收载于《国家药品标准·中药成方制剂（第7册）》，具有清热消炎、通窍的功效，用于治疗慢性鼻炎引起的喷嚏、流涕、鼻塞、头痛，过敏性鼻炎，慢性鼻窦炎。原标准收载有3个鉴别项，包括扑尔敏的薄层和2个化学鉴别，检验项目不够全面，为更有效地控制其质量，提高标准，笔者采用薄层色谱法对方中苍耳子、野菊花、鹅不食草进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法对方中白芷的欧前胡素进行含量测定。现报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC－20A型高效液相色谱仪；硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂）；聚酰胺膜（青岛海洋化工厂）。欧前胡素对照品（批号为110826－201013，含量以99．6%计，供含量测定用）、蒙花苷对照品（批号为111528－200606）、苍耳子对照药材（批号为120947－200405）、野菊花对照药材（批号为 120927－200310）、鹅不食草对照药材（批号为121551－200902）均由中国药品生物制品检定所提供；鼻舒适片（广东省博罗先锋药业集团有限公司，批号分别为 000045，000057，000069）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 薄层色谱鉴别

苍耳子[1－3]：取本品 12片，加甲醇 25 mL超声处理 20 min，滤过，滤液浓缩至2 mL作为供试品溶液。另取苍耳子对照药材1 g及按处方比例除去苍耳子的阴性样品2 g，同法制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5～10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－冰醋酸－水 (4∶1∶5)上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，而阴性对照品溶液无干扰(图1 A)。

野菊花[1，4]：取本品 15 片，加甲醇 25 mL，超声处理 30 min，滤过，滤液浓缩至2 mL作为供试品溶液。另取野菊花对照药材1 g及按处方比例除去野菊花的阴性样品2 g，同法制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。再取蒙花苷对照品，加甲醇制成每1 mL含0．2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录Ⅵ B]试验，吸取上述4种溶液各2 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯－丁酮－三氯甲烷－甲酸－水(15∶15∶6∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 2%三氯化铝溶液，热风吹干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液和对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照品溶液无干扰（图1 B）。

鹅不食草[1，5－6]：取本品 15 片，加二氯甲烷 30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取鹅不食草对照药材1 g及按处方比例除去鹅不食草的阴性样品2 g，同法制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中国药典（一部）》附录Ⅵ B]试验，吸取上述3种溶液各 5 μL，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以石油醚（60～90 ℃ ）－ 二氯甲烷（3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照品溶液无干扰（图 1 C）。

2．2 含量测定[1]

2．2．1 色谱条件与系统适用性试验

图1 薄层色谱图

色谱柱：迪马 C18柱（250 mm ×4．6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 －水（60 ∶40）；流速：1．0 mL ／min；检查波长：300 nm。理论板数按欧前胡素峰计算应不低于3 000。

2．2．2 溶液制备

取本品 10片，除去包衣，研细，混匀，称取约 0．5 g，精密称定，置50 mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 10 mL，密塞，称定质量，超声处理（250 W，频率 33 kHz）1 h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。精密称取欧前胡素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含约20 μg的溶液，作为对照品溶液。按处方工艺制备不含白芷的样品，同供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

2．2．3 方法学考察

专属性试验：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各10 μL，依法进样测定。结果阴性对照品溶液无干扰，见图 2。

图2 高效液相色谱图

线性关系考察：分别精密吸取质量浓度为0．023 43 g／L的欧前胡素对照品溶液 1，5，10，15，20，25 μL，进样，测定峰面积，以峰面积对进样量进行回归，得回归方程 Y＝2×106X＋460，r＝0．999 7(n ＝6)。结果表明，欧前胡素进样量在 0．023 43 ～0．585 75 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

精密度试验：精密吸取对照品溶液，连续进样6次，每次10 μL。结果的 RSD＝0．98%（n＝6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，每2 h进样1次，连续进样5次。结果峰面积的 RSD＝1．2%，表明供试品溶液中欧前胡素在10 h内稳定。

重复性试验：取同一批样品6份，按样品溶液制备方法操作，测定欧前胡素峰面积。结果的 RSD＝1．8%，表明方法重复性良好。

加样回收试验：精密称取已知含量的样品6份，分别加入欧前胡素对照品适量，按2．2．2项下方法处理，依法测定，计算回收率，结果见表1。

表1 欧前胡素加样回收试验结果(n＝6）

2．2．4 样品含量测定

取本品3批，按含量测定方法进行测定，外标法计算。结果批号分别为000045，000057，000069的样品中欧前胡素的含量分别为 0．086，0．085，0．082 mg ／片。

3 讨论

提取溶剂选择：分别用50%甲醇、70%甲醇作为提取溶剂，结果表明以甲醇为提取溶剂所测得含量最高。

提取方式考察：对超声处理1 h及水浴回流1 h两种提取方式进行考察，结果表明以超声处理所测得含量较高。

超声处理时间考察：分别用甲醇超声30，60，75 min，结果表明超声处理60 min所测得含量较高，且与超声处理75 min所测得含量相当，故最终选择以甲醇超声60 min来制备供试品溶液。

检测波长的选择：取欧前胡素对照品溶液在200～400 nm波长之间进行紫外光谱扫描，测得其最大吸收波长为300 nm，故以300 nm为检测波长。

参考文献：

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：151，295，326．

[2]吕武清，龙新华．中成药中的药材薄层色谱鉴别[M]．北京：人民卫生出版社，1997：89．

[3]YBZ07342005－2009Z，国家药品标准·辛芩片[S]．

[4]吴爱銮，杨庆生，程永红，等．鼻舒适片的质量标准研究[J]．现代中药研究与实践，2006(6)：35 － 37．

[5]WS－10548（ZD －0548）－2002－2012Z，国家药品标准·鼻宁喷雾剂[S]．

[6]吴和珍，艾伦强，吴和鸣，等．鹅不食草的生药鉴定研究[J]．中药材，2009（2）：200 － 202．