加味天麻胶囊定性定量方法研究

伍 蓉

(溆浦县食品药品监督管理局，湖南 溆浦 419300)



加味天麻胶囊定性定量方法研究

伍 蓉

(溆浦县食品药品监督管理局，湖南 溆浦 419300)

目的：建立加味天麻胶囊的定性定量标准。方法：用薄层色谱(TLC)法对羌活、当归和独活进行定性鉴别；用高效液相色谱(HPLC)法测定加味天麻胶囊中天麻素的含量，采用Dikma Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)；流速：1.0mL·min-1；柱温：40℃；检测波长：220nm；进样量：10μL。结果：TLC法能明显检出羌活、当归和独活的特征斑点，无阴性药材干扰。天麻素进样量在5.03～100.6μg范围内线性关系良好，r=0.999 7，平均回收率为98.78%，RSD=0.74%,n=6。结论：该定性、定量方法简便、准确、重现性好，能有效控制加味天麻胶囊的质量。

加味天麻胶囊；质量标准；TLC；HPLC；天麻素

加味天麻胶囊是由天麻、当归、羌活、独活、玄参、木瓜、千年健等十五味中药制成的复方制剂，具有强筋骨、祛风湿、舒筋通络、活血止痛功效。用于中风经络引起的风湿痹痛、肢体拘挛、手足麻木、腰腿酸痛等症。天麻为方中君药，其有效成分为天麻素。建立可靠、准确、专属性强的质量控制方法，对提升该制剂质量与效价具有重要意义。

1 仪器与试药

日本岛津LC-20ATVP高效液相色谱仪。天麻素对照品(批号：110807-200705)、当归对照药材(批号：120927-200613)、独活对照药材(批号：1209407-200708)、羌活对照药材(批号：121405-200401)(均购自中国食品药品检定研究院)，加味天麻胶囊(由某医院提供，批号分别为201300509、201300912、201301004、201400305；每粒重0.25g)；乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯，水为超纯水。

2 薄层定性鉴别

2.1 羌活、当归、独活

取本品5粒，研磨制样备用；取缺羌活、当归、独活做阴性样品。再取羌活、当归、独活对照药材各2g，分别加乙醇10mL，在水浴上加热回流提取2h，放冷，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录 VI B)试验进行。阴性对照无干扰(图1)，再喷以8%磷钼酸乙醇溶液，于105℃烘约10min。供试品色谱中，在与独活、当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰，见图2。

3 天麻素含量测定

3.1 供试品溶液制备

取装量差异项下的本品内容物约1g，精密加入稀乙醇50mL，定量，加热回流，冷却，定量，补重，摇匀，滤过，精密量取滤液10mL，浓缩至近干，残渣加乙腈-水(3∶97)混合溶液溶解，转移至25mL量瓶中，用乙腈-水(3∶97)混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。同理制备阴性参照样品。对照品溶液取干燥至恒重的天麻素对照品10.06mg用甲醇溶解制备成浓度为50.3μg·mL-1的样本备用。

图1 羌活、当归、独活薄层鉴别

3.2 色谱条件

Dikma Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)；流速：1.0mL·min-1；柱温：40℃；检测波长：220nm；进样量：10μL。 理论塔板数按天麻素峰计算应不低于5 000。

3.3 专属性试验

分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10μL，注入液相色谱仪中，在天麻素对照品色谱相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收，对本品中天麻素含量测定无干扰。见图3。

图2 羌活、当归、独活薄层鉴别

图3 加味天麻胶囊高效液相色谱

3.4 线性关系考察

精密吸取浓度为50.3μg·mL-1的对照品溶液1、5、8、10、15、20μL，分别注入液相色谱器仪中，按上述色谱条件测定峰面积值。计算回归方程，天麻素回归方程为：Y=113 508 264X-40 825，r=0.999 7，天麻素进样量在5.03～100.6μg范围内线性关系良好。

3.5 精密度试验

精密吸取供试品(批号201301004)溶液10μL，注入液相色谱仪中，连续进样6次，分别测定各次峰面积，天麻素峰面积的RSD为0.76%。

3.6 稳定性试验

取供试品(批号201301004)溶液，分别在0，4，6，8，12，24h，进样10μL，测定色谱峰面积，结果天麻素峰面积的RSD为0.29%。表明样品溶液在所考察时间内稳定性良好。

3.7 重现性试验

取同一批供试品(批号201301004)，精密称取6份，按供试品测定项下方法操作，重复测定6次，测得天麻素平均含量为0.546 1mg·g-1，RSD为0.42 %。表明该方法重现性好。

3.8 加样回收率试验

取已知天麻素含量(批号201301004，天麻素含量0.546 1mg·g-1)供试品9份，每份1g，分别精密加入浓度为50.3μg·mL-1的天麻素对照品溶液8.0、8.0、8.0、10.0、10.0、10.0、12.0、12.0、12.0mL，按供试品溶液制备方法操作，测定加标样品中天麻素含量，计算回收率，结果见表1。

表1 回收试验结果 (n=9)

3.9 样品含量测定

取不同批号的样品，按供试品测定项下方法操作，测定天麻素含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果 (n=3)

4 结论

本试验建立的含量测定方法具有简便、灵敏、准确且专属性较强的优点，可有效控制加味天麻胶囊的产品质量，具有一定的实际意义。

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(责任编辑：宋勇刚)

Study on Quality Standard of Jiaweitianma Capsules

Wu Rong

(Institure for Food and Drug Control of XuPu，Hunan 419300,China)

Objective:To establish the quality control standards for Jiaweitianma Capsules. Methods:TLC of Notopterygium, Angelica sinensis，Angelica qualitative identifiction. Determination of gastrodin in Jiaweitianma Capsules. Epimed iun by HPLC. Column is Column C18(250mm×4.6mm，5μm) and amix ture of Acetonitrile of 0.05% phosphoric acid solution (3：97) as them obile phase.Flow: 1.0mL·min-1；Column : 40℃ ;The detection w ave leng th was a t 220 nm. Results:Accurately Astragalus Qualitative in were identified.A linear relationship of Icariin was good within 5.03 ～100.6μg (r=0.999 7). The averag e recove ry w as 98.78% with RSD 0.74% (n=6).Conclusion:The method is simple， accurate， reproducible and can be used for the quality contro l of Jiaweitianma Capsules.

Jiaweitianma Capsules.; Quality Standards; TLC; HPLC; Gastrodin

2014-04-18

伍蓉(1976-)，女，湖南省溆浦县食品药品监督局主管药师，研究方向为药物分析。

R284.2

A

1673-2197(2014)15-0012-03