化浊解毒愈疡煎治疗浊毒内蕴型胃溃疡大鼠实验研究

安福丽，杨 彬，郭喜军，刘胜春

(1.河北省中医院，河北 石家庄 050011；2.秦皇岛妇幼保健医院，河北 秦皇岛066000)



化浊解毒愈疡煎治疗浊毒内蕴型胃溃疡大鼠实验研究

安福丽1，杨 彬2，郭喜军1，刘胜春1

(1.河北省中医院，河北 石家庄 050011；2.秦皇岛妇幼保健医院，河北 秦皇岛066000)

目的：给予浊毒内蕴型胃溃疡大鼠灌服化浊解毒愈疡煎，检测相关指标，观察其对胃溃疡大鼠的影响。方法：采用随机数字表法，将60只健康大鼠分为6组，即正常组(A组)、模型组(B组)、雷尼替丁治疗组(C组)、化浊解毒愈疡煎低剂量组(Da组)、化浊解毒愈疡煎中剂量组(Db组)、化浊解毒愈疡煎高剂量组(Dc组)，分别给予相应药物灌服，观察各组大鼠胃黏膜溃疡程度，测定其溃疡指数、血小板活化因子(PAF)、降钙素相关基因肽(CGRP)值。结果：雷尼替丁治疗组及化浊解毒愈疡煎高、中、低剂量组均可降低大鼠溃疡指数，缩小溃疡面积，降低血浆PAF并升高CGRP值，且化浊解毒愈疡煎治疗组疗效优于雷尼替丁组，P<0.05，差异具有统计学意义。结论：化浊解毒愈疡煎是治疗浊度内蕴型胃溃疡的有效方剂。

化浊解毒愈疡煎；胃溃疡；实验研究

消化性溃疡(PU)是临床常见病、多发病，呈世界性分布。现代医学认为胃溃疡的发病取决于胃黏膜攻击因子和保护因子之间的平衡，而胃黏膜血流量调节是保持其完整性的重要决定因素[1]。当攻击因子增强，防御因子减弱时，平衡遭到破坏，从而导致胃溃疡发生。我院消化科从中医整体理论出发，辨证施治，通过分析大量消化性溃疡患者胃镜检查结果和中医证型对照研究，总结出浊毒内蕴在消化性溃疡发病机制中起着关键作用。本实验通过给予浊毒内蕴型胃溃疡大鼠模型灌服药物，检测其组织学及血浆PAF、DGRP等相关指标，探讨化浊解毒愈疡煎治疗浊毒蕴型胃溃疡的作用机制，为临床研究提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

实验动物：健康2月龄雄性Wistar大鼠60只，购自河北中医学院动物实验中心。适应性喂养7天，无异常表现者可入选。

实验药物：雷尼替丁胶囊(中诺药业有限公司生产，批号256120655)；化浊解毒愈疡煎，药物组成为白芍30g、茯苓20g、 公英15g、瓦楞子15g、煅牡蛎15g、柴胡12g、苦参6g、黄连6g、白术6g、甘草6g，由河北省中医院制剂科制成煎剂。

实验试剂：冰乙酸、戊巴比妥钠溶液由河北中医学院实验室提供，血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供。降钙素基因相关肽(CGRP)放射免疫试剂盒由北京普尔伟业生物科技有限公司提供。

实验仪器： MK3酶联免疫检测仪为芬兰雷勃公司生产；8 、12全自动洗板机为美国进口产品；离心机为上海安亭生产；SHB-D循环水真空泵、FJ-2021 R-放射免疫计数器等仪器均为河北省中医院检验科仪器。

1.2 实验方法

1.2.1 模型制备 将60只大鼠适应性喂养标准饲料7天，空白组10只大鼠饲养于正常环境中并给与正常饮食，其余大鼠分笼饲养于高热潮湿的环境下，饲以高脂高糖饮食，即在普通饲料喂养的基础上，每日每只给予10%蜂蜜、10%白糖混合饮料自由饮用，且隔日每只大鼠灌服油脂5g,并与油脂隔日灌服等量白酒，造模总时间共为15天，造模时大鼠分笼饲养，禁食24h，禁水8h，用无水乙醇及醋酸按2∶1比例混合，取0.2mL灌胃每只大鼠1h，模型制备成功后，继续高脂高糖饮食饲养7天。

1.2.2 药物制备 化浊解毒愈疡煎常规水煎2次，浓缩至药汁含生药1g/mL；雷尼替丁胶囊溶于生理盐水中制成0.3%混悬液，均置于冰箱中冷藏保存。

1.2.3 实验分组及给药 A组10只为空白组，B组10只造模不治疗，C组10只为雷尼替丁治疗组，Da组10只、Db组10只、Dc组10只分别为化浊解毒愈疡煎高、中、低剂量治疗组。C组大鼠用药剂量(mg/kg)=W×人用药剂量(mg/kg)，W为折算系数=6.25；D组分别按照22.1g/kg/d、11.2g/kg/d、5.5g/kg/d剂量给药[2]。正常组、模型组给予等体积蒸馏水，每天1次。

1.2.4 标本采集 治疗5周后，将大鼠处死，取大鼠血液做血清检测,取适当胃窦部组织做胃黏膜组织学观察并测定溃疡指数。

1.2.5 指标检测方法 胃黏膜组织学观察HE染色切片，光镜下观察溃疡及其周围区域组织学改变。溃疡指数测定：溃疡指数=溃疡最大长径×垂直于最大长径的最大宽径[3]。血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)及血小板激活因子(PAF)含量测定按照试剂盒说明步骤操作。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 胃黏膜组织学观察

模型组大鼠：胃溃疡处于进展期，部分溃疡深达肌层，表面炎性组织坏死渗出，炎症细胞浸润充血不明显。雷尼替丁组大鼠：溃疡处于愈合期，溃疡面被再生的腺体覆盖，边缘新生腺体部分呈囊状扩张，底部肉芽组织内新生血管丰富。 化浊解毒愈疡煎低剂量组大鼠：溃疡处于愈合期，溃疡面留有少量坏死组织，周围再生腺体呈不规则样，黏膜下肉芽组织增生，炎症细胞浸润，毛细血管丰富。中剂量组大鼠：溃疡处于愈合期，溃疡面积缩小，溃疡周围再生腺体数量增多，腺体间结缔组织减少，炎症细胞浸润，毛细血管丰富。高剂量组大鼠：溃疡处于愈合期，溃疡面积更小，边缘再生腺体部分囊状扩张且再生腺体数量更多，腺体间结缔组织减少，肉芽中胶原纤维数量增多，慢性炎症细胞浸润，新生毛细血管丰富。

2.2 溃疡指数(UI)测定

雷尼替丁组、化浊解毒愈疡煎低、中、高剂量组大鼠的溃疡指数均显著低于模型组(P<0.05)，差异具有统计学意义。化浊解毒愈疡煎低、中剂量组与雷尼替丁组大鼠溃疡指数比较差异无统计学意义(P>0.05)，但高剂量组大鼠溃疡指数显著低于雷尼替丁组(P<0.05)，差异具有统计学意义。提示不同剂量化浊解毒愈疡煎可发挥与雷尼替丁相同甚至更优的抗溃疡效果，见表1。

表1 各组溃疡指数比较

组别例数(n)UI模型组 1025.11±1.83雷尼替丁组 109.01±2.02*中药低剂量组108.27±1.69*△中药中剂量组107.43±0.89*△中药高剂量组106.07±1.12*◎

注：＊表示与模型组比较，P<0.05；△表示与雷尼替丁组比较，P>0.05;◎表示与雷尼替丁组比较，P<0.05。

2.3 各组大鼠血浆PAF、CGRP含量比较

与模型组相比，雷尼替丁组、化浊解毒愈疡煎中、低、高剂量组大鼠PAF、CGRP含量均显著升高(P<0.05)，差异具有统计学意义。与雷尼替丁组相比，中、低、高剂量组大鼠 PAF、CGRP含量均显著升高(P<0.05)，差异具有统计学意义，见表2。提示不同剂量化浊解毒愈疡煎均可显著提高大鼠PAF、CGRP含量，改善胃黏膜微循环，进而修护受损胃黏膜。

组别例数(n)PAF(mu/mL)CGRP(pg/mL)A1082.22±5.31128.34±6.17B10164.40±1.5785.18±3.21C10130.01±7.36*98.97±6.24*Da10110.34±5.24*△105.11±2.37*△Db1099.11±3.89*△113.21±2.63*△Dc1090.81±3.42*△121.00±2.53*△

注：A组为正常对照组，B组为模型组，C组为雷尼替丁治疗组，Da、Db、Dc分别为化浊解毒愈疡低、中、高剂量组。＊表示与对照组比较，P<0.05；△表示与雷尼替丁组比较，P<0.05。

3 讨论

化浊解毒愈疡煎为我院郭喜军教授根据几十年胃肠病治疗经验潜心研究而得的方剂，方中苦参、公英、黄芩、黄连清热燥湿、泻火解毒；柴胡、白芍疏肝解郁、柔肝止痛、抑木扶土；瓦楞子、牡蛎制酸、止痛、止血等，诸药合用共奏舒肝理气、和胃降逆、化浊解毒之功效。现代药理学研究表明，黄连、柴胡具有抗实验性胃溃疡的作用[4]，黄芩有较强的抗炎和抑制Hp作用，而白术对应激性胃溃疡有显著抑制作用，可降低胃液酸度，减少胃液及胃蛋白酶分泌等[5]。综上所述，化浊解毒愈疡煎为治疗浊度内蕴型胃溃疡的有效方剂，值得临床进一步深入研究。

[1] 李梦东.实用传染病学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2002:546-547.

[2] 郭喜军,鄂辉,张颜伟,等.化浊解毒消溃煎治疗大鼠胃溃疡的实验研究[J].四川中医,2011,29(5):23-26.

[3] 李廷荃,马贵同.补气活血中药对大鼠胃溃疡愈合过程中EGFR、bFGFR蛋白表达的影响[J].上海中医药杂志,2008,42(7):78-80.

[4] 陈波华,刑洪军,张影,等.浅述黄连等中药抑制幽门螺旋杆菌生长的试验研究[J].黑龙江医药,1996,9(2):115.

[5] 颜正华.中药学[M].北京:人民卫生出版社,2012:125,159-163,883.

(责任编辑：尹晨茹)

2014-02-27

安福丽(1976-)，女，河北省中医院副主任药师，研究方向为药物分析。

R285.5

A

1673-2197(2014)10-0012-02