红茴香挥发油和水提物镇痛抗炎作用比较的实验研究

王曙东刘文雅王争叶永富

（1.南京军区南京总医院，江苏 南京 210002；2.解放军73096部队医院，江苏 南京 210049）

红茴香挥发油和水提物镇痛抗炎作用比较的实验研究

王曙东1刘文雅1王争1叶永富2

（1.南京军区南京总医院，江苏 南京 210002；2.解放军73096部队医院，江苏 南京 210049）

目的：研究比较红茴香挥发油和水提物的镇痛抗炎作用，优化红茴香提取工艺。方法：通过小鼠尾压痛试验，观察红茴香挥发油和水提物的镇痛作用；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型，比较红茴香挥发油和水提物的抗炎作用。结果：红茴香水提物能提高小鼠尾压痛阈值，挥发油未见显著提高作用；挥发油和水提物均能显著减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，且挥发油对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀有显著的抑制作用。结论：红茴香水提部位的镇痛作用优于挥发油部位，但挥发油对于炎症的抑制作用强于水提部位，红茴香挥发油和水提部位均为镇痛抗炎的有效部位。

红茴香 挥发油 水提物 药理学

红茴香系木兰科八角属植物莽草（Illicium lanceolatum A.C Sm ith）干燥的根或茎的皮，具有止痛、消肿、抗炎等功效，常用于跌打损伤、风湿类风湿性关节炎的治疗[1-4]。常用剂型目前除民间偶有粉剂、酒剂口服或外用外，现有泰康药业独家生产红茴香注射液，为红茴香根、皮经水提醇沉制成的水溶液，提取过程损失了挥发油部分，而挥发油部位也可能为药用有效部位。我们对红茴香挥发油部位和水提部位的镇痛抗炎作用进行了比较研究，以期为改进红茴香注射液的制备工艺提供实验依据，现报道如下。

1 实验材料

1.1 药物与试剂红茴香挥发油（南京军区南京总医院制剂科自制，0.1g/mL，批号：20120816），红茴香水提物（南京军区南京总医院制剂科自制，0.1g/mL，批号：20120817），扶他林软膏（主要成分双氯酚酸二乙胺，10mg/g，北京诺华制药有限公司，批号：X2758），云南白药气雾剂（85g/瓶，云南白药集团有限公司，批号：2012006），角叉菜胶（Sigma公司，批号：9000-07-1），二甲苯（分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司，批号：050403）。

1.2 动物SPF级大鼠（180～220g），SPF级小鼠（18～22g），由南京江宁青龙山动物养殖场提供，动物合格证号：SCXK（浙）20080033。1.3仪器YLS-7B大鼠足跖容积测量仪（济南益延科技发展有限公司），YSD-4G型药理生理多用仪（安徽蚌埠医学院无线电二厂），ZH-YLS-3E型电子鼠尾压痛仪（淮北正华生物仪器设备有限公司），YLS-Q4型鼠耳打孔器（济南益延科技发展有限公司），FA1104N型电子天平（上海精密科学仪器有限公司）。

2 实验方法

2.1 红茴香挥发油和水提物的制备红茴香挥发油提取：取红茴香根皮粉碎成粗粉，加水适量浸泡12h，以磨口水蒸气蒸馏提取装置，用水蒸气蒸馏法提取，至挥发油不再增多为止，收集挥发油；提取的油水混合物用乙醚萃取，经无水硫酸钠干燥，离心后取上清液，得红茴香挥发油。红茴香水提物提取：取挥发油提取后的残留蒸馏液，过滤，浓缩，即得。

2.2 红茴香挥发油和水提物的镇痛作用实验观察药物对小鼠尾压痛痛阈值的影响[5-6]。将小鼠置于固定器内，尾部和四肢暴露在固定器外，待动物安静后进行实验。测痛前在小鼠尾部距尾尖1/3处作为施压点标记，施压时以小鼠出现挣扎或嘶叫作为疼痛反应指标，此压力值即为该鼠痛阈值，连测2次，取平均值作为对照值。共挑选50只小鼠，随机分成5组（10只/组），雌雄各半，即空白组、云南白药组（5mL/kg）、扶他林组（50mg/kg）、红茴香挥发油组（500mg/kg）、红茴香水提物组（500mg/kg）。给药时用微量注射器将药物涂抹于小鼠尾部受压点，5mL/kg，测定给药后15min、30min小鼠痛阈值，计算Δ痛阈（Δ痛阈=药后痛阈值-药前痛阈值）。

2.3 红茴香挥发油和水提物的抗炎作用实验

2.3.1 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响取雄性KM小鼠，随机分为5组（10只/组），即空白组、云南白药组（5mL/kg）、扶他林组（50mg/kg）、红茴香挥发油组（500mg/kg）、红茴香水提物组（500mg/kg）。给药时用微量注射器将药物涂抹于小鼠左右耳廓，5mL/kg。耳廓给药30min后，利用微量注射器将0.05mL二甲苯分别滴于右耳两侧，保证所滴位置一致，左耳作对照。3h后将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆形耳片，称重，求左右耳片重量之差作为肿胀度（mg），与空白组比较组间差异。[7]

2.3.2 对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响取SPF级雄性大鼠，随机分为5组（10只/组），即空白组、云南白药组（1mL/kg）、扶他林组（10mg/kg）、红茴香挥发油组（100mg/kg）、红茴香水提物组（100mg/kg）。于右后足踝关节处标记，利用足跖容积测量仪先测大鼠正常右后足跖体积。利用微量注射器将药物涂抹于右后足跖部，1mL/kg。足趾给药30min后，每只鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜胶0.1mL，并于给角叉菜胶后30、60、120、240、360min再测大鼠右后足跖体积（mL），并计算肿胀度（mL）。足跖肿胀度=给角叉菜胶后不同时间足跖体积-给角叉菜胶前同侧足跖体积。[8-9]

3 实验结果

3.1 红茴香挥发油和水提物对小鼠尾压痛痛阈值的影响见表1。结果表明：红茴香水提物在给药后15min能显著提高小鼠尾压痛阈值（P＜0.05），红茴香挥发油未见显著增加小鼠尾压痛阈值的作用。

表1 红茴香挥发油和水提物对小鼠压痛痛阈值的影响（±s）kg

表1 红茴香挥发油和水提物对小鼠压痛痛阈值的影响（±s）kg

注：与同时期空白组比较，*P＜0.05。

组别空白组动物数（只）10给药前痛阈值0.60±0.33给药后15min痛阈值Δ痛阈痛阈值0.70±0.31 0.10±0.29 0.59±0.25给药后30min Δ痛阈-0.02±0.41云南白药组10 0.67±0.15扶他林组10 0.52±0.27 0.77±0.35 0.25±0.42 0.95±0.35 0.42±0.36*红茴香挥发油组10 0.59±0.27 0.86±0.27 0.28±0.46 0.94±0.37 0.35±0.48红茴香水提物组10 0.59±0.30 1.05±0.35 0.46±0.42*0.95±0.42 0.36±0.47 0.81±0.19 0.13±0.22 0.95±0.30 0.27±0.25

3.2 红茴香挥发油和水提物的抗炎作用

3.2.1 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响见表2。结果表明：与空白组比较，红茴香水提物和红茴香挥发油均能显著减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀程度（P＜0.05）。

表2 红茴香挥发油和水提物对小鼠耳肿胀的影响（±s）

表2 红茴香挥发油和水提物对小鼠耳肿胀的影响（±s）

注：与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

组别动物数（只）剂量空白组肿胀度（mg）10 5mL/kg 10.07±3.86 10 5mL/kg扶他林组10 50mg/kg 4.71±3.01**红茴香挥发油组10 500mg/kg 5.29±3.57*红茴香水提物组10 500mg/kg 5.47±4.84*云南白药组5.44±4.89*

3.2.2 对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响见表3。结果表明：与空白组比较，红茴香挥发油于给药后30min能显著减轻大鼠足跖肿胀程度（P＜0.05），红茴香水提物组大鼠足跖肿胀程度未见明显减轻。

表3 红茴香挥发油和水提物对大鼠角叉菜胶足跖肿胀度（mL）的影响（±s）

表3 红茴香挥发油和水提物对大鼠角叉菜胶足跖肿胀度（mL）的影响（±s）

注：与空白组比较，*P＜0.05。

组别动物数（只）剂量空白组30min 10 1mL/kg 60min 2.20±0.54 120min 240min 2.30±0.80 360min 1.89±0.59 1.85±0.421.74±0.67 10 1mL/kg扶他林组10 10mg/kg 1.72±0.43*1.67±0.49*1.78±0.39 1.50±0.30*1.58±0.26红茴香挥发油组10 100mg/kg 1.66±0.33*1.79±0.45 1.79±0.37 1.76±0.61 1.95±0.77红茴香水提物组10 100mg/kg 1.81±0.60 1.99±0.72 1.83±0.57 1.89±0.56 2.03±0.80云南白药组1.92±1.00 2.17±1.54 1.96±1.18 2.08±1.07 2.25±1.31

4 讨论

红茴香可改善局部组织微循环，加速渗出液的吸收，故而能起到消肿、止痛、散瘀作用；还具有使损伤的局部炎症消退、组织粘连减轻作用，利于组织损伤的修复，预防瘢痕形成。临床研究也表明，红茴香具有很好的镇痛抗炎作用，但未开展其相关有效成分的研究。红茴香根皮或茎皮中主含黄酮类、挥发油等成分，我们对其挥发油成分进行分析发现，其中有多个化学成分具镇痛抗炎作用，故对红茴香挥发油及水提物进行药效试验比较是十分必要的，其具体的作用机理有待进一步研究。

红茴香挥发油和水提物的镇痛抗炎作用比较研究表明：挥发油和水提物均能显著减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀程度，红茴香挥发油给药后30min能显著减轻大鼠足跖肿胀程度，而水提物组未见大鼠足跖肿胀程度的明显减轻，但水提物在给药后15min能显著提高小鼠尾压痛阈值。以上提示红茴香挥发油部位对于炎症的抑制作用强于水提部位，但水提部位的镇痛作用优于挥发油部位。说明红茴香挥发油部位也是镇痛抗炎的有效部位，应予保留。因此，红茴香注射液的制备工艺有待进一步改进，以提高药材的药用价值。

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[3]邓德权，倪杏艳，刘芳，等.红茴香喷雾剂双侧面部止痛效果临床观察.东南国防医药，2013，15（2）：173

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[7]龚旭初，周鸣剑，杨万富，等.“新芙黄膏”镇痛、抗炎、抑菌作用的实验研究.江苏中医药，2010，42（5）：75

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R282.710.5

A

1672-397X（2014）07-0077-02

王曙东（1965-），男，博士，主任药师，主要从事中药制剂研究。

叶永富，236991683@qq.com

2014-04-08

编辑：吴宁

南京军区医学科技创新基金（10MA102）；南京军区医学科技创新重大项目（ZX26）