TLR5在变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中的表达

刘锐越　刘涛　周华容

[摘要] 目的 检测变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中TLR5的表达。方法 采用免疫组织化学SABC法检测30例变应性鼻炎患者（试验组）和25例非变应性鼻炎患者（对照组）鼻黏膜组织中TLR5的表达。结果 TLR5在试验组的阳性表达率（83.3%）明显高于对照组（8.0%），x2=30.965，P<0.05。结论 TLR5在变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中高表达。

[关键词] TLR5；变应性鼻炎；鼻黏膜

[中图分类号] R765.21 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）03-58-03

过敏性鼻炎（allergic rhinitis，AR）是耳鼻咽喉科常见病之一，现多称变应性鼻炎，目前国内发病率约20%～30%之间。其发病机制尚未完全阐明，目前多认为该病为IgE介导的I型变态反应，多种免疫细胞如T、B淋巴细胞、肥大细胞等及多种细胞因子均参与其发病的复杂机制[1]。临床上以连续阵发性喷嚏、大量水样鼻涕、鼻痒及鼻塞为主要症状，部分患者伴有嗅觉减退，严重影响患者的学习、工作和生活，目前已成为全球性的健康问题。

TOLL样受体（Toll-like receptors，TLRs）是1997年发现的机体对病原体侵袭产生先天性免疫应答信号通路中的一类受体，通过监视和识别不同的病原相关分子模式（PAMP）激发机体的免疫反应[2]。TLR5作为家族中的一员，细菌鞭毛蛋白是其唯一配体。近来研究发现TLR5是唯一具有免疫负调节作用的分子，可直接间接地参与免疫疾病的发病过程[3]。有资料显示，TLR5在变应性鼻炎患者鼻

黏膜组织中的表达确实与普通患者存在显著差异。为了了解在变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中TLR5的表达情况，通过以下试验进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料

取2013年4月～2013年7月山西医科大学第一医院耳鼻咽喉科住院行鼻内镜手术的变应性鼻炎伴下鼻甲肥大或伴鼻息肉患者30例为试验组，手术过程中严格无菌操作取鼻黏膜，同时选取鼻中隔偏曲并下鼻甲肥大而行部分下鼻甲切除术患者的下鼻甲黏膜组织25例作为对照，-70℃冻存备用。

试验组患者变应性鼻炎的诊断参照2004年兰州会议诊断标准[4]。

1.2 主要试剂

兔抗人TLR5多克隆抗体（博士德），兔多聚体二抗（博士德），DAB显色试剂盒（博士德）。

1.3 TLR5蛋白检测方法

采用免疫组织化学SABC法，操作步骤严格按照试剂说明书进行，所采用石蜡标本均以4?m厚度连续切片。试验组和对照组一抗稀释浓度均为1∶100。

1.4 结果判定

试验结果的判定标准参考许良中等[5]的方法。电子显微镜下观察切片，每张切片随机选取5个高倍视野进行细胞计数，阳性细胞数量的百分比和阳性细胞染色强度作为评分依据。染色强度：无色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；阳性细胞数量百分比：无阳性细胞计0分，阳性细胞数≤10%计1分，～50%计2分，～75%计3分，>75%计4分；2者相乘得分0～3分为阴性（-），>3分为阳性（+）。

1.5 统计学处理

SPSS软件进行统计学处理，定性资料采用率来表示，两组间TLR5的表达率比较采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

由表1可知，试验组TLR5表达的阳性率为83.3%，明显高于对照组的8.0%（x2=30.965，P<0.05），差异具有统计学意义。TLR5蛋白主要表达于鼻黏膜上皮细胞的胞浆中，部分表达于胞核，呈棕黄色颗粒。

3 讨论

变应性鼻炎患者发作期症状明显且可能伴有嗅觉减退，严重影响了患者正常的学习、工作和生活，是一个刻不容缓的全球性健康问题。近年来国内外均有资料显示，TLRs必然直接或间接地参与了变应性鼻炎的发病过程[6]。研究已经确认，在不同的组织环境中，TLRs的表达情况各异。例如骨髓来源的树突状细胞表达高水平的TLR4[7]，而固有层的树突状细胞不表达TLR4，而表达TLR5，并可以高效的对其配体做出免疫应答[8]。

查阅文献得知，TLR5在HP感染患者的胃黏膜组织中高表达，主要表达在细胞质和（或）细胞膜，其原因在于表达于胃上皮细胞中的TLR5与HP相互作用，启动一系列炎症因子介导的级联反应[9]。对于以上文献资料结合本次试验研究结果，做进一步以下讨论。

本试验的研究结果表明，变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中高表达TLR5蛋白，推测人体对变应原的免疫反应至少有一部分是通过激活该受体引起的。虽然目前尚不清楚变应性鼻炎患者鼻黏膜中TLR5高表达的具体机制，但结合TLR5在胃肠道组织内的表达情况，可以对其机制做进一步推测。有研究已经确认，变应性鼻炎患者鼻黏膜中TNF-α、IFN-γ、IL-8等细胞因子量明显增加[10]，推测是由于变应原刺激致使宿主对TLR5高表达，启动一系列由炎症信号转导的级联反应，引起多种炎症因子的“洪水式“释放，激发炎症反应，产生大量的细胞因子，而细胞因子又可以反馈调控TLR5的表达，从而在炎症反应中，TLR5蛋白-细胞因子之间形成一个相互调控的复杂关系，这种关系决定炎症反应的发生、发展和转归。今后进一步的研究必将会逐步探明这种相互作用的关系，一旦阐明这种机制，必将对变应性鼻炎的发病机制有更为深入的认识，从而为变应性鼻炎的治疗方向提供理论依据，减轻患者的痛苦。

综上所述，TLR5在变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中高表达，提示TLR5直接或间接参与了变应性鼻炎的发病过程。本试验中，对照组有极少量的阳性表达可能是由于该组织切片来源的患者患有变应性鼻炎，但并未处在发作期，造成一定的误差。

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（收稿日期：2013-12-16）endprint

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