复方中药对雏鸡冷应激的保护效应

陈海娟 孙 心 周靓靓 李 静

（哈药集团生物疫苗有限公司，黑龙江哈尔滨 150069）

复方中药对雏鸡冷应激的保护效应

陈海娟 孙 心 周靓靓 李 静

（哈药集团生物疫苗有限公司，黑龙江哈尔滨 150069）

本实验以附子、当归、黄芪、五味子等中药，按照祖国中医学传统理论，配成复方中药，研究其对冷应激雏鸡的保护效应。试验选取150只1日龄雏鸡。预试7d后分成空白组（正常温度对照组）、冷应激对照组、中药组（低温环境下饲喂含1% 复方中药的日粮）。每组50只。试验周期为35d。各组雏鸡分别于7d、14d、21d、28d 和35d 随机抽取10只，称重后采血、宰杀，分离血清。取心脏、肝脏、脾脏、肾脏、睾丸、法氏囊、胸腺称重。用分光光度计检测血液内乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能力、肌酐、尿酸和尿素氮的含量或者活性，并测定各组雏鸡血清中三碘甲腺原氨酸（triiodothyronine，T3）、甲状腺素（thyroxine，T4）含量。结果表明，冷应激对照组雏鸡从饲养第21d 开始体重较空白组和中药组生长缓慢，与空白组和中药组比较差异极显著（p＜0.01）；中药组雏鸡，在生长21d之内，体重增长较空白组比较差异性不显著（p＞0.05），从第28d 开始，体重增长较空白组差异性显著（p＜0.05）。中药组雏鸡体重明显高于空白组和冷应激对照组。冷应激对照组雏鸡的脏器指数，以免疫器官为主明显受到损伤，中药组雏鸡在21d之内脏器指数维持正常水平，较冷应激对照组无差异（p ＞ 0.05）。28 d后免疫器官的脏器指数明显高于空白组，且高于冷应激对照组。与空白组和冷应激对照组比较统计学差异显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜ 0.01）。中药组的乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性水平较空白组降低（P＜ 0.05或P ＜ 0.01），总抗氧化能力下降，统计学分析差异显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜ 0.01），肌酐和尿酸含量较空白组升高，统计学分析差异显著或极显著（p ＜ 0.05或p＜ 0.01）。从14d开始至28d，冷应激对照组雏鸡的T3，T4含量升高，与空白对照组统计学比较差异显著或极显著（p ＜ 0.05或P ＜ 0.01）。中药组雏鸡的T3，T4含量未见明显变化，与空白对照组比较差异不显著（p ＞ 0.05）。与冷应激对照组比较差异显著或极显著（p ＜0.05或P ＜ 0.01）。

复方中药；雏鸡；冷应激；保护效应

1 试验材料

1.1 实验动物

1日龄海兰白雄性健康雏鸡150只（黑龙江省哈尔滨市某鸡场提供）

1.2 饲料及药品

复方中药内主要包含附子、当归、黄芪、五味子等粉剂，均购买于药材大市场。中药组饲喂日粮在哈尔滨东大牧业有限公司用小型混合机混合。

2 试验方法

2.1 实验分组及管理

选取体重无显著差异的1日龄海兰白雄性雏鸡150只，雏鸡适应7d后，随机分为冷应激中药组、冷应激对照组、空白对照组，每组50只。试验组饲喂日粮+1%复方中药；空白对照组和冷应激对照组饲喂正常日粮。冷应激中药组和冷应激对照组雏鸡饲养环境控制在15℃左右室内饲养，而空白对照组按常规标准饲养，温度控制在正常饲养温度。各组鸡自由采食、饮水。

2.2 样品采集与处理

每组鸡群分别于7d、14d、21d、28d、35d，随机选取10 只鸡，先称重并记录，然后进行静脉采血10ml。血液静止10min后，以3000r/min离心，分离血清，-20℃冰箱保存用于生化指标、抗氧化性能及T3、T4含量的测定。最后采集心、肝、肾、脾、法氏囊、胸腺、睾丸用于脏器指数的分析。

2.3 体重检测

每组分别在7d、14d、21d、28d、35d分别随机选取10只鸡，编号并称重，记录体重数据。

2.4 脏器指数检测

取完整的心、肝、肾、脾、法氏囊、胸腺、睾丸，分别对所取器官称重，并按下列公式计算上述各个脏器指数。

2.5 雏鸡血液生化指标的测定

检测各组鸡血清中乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（AKP）、尿酸、尿素氮（BUN）、肌酐活性，按试剂盒说明书操作进行。

2.6 雏鸡血液抗氧化性能测定

（1）总抗氧化能力（T-AOC）测定：

充分混匀，放置10 min，波长520nm，1cm 光径，双蒸水调零，测定各管吸光度OD值。

单位定义及计算公式：

在37℃ 时，每分钟每毫升血清使反应体系的吸光度（OD）每增加0.01时，为一个总抗氧化能力单位。

混匀，3500～4000 转/min，离心10 min，取上清1 ml 作显色反应。

②显色反应

（2）雏鸡血清GSH-PX活性测定：

血清GSH-PX测定操作方法

①酶促反应：试剂一应用液提前在37℃ 预温

混匀，室温静止15 min后，波长412nm，1cm 光径比色环，双蒸水调零，测定各管吸光度OD值。

单位定义及计算公式：血清中GSH活力的计算：

定义：规定每0.1 ml 血清在37℃ 反应5 min，扣除非酶促反应作用，使反应体系中GSH 浓度降低1 μmol/L 为一个每活力单位。

注：*，从酶促反应中看出反应液0.4 ml，加试剂二2 ml，在反应液中6倍稀释。

2.7 雏鸡血清中T3，T4含量的测定

血清中T3，T4的浓度的测定采用放射免疫分析法（RIA），按试剂盒说明书操作，测定仪器采用瑞典LKB-1261I十探头自动γ计数器。

2.8 数据处理与分析

数据均以平均数±标准差表示，采用Oringin70软件作图，采用SPSSL2.0统计软件中的多重比较Duncan’s法，其中各组间进行统计学分析：a，aa：与同时间冷应激对照组t-检验比较时分别p＜ 0.05，p ＜ 0.01；b，bb：与同时间中药组组间t-检验比较时分别p ＜ 0.05，p ＜ 0.01；（p＜0.01表示差异极显著，p＜0.05表示差异显著，p＞0.05表示差异不显著）。

3 结果

3.1 不同组间雏鸡体重的变化

由图3-1可知，冷应激对照组的体重增长从饲养第21d 开始，冷应激对照组雏鸡体重较空白组和中药组生长缓慢，与空白组比较差异性及显著（p＜0.01），与中药组比较差异性极显著（p＜0.01）；中药组雏鸡在生长21d之内，体重增长较空白组比较差异性不显著（p＞0.05），从第28d 开始，体重增长较空白组差异性显著（p＜0.05）。中药组雏鸡体重明显高于空白组和冷应激对照组。

3.2 不同组间雏鸡脏器指数的变化

通过比较相同实验时间，不同组间（空白对照组、冷应激对照组、中药组）的脏器指数得出，见图3-2至3-8。雏鸡在饲养第7d，第14d各组间相互统计比较，无显著性差异（p＞0.05）。但从21d开始，冷应激对照组中的免疫器官脏器指数相对空白对照组的免疫器官指数有所降低，其中法氏囊的脏器指数与空白组比较有统计学差异（p＜0.05）；中药组的免疫器官的脏器指数却有相应的增加，尤其以法氏囊和胸腺为主，与空白组比较差异显著（p＜0.05或p＜0.01）。饲喂第28d开始，中药组的免疫器官，脾脏、法氏囊和胸腺的脏器指数明显增加，与空白组比较差异显著或极显著（p＜0.05或p＜0.01）。而冷应激对照组，在第28d出现了脏器指数明显的下降，尤以免疫器官为主，与空白组比较差异显著或极显著（p＜0.05或p＜0.01）。

图3 -3 不同组间雏鸡肝脏指数在不同时间的变化

3.3 复方中药对冷应激雏鸡血液生化指标的影响

3.3.1 复方中药对冷应激雏鸡血液LDH的影响

表3-1为空白对照组、冷应激对照组和中药组雏鸡的LDH 指标在不同时间段的变化。随着雏鸡的日龄增加和体重增大，机体的LDH 指标逐渐升高，实验期间在第21d 达到峰值。且中药组中LDH 最高。各组统计学比较差异不显著（p ＞ 0.05）。

3.3.2 复方中药对冷应激雏鸡血液AKP的影响

由表3-2可知。冷应激对照组AKP活性下降较空白组明显。饲喂28d和35d 时，空白组与冷应激对照组比较差异性显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜ 0.01）。中药组雏鸡的AKP 活性也随日龄增长而降低，只有21d 与空白组比较有统计学差异（p ＜ 0.05），其他时间无统计学差异（p ＞ 0.05）；而与冷应激对照组比较，28d和35d AKP活性差异性显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜ 0.01），其他时间无统计学差异（p ＞ 0.05）。

3.3.3 复方中药对冷应激雏鸡血液尿素氮含量、尿酸和肌酐的影响

由表3-3看出，尿素氮指标统计学比较差异不显著（p ＞0.05）。

由表3-4 明显看出，冷应激对照组雏鸡的尿酸含量明显较空白对照组高，统计学差异显著或极显著（p ＜ 0.05或P ＜ 0.01）。中药组与空白对照组比较差异不显著（p ＞ 0.05）。与冷应激对照组比较差异显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜ 0.01）。

由表3-5明显看出，冷应激对照组雏鸡的肌酐含量明显较空白组高，统计学差异显著或极显著（p＜ 0.05或p ＜ 0.01）。中药组与空白组比较差异不显著（p ＞ 0.05）。与冷应激对照组比较差异极显著（p ＜ 0.01）。

3.4 复方中药对冷应激雏鸡抗氧化性能的影响

3.4.1 复方中药对冷应激雏鸡血液T-AOC含量的影响

由图3-9可见，冷应激对照组T-AOC含量下降明显，与空白组数据统计比较在14d、21d和35d时差异性极显著（p ＜ 0.01）。中药组雏鸡血液内总抗氧化能力值较空白组比较无统计学差异（p＞ 0.05）。

3.4.2 复方中药对冷应激雏鸡血液GSH-Px活性的影响

由图3-10可知，实验第14d 开始，冷应激对照组和中药组与空白对照组进行统计学比较差异显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜0.01）。而中药组的GSH-Px活性升高显著，较冷应激对照组比较统计学差异显著或极显著（p ＜ 0.05或p ＜ 0.01）。

3.5 复方中药对冷应激雏鸡血液T3，T4含量的影响

由表3-6明显看出，从14d开始至28d，冷应激对照组雏鸡的T3含量明显升高，与空白对照组统计学比较差异显著或极显著（p ＜ 0.05或P ＜ 0.01）。中药组雏鸡的T3含量未见明显变化，与空白对照组比较差异不显著（p ＞ 0.05）。与冷应激对照组比较差异极显著（p ＜ 0.01）。

由表3-7看出，从14d开始至28d，冷应激对照组雏鸡的T4含量升高，与空白对照组统计学比较差异显著（p ＜ 0.05）。中药组雏鸡的T4含量未见明显变化，与空白对照组比较差异不显著（p ＞0.05）。与冷应激对照组比较差异显著（p ＜ 0.05）。

4 讨论

冷应激雏鸡生长性能下降，免疫能力降低，机体抗氧化能力和激素调节水平下降。复方中药能够提高冷应激雏鸡的免疫水平和抗氧化能力，促进雏鸡生长。通过实验表明复方中药能够保证雏鸡在冷应激环境下正常生长。对家禽的养殖生产有一定的实际应用意义。