酶联免疫粪便抗原检测幽门螺杆菌在临床中的应用研究

储建坤 崔东升 朱秀芳 许顺江 霍晓辉

幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori，H.pylori)感染是胃炎以及胃溃疡、十二指肠溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等其他相关性疾病的主要病因［1］。目前检测H.pylori的方法较多，各有优劣，常见的有胃黏膜活检并快速尿素酶实验及粪便抗原检测。前者由于为侵入性检查，只有胃镜的同时进行检测，较局限且有误差，难以推广［2］。目前粪便抗原检测仅少数医院用于科研，且国内缺乏相应试剂盒，既往科研所用国产试剂盒均为协和药业生产，目前已面临停产。本组研究就14C尿素呼气试验和酶联免疫法检测幽门螺杆菌粪便抗原(HpSA试验)检测患者H.pylori感染情况，观察HpSA试验检测灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值，结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2011年12月至2013年12月门诊及住院患者中疑有H.pylori感染初诊(150例)及治疗后(150例)患者300例进行研究，其中男123例，女177例;年龄13～76岁，平均年龄(35.2±7.8)岁。均排除4周内曾应用质子泵抑制剂及抗生素患者，急慢性腹泻或严重便秘患者，大便带血者，严格控制留取粪便标本，距离留取时间＞3 h的标本不予入组;有代谢性疾病及免疫性疾病患者［3］。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法:所有患者均接受埃索美拉唑20 mg，2次/d;阿莫西林克拉维酸钾4粒，2次/d(山东鲁能，每粒中阿莫西林含量0.2 g);奥硝唑0.5 g，2次/d;胶体果胶铋 200 mg，2次/d，连续14 d。

1.2.2 检测方法:所有患者均进行14C尿素呼气试验(14C-UBT)和酶联免疫法检测 H.pylori粪便抗原(HpSA试验)检测。并对治疗后的患者在1周、2周、3周后的HpSA试验检测值与治疗后4周的14C尿素呼气试验进行对比［4］。

HpSA测定［5］:试剂盒由北京金豪制药股份公司生产，取约0.1 g的新鲜粪便，放入400 μl样品稀释液中振荡混匀，取100 μl样品稀释液、阳性对照及阴性对照液分别加入已用抗体包被的孔板中，每孔加入酶标抗体100 μl后室温孵育60 min，反复洗板6次，每孔加入底物溶液100 μl，室温孵育10 min，加入反应终止液后15分钟内在酶标仪上测定每孔的吸光度。

1.3 判定标准 若 A450/650 nm ＞0.120为H.pylori阳性;A450/650 nm ＜0.100 为 H.pylori阴性;0.100 ＜A450/650 nm＜0.120为不确定结果。以14C尿素呼气试验检测阳性为确诊H.pylori感染的临床标准，比较HPSA检测H.pylori感染的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值。(1)诊断敏感度:真阳性/(真阳性+假阴性)×100%;(2)诊断特异度:真阴性/(真阴性+假阳性)×100%;(3)诊断效率:(真阴性+真阳性)/总例数×100%;(4)阳性预测值:真阳性/(真阳性+假阳性)×100%;(5)阴性预测值:真阴性/(真阴性 +假阴性)×100%［6］。

1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，用配对资料χ2检验检验两者的一致性，并通过HpSA试验与非侵入性方法14C尿素呼气试验比较，进一步评价HpSA试验的可靠性和准确性。

2 结果

2.1 ELISA法检测HPsA和14C-UBT比较 300例患者行14C-UBT，有151例判为H.pylori感染，149例判为非H.pylori感染，与14C UBT金标准检测比较，HpSA试验检测灵敏度为92.05%，特异度为97.32%，阳性预测值为97.20%，阴性预测值为92.36%，正确指数(灵敏度+特异度－1)为89.37%。见表1。

表1 ELISA法检测HPsA和14C-UBT比较 例

2.2 治疗后患者1周后HpSA试验检值与14C尿素呼气试验比较 患者治疗1周后，有119例判断为H.pylori感染，31例患者为非 H.pylori感染。见表2。

表2 治疗后患者1周后HpSA试验检值与14C尿素呼气试验比较例

2.3 治疗后患者2周后HpSA试验检值与14C尿素呼气试验比较 患者治疗2周后，有69例判断为H.pylori感染，81例患者为非 H.pylori感染。见表3。

表3 治疗后患者1周后HpSA试验检值与14C尿素呼气试验比较例

2.4 治疗后患者3周后HpSA试验检值与14C尿素呼气试验比较 患者治疗2周后，有39例判断为H.pylori感染，141例患者为非H.pylori感染。见表4。

表4 治疗后患者1周后HpSA试验检值与14C尿素呼气试验比较例

3 讨论

我国 H.pylori检测起于20世纪90年代后期，2000年以后全国性H.pylori诊治共识意见共出台四次，最近一次为2012年在江西井冈山召开。会议明确指出目前我国H.pylori感染的流行病学调查显示感染率仍为40% ～60%，任重道远。共识意见指出，目前的常用检测方法各有优劣:(1)RUT，胃黏膜活检并快速尿素酶实验，属于侵入性检查，胃镜的同时进行检测，较局限且有误差;(2)组织学检测，胃镜下免疫组化染色费用高，其他染色方法结果存在差异;(3)细菌培养:复杂、耗时，多用于特定科研;(4)UBT:是目前临床开展最广的检测方法，准确简单，但检测值临界时常不可靠，14C不能用于儿童及孕妇;(5)抗体检查:多用于流行病学检测，不能用于治疗后复查;(6)粪便抗原检测:敏感度特异度媲美UBT，适用全部人群，无需口服试剂，无创、简便、安全［7］。

从本组研究结果来看，300例患者行14C-UBT试验，有 151例判为 H.pylori感染，149例判为非H.pylori感染，且与14C UBT检测比较，HpSA试验检测灵敏度为92.05%，特异度为97.32%，阳性预测值为97.20%，阴性预测值为92.36%，正确指数(灵敏度+特异度－1)为89.37%。

多数国内相关科研仅限于检验该项检查与既往一些检测方法的敏感性特异性对比，而这些在国外一些数据库中已有定论，即两者敏感度特异度类似，国产试剂盒得出的数据与之比较略有差异，应与试剂盒质量有关［8］。UBT易受质子泵抑制剂影响，当患者服用该类药物时，检测H.pylori就有等待2～4周才能进行。有相关报道粪便抗原检测不易受质子泵抑制剂的影响，可快速用于治疗后检查，国内尚无被专家认可的相关数据资料［9］。而本组研究采用HpSA进行检测，不受治疗方法的影响，检测时间较为灵活，且其灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值有着显著的优越性。

综上所述，检测方法的诊断准确率高、灵敏度高、特异度高、适用于H.pylori的诊断，尤其适用于儿童、老年患者的筛查及无法开展13C或14C-UBT的贫困地区，且检测值不受患者是否进行治疗。

1 彭小玲.中老年体检者幽门螺杆菌阳性率分析及群体阳性预估方法探讨.中国医药导报，2012，9:59-60.

2 中华医学会消化病学分会.第三次全国幽门螺杆菌感染若干问题共识报告.胃肠病学，2008，13:42-46.

3 Yang HR，Seo JK.Helicobacter Pylori stool antigen(HPSA)tests in children before and after eradication therapy:comparison of rapid immunochromatographic assay and HpSA ELISA.Dig Dis Sci，2008，53:2053-2058.

3 严红，邱昕光.2857例健康体检人员幽门螺杆菌感染调查分析.中华医院感染学杂志，2012，22:329-330.

4 罗祖媚.健康体检者消化道症状与幽门螺杆菌感染的相关性分析.现代医院，2012，12:50-51.

5 Faruqui AN，Majid U，Ahmad L，et al.Helicobacter Pylori stool antigentest(HPSA)for the diagnosis of gastrieinfection.J Coll Physicians SurgPak，2007，17:316-319.

6 关克涛，徐文泉，刘云峰，等.酶联免疫吸附测定检测儿童粪便幽门螺杆菌抗原.广州医学院学报，2006，34:43-45.

7 Jiang JH，Xu DZ，Yan YP，et al.Diagnosis of Helicobacter pylori infection:A meta-analysis.J Med Coll PLA，2007，22:246-249.

8 张万岱，胡伏莲，萧树东，等.中国自然人群幽门螺杆菌感染的流行病学调查.现代消化及介入诊疗，2010，15:265-270.

9 武子涛，盛剑秋，谭佳，等.幽门螺杆菌粪便抗原检测在体检人群中的应用价值.中国中西医结合消化杂志，2013，21:299-301.