张家口地区角膜溃疡病原菌的流行病学调查研究

闫俊琴，阎敏娜，李 伟，马朋朋，李双霞

(1.万全县中医院检验科，河北 张家口 075000； 2.河北北方学院第一附属医院检验科，河北 张家口 075000；3.中国人民解放军251医院病理科，河北 张家口 075000； 4.河北北方学院第一附属医院骨科，河北 张家口 075000；5.中国人民解放军251医院检验科，河北 张家口 075000)

近年来，角膜溃疡的发病率显著升高。该病病因复杂，可影响患者的视力和生活质量，治愈后常会留下瘢痕，且致病菌因地域及气候不同而发生变化，据估计每年全球范围内因眼外伤和角膜溃疡导致的失明人数高达200万[1]。正常角膜防御机制损伤后，几乎所有的病原体均可侵入角膜基质，造成复杂的角膜感染[2]。但因缺乏明确且特殊的临床特征，很难明确导致角膜溃疡的病因，因此确定为何种病原体引发的感染以明确诊断,从而确保角膜溃疡得到准确具体的治疗非常重要[3]。张家口地处高寒地区，环境条件复杂，角膜溃疡多发，对致病菌病原学和流行病学特点了解不多。本研究旨在调查确定张家口地区角膜溃疡相关的病原体流行病学特点及风险因素，以期为疾病控制和临床诊治提供一定的依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2010年12月至2012年6月张家口地区万全县中医院、河北北方学院第一附属医院及解放军251医院收治的367例角膜溃疡患者作为研究对象，其中男253例、女114例，年龄(33.8±2.7)岁；职业构成：农民141例，体力劳动者87例，商人63例，学生22例，其他职业54例。患者主诉视物模糊，有异物感、轻度眼痛、畏光、流泪、眼睑痉挛等症状，球结膜充血或混合性充血、睫状体充血、前房积脓。

1.2方法

1.2.1标本采集与诊断 首先对患者实施详细的眼部检查，进行麻醉后在无菌条件下从患者溃疡边缘取得病灶组织，取适量涂布于载玻片上，用制备好的10%氢氧化钾(购于上海生物工程公司)溶液处理后行革兰染色镜检，进行初步判断。

1.2.2病原体培养与鉴定 ①细菌培养：将获得的角膜溃疡组织接种于平板上进行培养。每日观察培养板生长情况，若7 d后仍无任何生长情况即弃去；②真菌培养：将获得的角膜溃疡组织接种于含有氯霉素的沙氏葡糖琼脂(sabouraud′s dextrose glucose agar，SDA)固体平板上(培养液配制试剂购于上海生物工程公司)，每个标本接种两块平板，分别置于25 ℃和37 ℃进行培养。每日观察SDA平板生长情况，3周后仍无任何生长情况即弃去。

待形成菌落后镜下观察病原体生长情况，根据病原体形态和结构特点及菌落特征使用鉴定标准进行菌种鉴定[4]。

2 结 果

2.1角膜溃疡患者基本情况 367例角膜溃疡患者中男性占68.9%，其中以21～30岁年龄段居多，占38.7%(98/253)；女性占31.1%，以31～40岁年龄段居多，占30.7%(35/144)。

2.2微生物培养及鉴定情况 所有角膜溃疡患者中，共有218例(59.4%)病原体培养显示阳性，其中130例(59.6%)为真菌性感染，88例(40.4%)为细菌性感染。对细菌培养阳性的患者进一步评估其职业和易患风险因素，其中溃疡发生率由高到低依次为农民(114例，52.3%)，劳动者(50例，22.9%)，商人(24例，11.0%)，学生(8例，3.7%)；203例患者有明确外伤史，其中植物划伤136例、尘埃21例、白内障手术19例、糖尿病13例、其他伤14例，15例无外伤史。

2.3微生物流行病学情况 真菌性角膜溃疡中分离出的真菌以镰刀菌属最为常见，其次为曲霉菌属和假丝酵母属，其他菌属占28.5%，多种感染形式并存(表1)；在细菌性角膜溃疡中，革兰阳性球菌为分离出的最主要的细菌类型以肺炎链球菌最常见。假单胞菌是分离出的最主要的革兰阴性杆菌，多种感染形式并存(表2)。

表1 角膜溃疡患者分离出的真菌情况

表2 角膜溃疡患者分离出的细菌情况

3 讨 论

角膜溃疡可由细菌、真菌、寄生虫和病毒及其他多种原因引发[5]，危害非常严重，其迅速发展造成的眼部损伤，可能对视力造成威胁并有可能引起角膜穿孔而导致失明[6]，是发展中国家导致失明的一个主要原因，因此及时准确的病因判定对其临床有效治疗非常重要[7]。

角膜溃疡的发病范围广，可影响所有的年龄段[8]。张家口地区地理环境复杂，部分地区处高寒区域，风沙较大，农业人口居多，经济作物以玉米为主。本研究中角膜溃疡患者以男性为主(68.9%)，以21～30岁年龄段居多；女性患者占31.1%，以31～40岁年龄段居多。男性发病率高于女性，与其在户外工作期间容易受伤有关；中年阶段溃疡发生率较高，这也与该年龄段人群从事户外工作为主有关，符合本地区人群分布特点。结合研究对象工作情况分析得出，大部分患者从事农业相关工作，多与农作物种植有关，其中玉米秸秆叶和尘埃造成的眼部损伤是角膜损伤的主要风险因素。

多种因素决定微生物性角膜溃疡的临床治疗效果[9]，病原学与流行病学调查显示该病有明显的气候特异性和地域性差异，可因条件不同而存在区别[10]。本研究367例角膜溃疡患者中，有218例(59.4%)病原体培养阳性，149例(40.6%)培养阴性，未发现病原体的例数较高，可能与这些患者入院就诊前已经进行局部用药治疗有关。培养阳性标本中以真菌较多(130例，59.6%)，主要致病菌属为镰刀菌属(49.2%)，其次为曲霉属(13.1%)和假丝酵母属(9.2%)；细菌检出率为40.4%，革兰阳性球菌是分离出的最主要的细菌类型，其中肺炎链球菌最常见(25例，28.4%)，葡萄球菌次之(19例，21.6%)；假单胞菌(9例，10.2%)是分离出的最主要的革兰阴性杆菌。本研究中，病原体培养阳性的患者中存在细菌/真菌复合感染的情况，且存在细菌和真菌的交叉感染，说明病原体危害严重，多种病原体的复合感染使患者的诊治更加困难。本研究通过分析目前张家口地区角膜溃疡致病病原体流行病学特点，初步了解了该病常见病原真菌菌种的种类和变化方向，为指导临床疾病的控制和治疗提供重要依据，具有重要意义。

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