藏药革叶兔耳草挥发油的化学成分研究

刘 娜，周树娅，尹艳清，赵雪秋,杨丽娟

(云南民族大学 民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，云南 昆明 650500)

革叶兔耳草(Lagotisalutacea)系玄参科(Scrophulariaceae)兔耳草属(Lagotis)多年生草本植物，藏药名为“洪连”，为藏药中上品药物，主要分布于青海﹑西藏、甘肃、云南等地[1].其全草入药，具退热﹑降血压、调经解毒之功效.用于治疗肝胆病、高热、烦渴、肠痧、炭疽、疮毒、伤筋等症[2].目前，藏医用云南兔耳草主治各种类型的肝炎，有较好的疗效.近年来，已有文献对兔耳草属植物的化学成分进行了研究，发现其中主要成分为黄酮﹑环烯醚萜苷、苯丙素苷及有机酸类化合物[3-6].研究显示藏药革叶兔耳草的粗提物具有抗氧化活性[7].革叶兔耳草的化学成分及挥发油成分研究至今未见报道.本研究用水蒸气蒸馏法提取革叶兔耳草的挥发油，采用气相色谱-质谱联用法，对其化学成分进行了分析，从挥发油中分离出约70个峰，经分析鉴定了其中59种成分，用面积归一法测定各种成分的相对质量分数，所鉴定成分占总峰面积的82.38%.

1 实验部分

1.1 仪器与材料

Trace 1 310 型气相色谱与ISQ单四级杆质谱联用仪.气相色谱条件：石英毛细管柱TG-5MS，30 m×0.25 mm，膜厚0.25 μm.载气为氦气，分流比60∶1，柱前压40 kPa，柱流量0.8 mL/min，进样口温度250 ℃，接口温度250 ℃，进样量1 μL. 升温程序：从40 ℃开始以3 ℃/min升到10 ℃，保持1 min，然后4 ℃/min升到180 ℃，保持1 min，再以5 ℃/min升到250 ℃，保持4 min；质谱条件：离子源温度250 ℃，电离方式EI，电子能量70 eV，扫描质量范围30～500m/z.

革叶兔耳草(Lagotisalutacea)全草于2009年11月采于云南香格里拉，样品经云南民族大学杨青松副教授鉴定.

1.2 提取方法

革叶兔耳草干燥全草粉碎5.0 kg，于室温下用95%的工业乙醇浸泡，合并提取液，过滤，减压浓缩得到乙醇浸膏，然后用石油醚萃取，回收石油醚，石油醚萃取物加入乙醚溶解，再加入蒸馏水进行水蒸气蒸馏，收集馏出液；用无水乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液，回收乙醚；用无水硫酸钠干燥24 h，得到浅黄色油状物，具有特殊芳香气味，密封保存.

2 结果与分析

2.1 革叶兔耳草中挥发油成分的总离子流图

革叶兔耳草中挥发油成分的总离子流图如图1.

经计算机质谱数据系统检索(NIST MS Search 2.0)，从云南产的革叶兔耳草挥发油中总共鉴定了59个成分，其相对质量分数占总峰面积的82.38%，主要成分及其在挥发油中含量见表1.

2.2 对革叶兔耳草挥发油的化学组分进行气相色谱-质谱分析

表1 革叶兔耳草挥发油的化学成分分析结果

续表

序号t/min分子式相对分子质量化合物相对质量分数/%611.72C8H16O1283-羟基-1-庚烯0.13711.93C12H16O6256苯基-β-D-葡萄糖苷0.05812.07C9H121201,2,5-三甲基苯0.05912.27C8H16O128正辛醛0.041012.71C6H12O2116正庚酸0.701113.64C8H16O8240l-Gala-l-ido-octose0.131215.05C8H16O1282-辛烯-1醇0.171315.71C16H30O224011-环戊基十一酸0.061416.1C9H18O142壬醛0.351518.04C9H16O140鸢尾醛0.551618.78C9H10O1341-(3-甲基苯基)乙酮0.151719.22C9H16O21562-乙基丁酸烯丙酯0.071819.73C10H20O2172辛酸乙酯0.481919.93C9H14O138(E,E)-2,4-壬二烯醛0.362020.44C8H13NO1392 - 氧杂-6 - 氮杂三环[3.3.1.1(3,7)]癸烷0.142120.61C9H16O21564-氧代壬醛0.822221.28C14H25F3O22823-三氟乙酸基十二碳烷0.452321.73C10H18O154(E)-2-癸烯醛0.852422.61C9H16O31722-羟基环己甲酸乙酯 0.392522.83C21H38O23222′-己基-[1,1′-二环]-2-辛酸甲酯0.242623.06C10H16O31841,4-过氧化-2,3-环氧驱蛔萜0.172723.21C20H40O2312(Z)-2-(9-十八碳烯基氧基)-乙醇0.172823.51C10H16O1522,4-癸二烯醛1.462923.8C9H16O1404,4,6-三甲基-2-环己烯-1-醇3.643024.54C11H20O21845-庚基-2(3H)呋喃酮0.293126.04C11H22O2186壬酸乙酯1.773227.17C9H10O3166香草乙酮2.273327.83C12H22O11342β-D-乳糖苷0.533428.17C9H10O3166藜芦醛3.173528.39C18H34O22824-辛烯酸乙酯0.703629.08C10H14O1502-(2-丁烯基)-环己酮0.433729.29C11H20O32009-氧代壬酸乙酯8.693829.77C11H16O2180(R)-5,6,7,7a-四氢-4,4,7a-三甲基-2(4H)-苯并呋喃酮0.633930.22C12H20O4228愈伤酸1.024031.92C11H20O32009-氧代癸酸甲酯0.624132.68C12H11N169二苯胺5.214232.94C17H36O2562-甲基-1-十六烷醇0.404333.24C19H40268十九碳烷0.594433.90C28H48O4002-甲烯基-3-羟基胆甾烷0.474534.80C12H22O2198乙酸香茅酯1.744636.03C19H40268十九碳烷1.704738.23C16H32O2256肉豆蔻酸乙酯2.64

续表

序号t/min分子式相对分子质量化合物相对质量分数/%4838.84C17H362402,6,10-三甲基-十四碳烷1.124939.64C18H36O268 植酮4.505040.40C18H34O2282油酸4.545140.90C17H34O2270十五酸乙酯1.625241.68C13H16O42363,4-二甲基肉桂酸乙酯1.005342.71C18H34O2282棕榈油酸乙酯0.615443.31C18H36O2284棕榈酸乙酯20.835543.77C18H36O268十八碳醛1.185645.41C19H38O2298珠光脂酸乙酯0.545746.65C20H36O2308亚油酸乙酯9.215846.81C20H38O2310油酸乙酯4.005947.39C20H40O2312硬脂酸乙酯1.49

3 讨论

从分析结果可以看出藏药革叶兔耳草挥发油中主要成分为棕榈酸乙酯(20.83%) ﹑亚油酸乙酯(9.21%)﹑9-氧代壬酸乙酯(8.69%)﹑二苯胺(5.21%)﹑肉豆蔻酸乙酯(2.64%)﹑正己烷(3.73%)﹑藜芦醛(3.17%)﹑4,4,6-三甲基-2-环己烯-1-醇(3.64%)﹑油酸(4.54%)﹑植酮(4.50%)﹑香草乙酮(2.27%)﹑油酸乙酯(4.00%)﹑硬脂酸乙酯(1.49%)﹑壬酸乙酯(1.77%)﹑十九碳烷(1.70%)﹑乙酸香茅酯(1.74%)等.其中最主要成分是棕榈酸乙酯，该成分呈微弱蜡香、果爵和奶油香气，用做食品添加剂﹑食用香料﹑香精以及有机合成等；另外，挥发油中的亚油酸乙酯是人体必需脂肪酸之一，它直接影响着动物的生长和繁殖能力，亚油酸及亚油酸乙酯具有降低血清胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的作用.在医疗方面，亚油酸及其衍生物主要用作预防和治疗动脉硬化等疾病的药物[8]；9-氧代壬酸乙酯具有强烈的葡萄香气、玫瑰香气、果香和酒香，用做食用香料、香精.此外，植酮是合成维生素E醋酸酯的中间体；愈伤酸与凝胶多糖联合具有愈合创伤活性，因此它是一种治疗外伤不留伤痕的理想药品.从化合物类型来看，革叶兔耳草的挥发油中，主要有单萜和倍半萜类化合物，其具有多方面的生物活性，并且是某些中药的主要有效成分.

气质联用技术集成了色谱和结构鉴定的光谱手段之优点，已广泛应用于中药研究领域，特别是对挥发油成分的分析研究[9-10].本研究通过GC-MS联用技术对革叶兔耳草挥发油含量和有效成分的分析评价，对开发利用革叶兔耳草资源在创制中成药新品种，天然香料及综合利用等方面提供了科学依据.

参考文献:

[1] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].3版. 北京: 人民卫生出版社，2009.

[2] 云南省药材公司. 云南中药资源名录[M].北京: 科学出版社, 1993.

[3] 郗峰, 邓君, 王彦涵, 等. 藏药短管兔耳草的化学成分研究[J].中国中药杂志, 2010, 35(7) : 869-871.

[4] 羊晓东, 赵静峰, 任海英, 等. 藏药云南兔耳草的化学成分研究(I)[J].云南大学学报：自然科学版, 2003, 25(2) : 141-143.

[5] 杨丽娟, 羊晓东, 李良. 藏药云南兔耳草的化学成分研究[J].中药材,2005, 28(9) : 767-768.

[6] 杨丽娟, 羊晓东, 赵静峰, 等. 藏药云南兔耳草的化学成分研究(II)[J].中药材，2006, 29(2) : 128-130.

[7] 张娜, 周树娅, 尹艳清, 等. 藏药革叶兔耳草粗提物的抗氧化活性研究[J].云南民族大学学报：自然科学版, 2012, 22(1) : 5-9.

[8] 吴建良, 郝聪俐, 宋晓华, 等. 药用亚油酸乙酯的研制[J].浙江化工, 2004, 35(5) : 5.

[9] 杨秀岭, 张兰桐, 袁志芳. 色谱联用技术在中药研究领域的应用[J].中国药房, 2006, 17(1): 63.

[10] 吴玫涵, 聂凌云. 气相色谱-质谱联用技术在我国中药研究中的应用[J].解放军药学学报, 2002, 18 (2): 34.