奶子藤茎的化学成分研究

李世源，杨春涛，曾晓丽，江志勇，田 凯，孙静贤，黄相中,2

(1. 云南民族大学 云南省生物高分子功能材料工程技术研究中心，云南 昆明 650500；2. 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 天然药物活性物质与功能国家重点实验室，北京100050)

奶子藤(Bousigoniamekongensis)是夹竹桃科(Apocynaceae)奶子藤属的植物. 分布在我国云南等地，越南、老挝也有，生长于海拔500～800 m的地区，多生长在山地疏林中或河旁潮湿地方，目前尚未由人工引种栽培. 奶子藤是傣药“雅解沙把”(百解胶囊)的重要成分之一，具有清热解毒、定心安神的作用[1]. 目前，除了郝小江等[2]从奶子藤中分离得到2个吲哚类生物碱外，尚未见到有关奶子藤化学成分的其他报道. 本实验运用多种色谱方法和波谱技术，对奶子藤的化学成分进行了研究，从中分离得到8个化合物，分别鉴定为：3,4-二羟基苯甲醛(1)，3,4-二羟基苯甲酸(2)，2,2-二甲基-7-羟基色满(3)，齐墩果酸(4)，熊果酸(5)，β-谷甾醇(6)，5,7,3′,4′-四羟基黄酮醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)，5,7,3′,4′-四羟基黄酮醇-3-O-α-L-鼠李糖苷(8).

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

材料于2012年9月采自云南省西双版纳景洪，由云南民族大学杨青松副教授鉴定为奶子藤(Bousigoniamekongensis)，标本现存放于云南民族大学化学与生物技术学院标本室. 柱层析硅胶为青岛海洋化工厂生产的100～200和200～300目硅胶，薄层层析用硅胶为青岛海洋化工厂生产的GF254薄层高效层析板，色谱反相硅胶为德国Merck公司生产的Lichroprep Rp-18 gel (40～63 lm)，凝胶为瑞典Pharmacia公司生产的Sephadex LH-20(20～150 lm)， MCI为日本东京Mitsubishi公司生产的 MCI gel CHP-20P (70～150 lm).

1.2 仪器

紫外分光光度计(Aglient 8453)；国产X-4数字显微熔点仪(北京泰克仪器有限公司，未校正)；Nicoiet iS10型红外分光光度计(美国赛默飞世尔科技有限公司)，KBr压片；Bruker AV400核磁共振仪，TMS为内标；UltraScan ESI-MS (bruker)；制备色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C1821.2 mm×250 mm, 7 μm；Agilent 1260制备色谱仪(包括单元泵，手动进样器，二极管阵列检测器DAD，Chemstation 色谱工作站)；半制备色谱柱：YMC-Pack ODS-A 10 mm×250 mm, 7 μm；Agilent 1260半制备色谱仪(包括二元泵，手动进样器，多波长检测器MWD，Chemstation 色谱工作站).

1.3 提取和分离

10 kg奶子藤茎粉碎后，采用90%的工业乙醇(80 L)冷提3次，收集提取液，减压浓缩得到粗提浸膏，分别以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得石油醚部分40 g，乙酸乙酯部分440 g，正丁醇部分250 g.采用石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、氯仿-甲醇等溶剂体系对各部分进行梯度洗脱，反复柱层析，最终分离得到化合物1～8.

1.4 结构鉴定

化合物(1)：C7H6O3, 白色晶体(丙酮), m.p. 130～131 ℃. ESI-MS (m/z)138[M]+.1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.27(1H, d,J=2.0 Hz, H-2), 6.88(1H, d,J=7.8Hz, H-5), 7.25(1H, dd,J=2.0, 7.8 Hz H-6), 9.63(1H, s, CHO).13C NMR(CD3OD, 100 MHz)δ：129.4(C-1), 118.1(C-2), 145.8(C-3), 152.4(C-4), 118.1(C-5), 125.1(C-6), 191.9(C-CHO). 以上数据与文献[3]对照一致， 鉴定该化合物为3,4-二羟基苯甲醛.

化合物(2)：C7H6O4, 白色针状结晶(甲醇)，m.p. 211～213 ℃. ESI-MS(m/z)154[M]+.1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.25(1H, s, H-2), 7.23(1H, d,J=7.8 Hz, H-5), 6.60(1H, d,J=7.8 Hz H-6).13C NMR (CD3OD, 100 MHz)δ：123.1(C-1), 117.7(C-2), 146.1(C-3), 151.6(C-4), 115.8(C-5), 123.9(C-6), 170.3(C-COOH). 以上数据与文献[3]对照一致, 鉴定该化合物为3,4-二羟基苯甲酸.

化合物(3)：C11H14O2，白色结晶(甲醇)，m.p. 67～68 ℃. ESI-MS (m/z)178[M]+.1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:1.17(6H, s, Me-H), 1.65(2H, m, H-4), 2.60(2H, m, H-5), 6.70(1H, d,J=8.0 Hz H-7), 7.62(1H, d,J=6.8 Hz H-8), 7.70(1H, s, H-6);13C NMR(CD3OD, 100 MHz)δ：71.6(C-2), 44.7(C-3), 26.2(C-4), 133.0(C-5), 130.5(C-6), 161.0(C-7), 130.4(C-8), 161.1(C-9), 115.5(C-10), 29.1(C-Me). 以上1H NMR和熔点数据与文献[4]对照一致，鉴定该化合物为2,2-二甲基-7-羟基色满.

化合物(4)：C30H48O3，无色针状结晶(氯仿)，m.p. 308～310 ℃. ESI-MS(m/z)456[M]+.1H NMR(CDCl3, 400 MHz)δ：5.27(1H, t,J=3.2 Hz, H-12), 3.24(1H, t,J=5.4 Hz, H-3);13C NMR(CDCl3, 100 MHz)δ：38.6(C-1), 27.0(C-2), 79.2(C-3), 39.2(C-4), 55.2(C-5), 18.7(C-6), 32.6(C-7), 39.6(C-8), 47.5(C-9), 37.4(C-10), 23.3(C-11), 122.7(C-12), 143.3(C-13), 41.6(C-14), 27.6(C-15), 23.4(C-16), 46.4(C-17), 41.5(C-18), 46.8(C-19), 30.6(C-20), 33.8(C-21), 32.9(C-22), 27.9(C-23), 15.4(C-24), 15.1(C-25), 26.6(C-26), 16.7(C-27), 182.8(C-28), 33.1(C-29), 23.9(C-30).以上数据与文献[5]对照一致, 鉴定该化合物为齐墩果酸.

化合物(5)：C30H48O3，白色无定形粉末，m.p. 285～286 ℃. ESI-MS9(m/z) 456[M]+. 乙醇-硫酸喷雾后加热显紫红色与乌苏酸对照品混合熔点不下降，ESI-MS，1H NMR，13C NMR数据与文献[6]中报道一致，故鉴定该化合物为熊果酸.

化合物(6)：C29H50O，无色针晶(氯仿)，m.p. 138～140 ℃. ESI-MS (m/z)414[M]+. 在薄层板上与β-谷甾醇对照品对照Rf相同，测定混合熔点不下降，故鉴定该化合物为β-谷甾醇.

化合物(7)：C21H22O12，黄色无定形粉末，m.p.170～172 ℃. ESI-MS (m/z) 466[M]+.1H NMR(400 MHz, CD3OD)δ：7.80(1H, d,J=2.0 Hz, H-2′), 7.52(1H, dd,J=8.4, 2.0 Hz, H-6′), 6.82(1H, d,J=8.4 Hz, H-5′), 6.35(1H, d,J=2.0 Hz, H-8), 6.15(1H, d,J=2.0 Hz, H-6), 5.12(1H, d,J=7.6 Hz, H-1″);13C NMR(CD3OD, 100 MHz)δ:157.7(C-2), 135.6(C-3), 179.0(C-4), 162.3(C-5), 99.2(C-6), 164.3(C-7), 94.4(C-8), 157.8(C-9), 106.2(C-10), 122.5(C-l′), 116.4(C-2′), 145.9(C-3′), 148.5(C-4′), 116.5(C-5′), 122.7(C-6′), 102.3(C-l″), 74.8(C-2″), 78.5(C-3″), 71.3(C-4″), 78.7(C-5″), 62.3(C-6″). 以上数据与文献[7]对照一致，鉴定该化合物为5,7,3′,4′-四羟基黄酮醇-3-O-β-D-葡萄糖苷.

化合物(8)：C21H22O11，黄色无定形粉末，m.p. 172～174 ℃. ESI-MS(m/z) 450[M]+.1H NMR (400 MHz, CD3COCD3)δ：7.53(1H, d,J=1.5 Hz, H-2′), 7.42(1H, dd,J=8.0, 1.6 Hz, H-6′), 7.00(1H, d,J=8.0 Hz, H-5′), 6.49(1H, d,J=2.0 Hz, H-8), 6.28(IH, d,J=2.0 Hz, H-6), 5.54(1H, s, H-1″); 4.24(1H, m, H-2″), 3.75(1H, m, H-3″), 3.36(1H, m, H-4″), 3.46(1H, m, H-5″), 0.93(3H, d,J=6.0 Hz, H-6″)13C NMR (CD3COCD3, 100 MHz)δ:157.9(C-2), 135.8(C-3), 179.3(C-4), 162.9(C-5), 99.4(C-6), 164.9(C-7), 94.5(C-8), 157.9(C-9), 105.7(C-10), 122.8(C-l′),116.1(C-2′), 145.8(C-3′), 148.9(C-4′), 116.7(C-5′), 122.5(C-6′), 102.7(C-l″), 72.0(C-2″), 71.4(C-3″), 72.9(C-4″), 71.3(C-5″), 17.7(C-6″). 以上数据与文献对照[8]一致，鉴定该化合物为5,7,3′,4′-四羟基黄酮醇-3-O-α-L-鼠李糖苷.

2 结语

从奶子藤的乙醇提取物中分离得到8个化合物，所有化合物均为首次从该植物中分离得到，其中化合物3为首次从植物中分离得到. 本研究可为该植物的进一步开发利用提供一定的参考依据.

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