免疫荧光法检测细菌性阴道炎临床分析

张纪媛钟建玲何 惠

（1.广东省广州市白云区疾病控制预防中心检验科，510445；2.广州中医药大学第一附属医院）

免疫荧光法检测细菌性阴道炎临床分析

张纪媛1钟建玲2何 惠2

（1.广东省广州市白云区疾病控制预防中心检验科，510445；2.广州中医药大学第一附属医院）

目的 评价免疫荧光法检测细菌性阴道炎的临床价值。方法 80例疑似细菌性阴道炎患者取宫颈口分泌物3份标本，并标记为A、B和C。A标本均采用线索细胞检查法检测，B标本均采用免疫荧光法检测，C标本采用细菌培养法检测。A和B检测结果均参考C标本检测结果进行评价。结果 线索细胞法的特异度和准确度均显著低于免疫荧光法（P均＜0.05），两种检测方法的灵敏度差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 采用免疫荧光法检测细菌性阴道炎具有更高的检测价值，而且检测方法简单快速，有利于提高医院竞争力，值得检验临床考虑。

免疫荧光法；线索细胞法；细菌性阴道炎

阴道炎是妇科常见疾病，细菌性阴道炎亦占一定比例。细菌性阴道炎主要是由加德纳菌与以些厌氧菌混合感染引起的[1]。该病不仅给患者带来身心痛苦，而且还可能诱发宫颈癌或导致不育，因此早期及时准确的诊断，对于患者能更快更准确的接受治疗具有重要意义。为了选择合适的诊断方法，我们对患者分别采用线索细胞检查法和免疫荧光法进行检测。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年8月—2014年1月在广州中医药大学第一附属医院就诊的80例疑似细菌性阴道炎患者。入选标准：①符合以下项目中的任意两项，pH＞4.5，均质、稀薄的阴道分泌物，氨试验阳性；②检测期间无月经和妊娠，最近48 h内无性生活[2]。本组病例年龄（32.7±6.5）岁；病程（4.3±0.7）个月。

1.2 方法 所有患者均在消毒条件下用无菌棉签取宫颈口分泌物3份标本，并标记为A、B和C。A标本均采用线索细胞检查法检测：将标本采用滚动式方法薄而均匀地涂于玻璃片，自然干燥。然后进行革兰染色。然后在镜下直接查找线索细胞，阳性：染色不定或革兰阴性小杆菌或球杆菌覆盖于阴道鳞状上皮细胞表面。B标本均采用免疫荧光法检测：免疫荧光检测试剂盒为华大基因集团提供。滴加磷酸盐缓冲液（pH为7.4，浓度为0.01 mol/L）于待检标本片上，保持10 min后清除，然后滴加适当稀释的抗体溶液（含荧光标记）完全覆盖标本。恒温下保持一段时间后，取出玻片，磷酸盐缓冲液冲洗，之后在磷酸盐缓冲液中浸泡8～10 min。取出玻片，滤纸吸去多余水分，加甘油1滴，盖玻片覆盖，荧光显微镜下观察。阳性：成堆发亮绿色荧光。C标本采用细菌培养法检测，两种检测方法的结果均参考细菌培养法结果进行评价。统计两种检测方法的特异度、灵敏度和准确度。

表1 两种检测方法效果比较

1.3 统计分析 采用SPSS 12.0软件处理相关数据，计数资料采用检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

本次细菌培养法共确诊73例。线索细胞法的特异度和准确度均显著低于免疫荧光法（P均＜0.05），两种检测方法的灵敏度差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

3 讨论

加德纳菌是细菌性阴道炎的主要致病菌，该菌为革兰阴性或有变异的球菌样小杆菌，适于在pH＞4.5的环境下生长。细菌性阴道炎的诊断标准主要为4项[3]：①pH＞4.5；②均质、稀薄的阴道分泌物；③氨试验阳性；④存在加德纳菌。符合任意3项即可确诊，但临床上常常遇到符合前3项中的任意两项，还需要进一步确定是否加德纳菌，这时就有必要选择合适的检测方法，以提高加德纳菌的检出率。

线索细胞法是目前临床上广泛应用的检测方法，是利用加德纳菌能否被染色的物理性质。线索细胞即阴道上皮细胞，若存在加德纳菌，可大量附着其表面，从而在镜下被观测到。但线索细胞法受标本采集、显微镜质量和操作者经验等诸多因素影响[4]；此外，阴道内环境较为复杂，可能也存在着一些其他的革兰阴性菌，从而导致线索细胞法的特异度降低[5]，出现假阳性误诊的情况，如本次线索细胞法的特异度为86.3%，处于一个相对较低的水平。

免疫荧光法的原理是利用特异抗体与抗原（加德纳菌）结合，通过观察特异抗体所带荧光的分布和强度[6]，从而判断是否存在加德纳菌。由于抗原是针对加德纳菌特制的，可有效避免其他杂菌的非特异度结合，因此具有很高的特异度[7]。而且抗原可高效的结合于抗原，因此也具有很高的灵敏度[8]，有效避免了漏诊。本次免疫荧光法的特异度达到了97.3%，灵敏度达到了100.0%。

从观察结果来看，免疫荧光法的特异度和准确度均显著高于线索细胞法，而且具有很高的灵敏度，显示了更好的检测效果。我们认为，采用免疫荧光法检测细菌性阴道炎具有更高的检测价值，而且检测方法简单快速，有利于检测人员在保证准确度的基础上提高工作效率，对于提高医院竞争力具有积极意义，值得检验临床考虑。

[1] 石一复．外阴阴道疾病[M]．北京：人民卫生出版社，2005：256．

[2] 袁宏．单克隆抗体免疫荧光法快速检测加德纳菌[J]．实用医技杂志，2006，13(16)：2899．

[3] 崔海洋．免疫荧光法检测细菌性阴道炎的应用评价[J]．检验医学与临床，2013，10(16)：2124-2124．

[4] 田永红，熊承良，官黄涛，等．直接免疫荧光法检测阴道毛滴虫[J]．中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2003，2l(4)：242-244．

[5] 肖华英．阴道炎986例阴道分泌物检测结果分析[J]．中国药物经济学，2012，4(5)：116-117．

[6] 王会平，李岩，李斌，等．细菌性阴道炎临床检测及分析[J]．国际检验医学杂志，2011，32(8)：900-901．

[7] 马瑞亮，刘维琴，韩保良．妇科门诊阴道分泌物常规检测2634例分析[J]．菏泽医学专科学校学报，2011，23(3)：37-38．

[8] 赖炜玲，李丽，郝晓莹．2930例应用两种实验方法诊断细菌性阴道炎的比较[J]．中国微生态学杂志，2009，21(12)：1114-1115．

1672-7185（2014）12-0046-02

10.3969/j.issn.1672-7185.2014.12.026

2014-01-03）

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