四种芳香植物纯露体外抗氧化活性研究

孟 慧，刘洋洋，杨 云

（1.中国医学科学院＆北京协和医学院药用植物研究所海南分所 海南省南药资源保护与开发重点实验室，海南万宁571533；2.中国医学科学院＆北京协和医学院药用植物研究所，北京100093）

自由基及其诱导的氧化反应是导致生物衰老和某些疾病的重要因素，目前在医疗保健、美容化妆、食品等领域使用合成抗氧化剂已非常普遍，但近期动物实验研究发现，某些合成抗氧化剂如对叔丁基苯甲醚（BHA）、对叔丁基苯甲醇（BHT）等有潜在的生物毒副作用。天然抗氧化剂广泛存在于油料、大多数的香辛料和中草药中，其中药用芳香植物在芳香疗法中的独特功效与其作为抗氧化剂、高效清除体内自由基作用密切相关，因此从天然中草药中寻找抗氧化剂已成为研究热点。

据报道，薰衣草精油、肉豆蔻精油［1－6］、沉香叶片提取物［7－8］、降香［9］均具有明显的抗氧化作用。作者在此选取薰衣草、肉豆蔻、沉香、降香等几种市场常见植物精油的药用芳香植物，采用DPPH＋FRAP法研究其有效部位水蒸馏提取精油过程中产生的副产物纯露的抗氧化活性，拟为4种芳香植物的天然抗氧化能力研究提供理论依据，为开发纯露型抗氧化产品、提高资源利用率提供参考。

1 实验

1.1 材料

薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）、肉豆蔻（Myristica fragrans Houtt.）、沉香［Aquilaria sinen－sis（Lour.）Gilg］、降香（Dalbergia odorifera T.Chen），采自中国医学科学院药用植物研究所海南分所南药园，经中国医学科学院药用植物研究所陈伟平研究员鉴定。

将4种植物材料分别置于50℃烘箱中烘干至恒质量，用粉碎机粉碎，精密称取500g，用水蒸馏法提取得纯露25mL，备用。

1.2 试剂与仪器

1，1－二苯基－2－苦肼基（DPPH）自由基，日本和光纯药工业株式会社；三吡啶基三嗪（TPTZ），TCI化成工业发展有限公司；二甲基亚砜、无水乙醇、氯化铁、醋酸钠和冰醋酸均为国产分析纯。

TPTZ工作液：先分别配制0.3mol·L－1醋酸钠缓冲溶液（pH＝3.6）、10mmol·L－1TPTZ溶液、20 mmol·L－1氯化铁溶液，再将上述3种溶液按体积比10∶1∶1新鲜配制。

96孔板，格雷西亚化学技术有限公司；酶标仪，美国Thermo公司；电子天平，梅特勒－托利多仪器有限公司。

1.3 DPPH自由基清除率的测定

将DPPH用乙醇溶解并稀释至6.5×10－5mol· L－1，取100μL加入96孔板中，再加入100μL纯露，使总体积达到200μL，混匀。用酶标仪在517nm处每隔2min测定吸光度，重复5次取平均值，按下式计算清除率：

式中：A0为DPPH溶液100μL＋蒸馏水100μL的吸光度；A1为DPPH溶液100μL＋纯露100μL的吸光度；A2为纯露100μL＋无水乙醇100μL的吸光度。

1.4 纯露抗氧化能力的测定

吸取20μL纯露于96孔板中，再加入150μL TPTZ工作液，混匀，使最终反应浓度为3.76g·L－1，每隔5min在酶标仪上593nm处测定吸光度。以FeSO4为标准物质绘制标准曲线（图1），得回归方程y＝0.0035x＋0.17131，相关系数R2＝0.9987。

纯露的抗氧化能力以FRAP值表示：1FRAP单位＝1μmol·L－1FeSO4，即纯露的抗氧化能力相当于FeSO4的μmol·L－1数。

图1 纯露的抗氧化能力标准曲线Fig.1 The antioxidant activity standard curve of hydrolat

2 结果与讨论

2.1 4种芳香植物纯露对DPPH自由基的清除能力比较（图2）

图2 4种芳香植物纯露对DPPH自由基的清除能力Fig.2 DPPH Free radical scavenging activity of hydrolats from four species of aromatic plants

从图2可以看出：薰衣草纯露对DPPH自由基的清除能力随时间的推移而增强，最强出现在48min时的58.217%；肉豆蔻纯露对DPPH自由基的清除能力随时间的推移变化并不明显，最强出现在12min时的52.098%；降香纯露和沉香纯露对DPPH自由基的清除能力均随时间的推移而增强，降香纯露最强出现在46min时的8.525%，沉香纯露最强出现在50min时的9.016%。薰衣草纯露和肉豆蔻纯露对DPPH自由基的清除能力明显强于降香纯露和沉香纯露。

2.2 4种芳香植物纯露的抗氧化能力比较（图3）

图3 4种芳香植物纯露的抗氧化能力Fig.3 Antioxidant activity of hydrolats from four species of aromatic plants

从图3可以看出：薰衣草纯露和肉豆蔻纯露的抗氧化能力随时间的推移而增强，且最强都出现在60 min时，FRAP值分别为458.3μmol·L－1和422.1 μmol·L－1；降香纯露和沉香纯露的抗氧化能力也随时间的推移而增强，最强分别出现在50min和55min时，FRAP值分别为50.1μmol·L－1和56.1μmol· L－1。薰衣草纯露和肉豆蔻纯露的抗氧化能力明显强于降香纯露和沉香纯露。

3 结论

采用DPPH＋FRAP法对薰衣草纯露、肉豆蔻纯露、沉香纯露、降香纯露的体外抗氧化活性进行了比较，发现：对于DPPH自由基清除能力，薰衣草纯露最强，肉豆蔻纯露次之，沉香纯露第三，降香纯露最弱；对于抗氧化能力，薰衣草纯露最强，肉豆蔻纯露次之，沉香纯露第三，降香纯露最弱。表明薰衣草纯露、肉豆蔻纯露的抗氧化能力明显优于沉香纯露、降香纯露，可以作为潜在的天然抗氧化剂开发利用。

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