高尔基体蛋白联合甲胎蛋白检测在原发性肝癌早期诊断中的价值

徐向勇 刘显畅 李正峰 祝成亮

1.武汉钢铁（集团）第二职工医院心内科，湖北武汉430085；2.武汉市儿童医院，湖北武汉430080；3.武汉大学人民医院检验科，湖北武汉430060

高尔基体蛋白联合甲胎蛋白检测在原发性肝癌早期诊断中的价值

徐向勇1刘显畅1李正峰2祝成亮3

1.武汉钢铁（集团）第二职工医院心内科，湖北武汉430085；2.武汉市儿童医院，湖北武汉430080；3.武汉大学人民医院检验科，湖北武汉430060

目的探讨血清高尔基体蛋白73（GP73）、甲胎蛋白（AFP）联合检测对原发性肝癌（PHC）早期诊断中的作用。方法选取2007年7月～2012年7月武汉钢铁（集团）第二职工医院PHC患者76例（PHC组）、肝硬化患者53例（肝硬化组）和正常人群50例（对照组），采用酶偶联吸附法和化学发光免疫分析法进行血清GP73、AFP检测，分析两者单独及联合检测在早期诊断PHC中的价值。结果①PHC组患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP [（871.2±497.6）μg/L]明显高于肝硬化组[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和对照组[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差异均有统计学意义（P＜0.05）。②PHC组患者血清GP73和AFP阳性检出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分别高于肝硬化组[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和对照组[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差异均有统计学意义（P＜0.05）。③联合检测对PHC诊断灵敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP单项检测[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差异有统计学意义（P＜0.05）；而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论PHC患者血清中GP73和AFP水平较高，两者联合检测可以显著提高对PHC早期诊断的能力。

高尔基体蛋白；甲胎蛋白；原发性肝癌；诊断

原发性肝癌（PHC）是全球第六位常见的恶性肿瘤，是第三位常见的肿瘤相关死亡原因[1-2]。甲胎蛋白（AFP）是目前最重要的也是临床使用最频繁的肝癌标记物[3-4]，但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特别是老年人血清AFP正常[5]，故需要结合临床及其他检测指标做出正确诊断。高尔基体跨膜糖蛋白73（GP73）系列相关研究，证实GP73是肝癌早期诊断和术后复发病情评估的理想血清标记物，敏感性、特异性高于AFP[6]。本研究通过测量患者血清GP73和AFP水平，探讨联合检测在PHC早期诊断中的意义，为临床预防和治疗提供科学依据，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2007年7月～2012年7月来武汉钢铁（集团）第二职工医院（以下简称“我院”）心内科住院治疗76例PHC患者作为PHC组，男47例，女29例，平均年龄（47.4±11.5）岁；经影像及肝组织病理检测确诊为PHC，且住院前未接受相关治疗。肝硬化组选择同期住院的53例肝硬化患者，男33例，女20例，平均年龄（45.7±9.6）岁；患者经临床、CT联合检查确诊为肝硬化，排除肝占位相关疾病。对照组为来我院体检中心体检的50名健康人群，男29名，女21名，平均年龄（43.1±10.7）岁。三组年龄、性别构成比一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。研究对象均自愿签署知情同意书。

1.2 检测方法

三组研究对象均于清晨空腹肘静脉取血5 mL，双盲编号，离心后收集血清，置于-40℃冰箱保存备用。GP73采用酶偶联吸附法（ELISA）检测，试剂盒购至康乃格公司，全自动酶标仪（美国热电公司）测定A值。AFP采用全自动化学发光分析系统检测，仪器和试剂均购至罗氏公司。所有操作严格按照试剂和仪器说明书进行。

1.3 判断指标

GP73的参考值为0～85.5 μg/L，当≥85.5 μg/L时为阳性；AFP参考值为0～200 μg/L，当≥200 μg/L时为诊断PHC临界值[7]。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 19.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两独立样本的计量资料采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清GP73和AFP水平检测结果对比

PHC组患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP [（871.2±497.6）μg/L]明显高于肝硬化组[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和对照组[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 三组血清GP73和AFP阳性检测率比较

PHC组患者血清GP73和AFP阳性检出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分别高于肝硬化组[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和对照组[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 三组血清GP73和AFP水平检测结果比较（μg/L，x±s）

表2 三组血清GP73和AFP阳性检测率比较[n（%）]

2.3 GP73和AFP单项检测及联合检测对PHC诊断价值比较

联合检测对PHC诊断灵敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP单项检测[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差异有统计学意义（P＜0.05）；而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 GP73和AFP单项检测及联合检测灵敏度和特异性对比

3 讨论

PHC是全球第六位常见的恶性肿瘤，也是第三位常见的肿瘤相关死亡原因。PHC通常为生长缓慢、潜伏期长，肝癌的预后非常不好，主要原因在于当发现肝癌时，大多数已经处于中末期[8-9]，而处于初始阶段尤其是肝功能良好、癌细胞没有转移时预后较好。日本有报道这种患者的5年生存率在89%～93%（外科切除）和71%（经皮治疗）[10]。所以在早期阶段发现PHC对患者的预后至关重要，临床急切需要敏感的PHC标记物，用来诊断早期阶段PHC和观察对治疗的反映以及监测切除术后的复发情况。血清AFP是目前最重要的也是临床使用最频繁的PHC标记物[11-12]，AFP常用于PHC临床辅助诊断及高危人群的筛查。持续1个月以上AFP＞500 μg/L，并能排除妊娠、活动性肝炎、睾丸癌或卵巢畸胎瘤等，基本可确诊为PHC。AFP也用于PHC的治疗效果及预后评估，PHC彻底切除后，血清中的AFP浓度将迅速下降，1周内可降至正常水平[13]。若增高则可能复发，其增高比肝功能异常出现得更早。但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特别是老年人血清AFP正常故需要结合临床及其他检测指标做出正确诊断[14]，且它的敏感性一直不高，文献报道，诊断肝癌的敏感性为40%～69%。其次，在其他一些疾病中也有AFP高于临界值的报道[15-16]。

近年来的研究发现，GP73是一种新型的标志物。Shi等[17]研究发现GP73对肝癌具有较高的诊断效率，其ROC曲线的AUC达到了0.94，高于AFP（AUC=0.79）（P＜0.01），若将GP73的诊断界值设置为8.5 RU，其诊断敏感性为74.6%，特异性为97.4%；而AFP在35 ng/mL的界值处，诊断敏感性仅为58.2%，特异性为85.3%。最重要的是，在AFP为阴性（＜35 ng/mL）的326例肝癌患者中，有218例GP73呈阳性；在GP73为阴性（＜8.5 RU）的200例肝癌患者中，AFP阳性的患者高达92例[18]。这提示，二者在肝癌的诊断上可能存在互补作用。本研究采用GP73联合AFP检测结果发现PHC组患者血清GP73、AFP、明显高于肝硬化组和对照组（P＜0.05），该组患者血清GP73和AFP阳性检出率分别高于肝硬化组和对照组（P＜0.05），说明PHC患者具有较高的血清GP73、AFP水平和检测阳性率，提示两者存在作为PHC标记物的可能。对GP73和AFP单项检测及联合检测结果对比后发现，联合检测的灵敏度为96.1%，远高于单项检测的两组，而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义，由此说明两者联合检测具有较高的互补性，避免早期PHC诊断过程中出现漏诊，为临床治疗提供更为可靠的参考。

综上所述，GP73与AFP联合检测可以为PHC早期诊断提供更有效的方法。但是本研究样本数量有限，还需要进一步扩大样本量进行深入研究。

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Value of GP73 and AFP in early diagnosis of primary liver cancer

XU Xiangyong1LIU Xianchang1LI Zhengfeng2ZHU Chengliang3
1.Department of Cardiology,the Second Worker's Hospital of WISCO,Hubei Province,Wuhan430085,China; 2.Children's Hospital of Wuhan City,Hubei Province,Wuhan430080,China;3.Department of Clinical Laboratory, Renmin Hospital of Wuhan University,Hubei Province,Wuhan430060,China

Objective To explore the clinical value of combined detection of serum GP73,AFP in the early diagnosis of primary liver cancer(PHC).Methods 76 cases of PHC,53 cases of liver cirrhosis,50 cases of normal people from July 2007 to July 2012 in the Second Worker's Hospital of WISCO were selected as PHC group,liver cirrhosis group and control group respectively,the enzyme coupling adsorption method and chemiluminesent lmmunoassay assay were used to detect the serum GP73,AFP,the value of single and combined detection in early diagnosis of PHC were analyzed. Results①The serum GP73,AFP in PHC group[(208.3±53.6),(871.2±497.6)μg/L]were higher than those in liver cirrhosis group[(74.8±26.4),(91.7±68.5)μg/L]and control group[(31.6±7.7),(12.7±7.9)μg/L],the differences were statistically significant(P＜0.05).②Positive detection rate of serum GP73 and AFP in PHC group[81.6%(62/76), 63.2%(48/76)]were higher than those in liver cirrhosis group[15.1%(8/53),17.0%(9/53)]and control group[0.0%(0/50), 0.0%(0/50)],the differences were statistically significant(P＜0.05).③PHC diagnosis sensitivity by combined detection [96.1%(73/76)]was higher than that by GP73 and AFP single detection[81.6%(62/76),63.2%(48/76)],the differences were statistically significant(P＜0.05).The differences of PHC diagnosis specificity between combined detection and GP73 and AFP single detection was not statistically significant(P＞0.05).Conclusion PHC patients have a higher GP73 and AFP levels,the combined detection can significantly improve the diagnosis of early PHC.

GP73;Alpha fetal protein;Primary hepatic carcinoma;Diagnose

R735.7

B

1673-7210（2014）01（a）-0083-03

2013-10-16本文编辑：李继翔）

国家自然科学基金项目（编号81101485）。