家兔急性失血性休克对血清氨基末端脑钠肽前体浓度的影响

蔺发林，马文泽，谷昆峰，马 琨，马朋羽，宋铁鹰*

(1.河北省赞皇县医院麻醉科，河北 赞皇 051230；2.河北省栾城县医院麻醉科，河北 栾城 051430；3.河北省石家庄市第一医院麻醉科，河北 石家庄 050011；4.河北省石家庄市第四医院麻醉科，河北 石家庄 050011)

氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-B-typenatriureticpeptide,NT-proBNP)因为可以准确发现早期和轻度的心力衰竭[1]而成为了人们的研究热点。失血性休克是麻醉科医生经常要面对的问题，但失血性休克对血清NT-proBNP是否产生影响目前尚无定论。本研究建立失血性休克家兔模型，探讨失血性休克对NT-proBNP浓度的影响，旨在为临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物：由河北省实验动物中心提供健康成年雄性大耳白家兔30只，体质量2.0～2.5kg，所有家兔实验前12h禁食水。

1.2 实验材料：NT-proBNP定量 EIASA试剂盒(上海西唐生物科技有限公司)；乌拉坦[中国医药(集团)上海化学试剂公司]；心电图机(上海医用仪器厂生产)；BL-420E生物信号采集系统(成都泰盟科技有限公司产品)。

1.3 实验方法

1.3.1 失血性休克模型的建立：用25%乌拉坦(1.0g/kg)腹腔注射麻醉,背位固定于手术台上,口中置入特制的通气道保证通气，行右侧股动脉插管术，接BL-420E生物机能实验系统测定血压,并同步连接心电图机,记录Ⅱ导联上心电图计算其心率(heart rate,HR)。行左侧股静脉插管以备输液及给药用。全身肝素化(500U/kg)，行左侧股动脉插管并与50mL注射器相连,按20mL/kg的总量速放血(10mL/min)至注射器内,使平均动脉压(mean artery pressure，MAP)从正常下降至40～50mmHg，并同时调节注射器内血容量使MAP连续维持在这一范围建立失血性休克模型[2]。

1.3.2 观察指标：分别于家兔置管成功后即刻(T1)和置管后10min(T2)、20min(T3)、30min(T4)、50min(T5)、70min(T6)、90min(T7)各时点采集5mL静脉血检测血红蛋白(haemoglobin,Hb)、血清NT-proBNP。对照组仅给予麻醉和动静脉置管处理，无其他操作。

2 结 果

2.1 2组家兔不同时点MAP和HR的比较：随着实验组时间的推移，2组间MAP均呈降升再降再升再降再升3次起伏波动，但对照组起伏平缓，实验组起伏波动较大；实验组HR只在T2时轻度升高，然后逐渐缓慢下降，对照组则成不规律的上下波动。2组MAP和HR在组间、时点间、组间·时点间的交互作用差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2 2组家兔不同时点Hb和NT-proBNP的比较：随着时间的推移，实验组Hb逐渐降低，对照组总体趋势降低，但T4、T6有波动；实验组血清NT-proBNP逐渐升高，而对照组血清NT-proBNP从T1～T4逐渐增高，T5、T6降低T7再升高。2组Hb、NT-proBNP在组间、时点间、组间·时点间的交互作用差异均有统计学意义(P<0.01)。见表2。

组别MAP(mmHg)T1T2T3T4T5T6T7实验组99.2±12.140.8±8.444.2±9.343.6±7.248.2±6.642.9±8.344.3±7.7对照组101.3±11.495.6±10.8 100.4±12.399.6±13.398.4±12.9102.4±14.399.3±15.2组间F=3 276.223 P=0.000 时点间F=90.586 P=0.000组间·时点间F=59.003 P=0.000组别HR(次/min)T1T2T3T4T5T6T7实验组240.5±13.6262.6±16.7210.3±11.4196.7±12.8 182.4±10.9 173.5±12.6168.9±14.8对照组242.3±12.8248.6±13.4239.7±18.6241.3±13.4245.4±14.4238.2±16.7241.3±16.4组间F=646.946 P=0.000时点间F=94.901 P=0.000组间·时点间F=74.148 P=0.000

MAP：mean artery pressure；HR：heart rate

组别Hb(g/L)T1T2T3T4T5T6T7实验组84.5±8.850.8±4.149.2±5.348.6±6.247.2±7.447.4±8.346.3±7.1对照组84.8±4.986.1±8.1 82.4±3.884.6±6.381.2±4.983.4±5.381.3±4.2组间F=1 352.018 P=0.000时点间F=35.192 P=0.000组间·时点间F=29.191 P=0.000

表2(续)

NT-proBNP：N-terminal pro-B-typenatriureticpeptide；Hb：haemoglobin

3 讨 论

近年有研究[3]表明年龄、肥胖、肾功能不全、慢性贫血等均可对NT-proBNP产生一定影响。应用血清NT-proBNP诊断或鉴别诊断心力衰竭时要考虑到上述因素的影响。但关于术中急性失血性休克对于血清NT-proBNP的影响尚无定论。本研究通过股动脉放血及必要时注射器容量的调控和液体的补充使家兔的血压维持在40～50mmHg，监测血流动力学，这一处理基本符合失血性休克的临床征象。 该方法制作的失血性休克模型符合实验预期要求，且技术简单、可重复性强。

本研究结果显示，实验组家兔由于在短时间大量血液丢失，血容量骤减，导致了T2时点血压和血红蛋白与T1比较差异较大；实验组HR与T1时点比较，由于休克初期心脏的代偿，T2时点是上升的，可随着时间的延长，家兔的心脏代偿功能逐渐减退，所以T3～T7时点HR逐渐减慢。本研究显示不同时点急性失血性休克会对血清NT-proBNP浓度产生影响，随着时间的推移，血清NT-proBNP水平逐渐上升，NT-proBNP只在血容量增加和压力负荷增加时反应性从心脏分泌。但失血性休克这个病理状态下血容量是骤减的，低的容量负荷理论上不会触发NT-proBNP的分泌。本研究结果的原因可能有以下几个方面：①有研究[4]表明NT-proBNP主要产生于心室细胞，对心肌细胞的牵拉则是促其产生和分泌的主要因素，但除心肌细胞外，心肌成纤维细胞同样能够产生BNP及NT-proBNP。由于心脏不仅是一个机械泵，同时也是内分泌和自分泌、旁分泌器官,多种活性肽类激素能够刺激心肌的不同细胞产生BNP相关肽。进而它们之间可能发生了一定程度的联动效应。②机体长时间的低压状态使得心肌缺血缺氧，灌注不足，以及血容量的骤减使得心室的室壁张力急剧变化可以触发NT-proBNP的合成分泌[5]。③失血性休克状态下由于Hb的大量丢失，机体的氧供减少，氧分压下降明显，随着血氧分压的降低，引起肺小动脉收缩，使肺动脉压的升高，从而使右心室分泌少量NT-proBNP，血清NT-proBNP浓度升高[6]。④相对于血清BNP 20min的半衰期，血清NT-proBNP的半衰期长达60～120min，本实验总共90min结束，所以大量NT-proBNP在这一时间内不断的产生，而自然消除的少，导致一定程度上的数值偏高。

失血性休克在外科急救中并不少见，本研究证实在失血性休克这种病理状态下NT-proBNP的分泌增加，所以此类患者将血清NT-proBNP作为心力衰竭的诊断和预后指标,在血清NT-proBNP的临床判读上应上调其阳性诊断的基础值，同时结合其他临床表现、心肌损伤标记物、心脏彩色超声等综合判断。

[1] JANUZZI JL,CAMARGO CA,ANWARUDDIN S,et al.The N-terminal pro-BNP investiation of dyspnea in the emerency department (PRIDE) study[J].Am J Cardiol,2005,95(8)：948-954.

[2] 卢瑗瑗，尹文，虎晓岷.家兔失血性休克并内毒素诱发多器官功能障碍综合征模型制备[J].江苏医药，2005，31(6):448-450.

[3] KIM HN， JANUZZI JL Jr.Natriuretic peptide testing in heart failure[J].Circulation,2011,123(18):2015-2019.

[4] FERTIN M,HENNACHE B,HAMON M,et al.Usefulness of serial assessment of B-type natriuretic petide,troponin I,and C-reactive protein to predict left ventricular remodeling after acute myocardial infarction (from the REVE-2 study)[J].Am J Cardiol,2010,106(10):1410-1416.

[5] 陈鲁原，吴秸． N 端脑利钠肽前体在心力衰竭的诊断，预后，治疗管理上的国际专家共识[J]． 中华高血压杂志，2009，17(3):197．

[6] 林雪，陈连凤，姚义安，等.多种因素对呼吸困难住院患者脑利钠肽水平的影响[J].中国心血管杂志，2010，15(3)：213-216.