江西省抚州市妇幼保健医院,江西 抚州 344000
仙桃草,学名蚊母草,为玄参科婆婆属植物,带虫瘿的全草入药。2010版《中国药典》记载:仙桃草活血消肿,止血,止痛,主要用于跌打伤痛等诸痛。本研究通过VEGF的信号传导通路探讨仙桃草促进骨折愈合的机制,现报道如下。
1.1 材料
1.1.1 实验动物 健康新西兰长耳大白兔64只,8~10月,体重2.0~2.5kg,雌雄各半,购自南昌大学医学院动物科学部。
1.1.2 实验材料 仙桃草由本院中药房提供,VEGF Elisa检测试剂盒由美国PeproTech公司提供。
1.2 方法
1.2.1 造模及分组 64只新西兰大白兔适应性喂养1周后,随机分成治疗组和对照组,每组各32只。3%戊巴比妥钠lml/kg兔耳缘静脉注射麻醉,对兔左前肢常规消毒,外侧切口约1.5~2.0cm,逐层剥离暴露桡骨中段。在左侧桡骨中段约3mm横行锯断,制造标准骨折模型,不作任何固定,生理盐水冲洗切口,逐层缝合切口。术后常规分笼饲养,肌肉注射40万单位青霉素,共3d,每天1次。
1.2.2 制药及给药 仙桃草先用高出药面2~3mm的温水浸泡15~20min,后水煎煮3次,趁热榨渣取汁,过滤后合并药液,浓缩成含生药5g/ml的药液,无菌封瓶,放在4℃冰箱保存备用。术后当天治疗组进行仙桃草提取液灌胃,对照组灌胃相同体积的生理盐水,每日1次。给药量按以下公式计算。兔给药量(g·kg-1)=人给药量(g·kg-1)×93/100×人体体重(kg)1/3/兔平均体重(kg)1/3。
1.2.3 标本检测 于实验第0天、7天、14天及21天每组各处置8只动物。麻醉后在无菌操作下快速取出骨折处骨痂组织段1cm左右放入离心管,液氮骤冷4min后放在-80℃冰箱保存,后严格按照试剂盒说明采用Elisa方法进行VEGF检测。
1.2.4 统计分析 实验数据均以SPSS 17.0数据统计软件处理,以均数±标准差表示,结果采用t检验,以P<0.05或P<0.01表示差异有统计学意义。
结果表明,与对照组比较,治疗组第7、14天VEGF的表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05);VEGF的表达第7天达到峰值,之后表达逐渐减弱。
表1 骨折区组织VEGF的表达
注:与对照组比较,▲P<0.05。
骨折,指骨骼的完整性或连续性发生部分或完全断裂,古称折骨[1]。《全国中草药汇编》和《中华本草》均记载仙桃草具有活血消肿,止血止痛的功效。主治跌打损伤,痈疽疮疡等。
研究表明,血管内皮生长因子是新血管生成和血管内皮细胞的特定丝分裂的重要介质[2]。血管内皮生长因子具有促进血管生成、维持血管功能以及增加血管内皮细胞通透性的作用[3]。VEGF作为促进骨折愈合的重要因子,具有促进血管形成、加速骨折愈合的作用[4]。
本研究结果分析,与对照组比较,治疗组第7、14天VEGF的表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05) ;VEGF的表达第7天达到峰值,之后表达逐渐减弱。结果提示,骨折当天仙桃草治疗效果还未显现,而骨折中后期仙桃草治疗效果不明显;骨折早期,仙桃草能够促进VEGF的表达,达到促进骨折愈合的效果。
[1]李玄.中医骨伤科基础[M].北京:人民卫生出版社,2010:53.
[2] Gerstenfeld LC, Cullinane DM, Barnes GL, et al. Fracture healing as a post-natal developmental process: molecular, spatial, and temporal aspects of its regulation[J]. J Cell Biochem,2003,88(5):873-884.
[3] Le AX, Miclau T, Hu D.Molecular aspects of healing in stabilized and non-stabilized fractures[J].J Orthop Res,2001,19(1)78-84.
[4] 鲍小明,张民.VEGF在骨质疏松性骨折愈合中的作用[J].中国矫形外科杂志,2012,20(22):2054-2056.