黄花草木樨各部位脂肪酸含量比较

胡雪，张晶，林年丰

（1.长春大学旅游学院，吉林长春130607；2.长春科技学院，吉林长春130600；3.吉林大学环境与资源学院，吉林长春130012）

黄花草木樨各部位脂肪酸含量比较

胡雪1，2，张晶2，*，林年丰3

（1.长春大学旅游学院，吉林长春130607；2.长春科技学院，吉林长春130600；3.吉林大学环境与资源学院，吉林长春130012）

利用索氏提取法对黄花草木樨油脂进行提取，油脂经饱和氢氧化钾-甲醇钠皂化，甲醇-硫酸甲酯化后，采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）分析，鉴定出13种脂肪酸，并用峰面积归一法测定各组分相对含量，结果表明，黄花草木樨中含有大量的不饱和脂肪酸，各部位所含主要脂肪酸有明显差异，根、叶、种籽中主要的脂肪酸分别为油酸、棕榈酸及亚麻酸、亚油酸，脂肪酸含量比例分别为10.42％、5.87％、2.87％、17.51％。黄花草木樨植株和种籽中均含有多种脂肪酸成分，为进一步完善和开发黄花草木樨脂肪酸的系统研究提供参考。

黄花草木樨；脂肪酸；气相色谱-质谱

黄花草木樨（Melilotus officinalis）为豆科（Leguminosae）草木樨属（Melilotus Mill.）一年或二年生植物，在我国分布广泛[1]，新近药理研究表明[2]黄花草木樨具有很强的抗炎作用，全草有改变血管通透性、促进血液循环、改善血管平滑肌、调节免疫、抗氧化和清除自由基等药理作用[3-4]。据资料显示，黄花草木樨中主要含有香豆素类，酚酸类，黄酮类和三萜皂苷类以及脂肪油类等多种化合物[5-7]。目前鲜见关于黄花草木樨脂肪酸类化合物的报道，本研究通过索氏法提取黄花草木樨根、叶、种籽中脂肪，经皂化，甲酯化后得到混合脂肪酸甲酯，然后作GC-MS分析，因此，研究黄花草木樨脂肪酸的组成，对如何高效开发利用黄花草木樨做为保健型食用油原材料提供参考。

1.1 试验材料

黄花草木樨；产于吉林省大安市，原种引于俄罗斯西伯利亚，植株由吉林大学环境与资源学院林年丰教授鉴定为豆科（Leguminosae）草木樨属（Melilotus Mill.）黄花草木樨（Melilotus officinalis）将根、叶、种籽分别干燥、粉碎、过40目筛，得实验用样品。

1.2 试剂与仪器

石油醚（沸程60℃～90℃）、无水甲醇、氢氧化钠、浓硫酸、氯化钠、无水硫酸钠均为分析纯。

GC6890-MS5973N型气相色谱-质谱联用仪、DB-17色谱柱：美国安捷伦科技有限公司。

1.3 黄花草木脂肪酸提取

1.3.1 索氏法提取

精密称取草木樨根、叶、种籽样品各10.000 g，置于索氏提取器中，加入石油醚回流8 h，回收溶剂后，得棕黄色油状物，脂肪酸含量按公式计算：

草木樨脂肪酸含量（％）=提取油状物的重量/干燥后粉末的重量×100％

1.3.2 粗脂肪皂化水解

精密称取10.0 g黄花草木樨根、叶、种籽粗脂肪于锥形瓶中，加入5％KOH乙醇溶液，70℃回流2 h后迅速冷却，分别加入20mL蒸馏水和10mL石油醚萃取两次，石油醚层弃去，合并水层，用HCl酸化至pH为2～3，将酸化后的溶液用10mL石油醚萃取，将石油醚萃取液水洗至中性，以无水硫酸钠去除多余水分，回收石油醚，即得黄花草木樨混合脂肪酸。

1.3.3 混合脂肪酸甲酯化

精密称取1.3.2项中所得3种混合脂肪酸各0.500 g，加入20mL 5％H2SO4-甲醇溶液并加入几粒沸石，70℃水浴回流至溶液澄清透明时，取出，迅速冷却，加入20mL蒸馏水，以10mL石油醚萃取，萃取液待分析。

1.4 GC-MS分析黄花草木樨脂肪酸类成分

1.4.1 GC-MS测定条件

GC条件：HP-5（30.0m×0.25mm×0.25μm）弹性石英毛细管柱，初始温度80℃（保持3min），以4℃/min的升温速率升至180℃（保持2min），然后以5℃/min升至280℃，恒温30min，载气为99.999％高纯氦，进样量为1μL。

MS条件：EI离子源，电子能量70eV，离子源温度为280℃，四级杆检测器温度为150℃，EM电压1565V，质量扫描范围20m/z～500m/z，分流进样，分流比为20∶1。

2 结果与讨论

根据上述实验方法和条件，根、叶、种籽经索氏提取法处理后得到脂肪油分别为0.052、0.267、0.937 g，计算可知黄花草木樨各部位脂肪酸含量分别为0.52％、2.67％、9.37％，经皂化甲酯化后，利用GC-MS联用仪，根据GC-MS数据处理系统，利用NIST02谱图库进行自动检索，同时结合人工图谱解析，确定其化学成分，并用总离子流面积归一法测定其相对百分含量，结果见表1。

表1 黄花草木樨脂肪酸甲酯的化学组成及含量Table1 The composition and content of fatty acids in Melilotus officinalis

由表1可见，由俄罗斯引种产于大安的黄花草木樨共分离鉴定出13种脂肪酸成分，根中尤以油酸含量最高，占10.42％，种籽中则含有丰富的不饱和脂肪酸（亚麻酸2.87％、亚油酸17.41％、DHA 0.33％），它们都是人体所必需的脂肪酸，这两种脂肪酸都是人体无法合成的，需靠外界食物补充供给，具有极高的食用和医用价值。而叶中棕榈酸可达5.87％，棕榈酸被广泛用于洗衣皂，彩胶成色剂等，亦可将叶中的脂肪酸广泛用于工业生产中。

3 结论

本实验表明，黄花草木樨种籽中亚油酸和亚麻酸总含量高达20.28％，亚油酸具有抗癌、降低胆固醇、抗氧化、预防血栓和动脉粥样硬化等功效，同时还是人体合成前列腺素的主要物质[8]。因此，可以考虑将黄花草木樨种籽作为保健型食用油的来源进行开发利用。叶中高含量的棕榈酸则是洗涤剂工业化生产良好的原料。

黄花草木樨是一种集观赏、药用、改善土壤酸碱性等经济价值极高的天然牧草，对其脂肪酸成分的研究，进一步确定了黄花草木樨的营养价值，其叶和种籽中的脂肪酸不仅可以作为保健品的原材料，还可作为生物柴油的原料，通过对其脂肪酸成分分析，也为今后科学工作者更充分地开发利用黄花草木樨资源提供参考。

[1]杨玉凤．耐旱耐瘠的先锋牧草草木樨[J]．北京农业,2003,12(10): 26-27

[2]Plesea-Manea Luminita,Parvu Alina Elena,Parvu M,et al.Effeets of Melilotus offieinalis on aeute inflammation[J].PhytotheraPy Research,2002,16(4):316-319

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[6]康菊珍．藏药草木樨的化学成分研究[J]．西北民族大学学报:自然科学版,2009,30(3):40-41

[7]汤春妮,闫晓前,马喜锋,等.分光光度法测定黄花草木樨中总黄酮含量[J].化学与生物工程,2012,29(1):92-94

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Study on the Extracting Technology of Melilotus officinalis and Analysis of Fatty Acid by GC-MS

HU Xue1，2，ZHANG Jing2，*，LIN Nian-feng3
（1.College of Tourism Changchun University，Changchun 130607，Jilin，China；2.College of Changchun Institute，Changchun 130600，Jilin，China；3.College of Resources and Environmental Science，Jilin University，Changchun 130012，Jilin，China）

Amonds oil from Melilotus officinalis was obtained using Soxhlet extractor to method，and the amonds oil was saponified with saturated KOH-Methanol.The mixed fatty acids were methylated by methanol-H2SO4.The fatty acids in the Melilotus officinalis were analyzed by GC-MS.Thirteen fatty acids were identified，and the relative contents of constituents.The Results show that the Melilotus officinalis contain high contents of unsaturated fattyacid.The performances of the various parts of fatty acids were not uni-form.There were oleic acid（10.42％）in the root，pamitic acid（5.87％）in the Leaves，linolenic acid（2.87％）and linoleic acid（17.51％）in the seeds.There were some important fatty acids in Melilotus officinalis and seeds.These results provided theoretical basis for chemical constituent research of Melilotus officinalis and future extent research.

Melilotus officinalis；fatty acid；GC-MS

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.04.023

2013-04-19

公益性（农业）科研专项经费项目（200903031）

胡雪（1986—），女（汉），助教，硕士研究生，研究方向：植物资源开发与利用。

*通信作者：张晶（1971—），女，教授，硕士生导师，多年从事天然产物化学的研究工作。