小驳骨的化学成分与药理作用研究进展

唐闻闻，曾佳，王艺纯，黄婷

(1.上海市龙华医院药剂科，上海 200032;2.上海市计划生育科学研究所，国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室，上海生殖健康药具工程技术研究中心，上海 200032;3.吉林省食品药品检验所中药室，吉林130033)

小驳骨是《中华人民共和国药典》2010年版一部［1］新增药材，又名接骨草、乌骨黄藤、裹篱樵等，为爵床科植物小驳骨(Gendarussa vulgaris Nees)的干燥地上部分。其味辛、苦，性平，归肝、肾、肺经，具有祛瘀镇痛、续筋接骨之功效，用于跌打损伤、筋伤骨折、风湿骨痛、血瘀经闭及产后腹痛［1］。因其续筋接骨之力很强，故有“小驳骨丹”之称。小驳骨在我国民间应用广泛，内服多水煎或研末冲服，外用则取鲜品捣烂，或用酒调后热敷患处［2］，《本草纲目拾遗》《生草药性备要》《岭南采药录》《陆川本草》等医药古籍中均有记载。近年来关于小驳骨化学成分及现代药理学作用的研究受到国内外学者的重视，从小驳骨提取物中发现了一些新的药理活性。笔者对小驳骨的化学成分及药理作用在国内外的研究进展作一综述，以期为该药的深入研究提供一定的参考。

1 化学成分

1.1 生物碱 LU等［3］从小驳骨地上部分的95%乙醇提取物中分离得到3个生物碱，其中1个为原小檗碱类新化合物13-hydroxyl gusanlung A，另外两个分别为gusanlung A和gusanlung B。细胞毒活性检测表明13-hydroxyl gusanlung A对肝癌细胞株 HepG2具有一定的细胞毒活性(GI50:2.08 μg·mL－1)。

1.2 挥发油 小驳骨含有挥发油成分，其性状为淡黄色透明油状液体，且具特殊浓郁香味。苏玲等［4-5］分别采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)对小驳骨的挥发油成分进行分析，初步鉴定出萜类、醇类、芳香族类、烯类、酮类和烷烃等共41种化合物，其中萜类成分占大多数。但含量均较低，含量达1%以上的成分有12种。相对含量较高的成分主要有植物醇(39.70%)、植物酮(4.75%)、1-辛烯-3-醇(2.84%)和广藿香醇(2.74%)等。萜类化合物有较好的抗血小板聚集、扩张心脑血管、增加血流量、抑菌镇痛等生物活性，提示可能与小驳骨祛风湿、散瘀血、续筋骨作用有关。

1.3 黄酮 黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎等广泛药理活性［6-7］。PAVAL等［8］报道小驳骨中含有芹菜素、牡荆黄素等黄酮类成分，芹菜素具有抗炎作用，其抗炎机制为降低氧化性应激及阻断炎症因子的表达［9］;牡荆黄素也具抗炎作用，它主要通过抑制5-脂加氧酶(5-lipoxygenase，5-LOX)与环氧化酶(cyclo oxygenase-2，COX-2)通路来发挥抗炎活性［10］。此外，LU 等［3］从小驳骨地上部分的95%乙醇提取物中分离出华良姜素和芫花素。

1.4 苷类 郗砚彬［11］采用硅胶柱色谱，并利用质谱(mass spectrometry，MS)、磁共振 (nuclear magnetic resonance，NMR)从小驳骨地上部分的75%乙醇提取物中分离出胡萝卜苷，为首次从小驳骨中分离。LU等［3］从小驳骨地上部分的95%乙醇提取物中分离到刺五加苷E，文献报道刺五加苷E具有促性腺和诱生干扰素作用［12-13］。

1.5 无机元素 刘文粢等［14］用ICPQ-1012型电感耦合等离子体发射光谱仪测定小驳骨茎叶、花和药酒中钙(Ca)、镁(Mg)、锌(Zn)、铁(Fe)、铜(Cu)等15 种无机元素的含量。结果表明，在小驳骨茎叶、花和药酒中，Ca、Mg含量极高，远远高于其他元素含量，其中茎叶中Ca含量最高，药酒中Mg含量最高。Ca可加速骨的生长和骨折的愈合，Mg是骨骼矿化和建立有机骨板的重要元素，Sr可促进骨骼钙化，Zn和Mn等元素在骨的生成和代谢中起着重要作用，作者认为这些元素是小驳骨治疗骨折的重要物质基础之一。Fe、铬(Cr)、Cu、镍(Ni)、锰(Mn)、Zn 都具有一定的活血作用，这些元素与小驳骨挥发油中芳樟醇、苯甲醇等多种镇痛抗菌物质起着活血镇痛的协同作用。

1.6 香豆素类 LU等［3］从小驳骨地上部分95%乙醇提取物中分离得到岩白菜素，文献报道岩白菜素具有止咳、防治大鼠实验性慢性气管炎［15］、抗炎［16-17］和免疫增强作用［18］。

1.7 其他 文献报道，小驳骨还含有β-谷甾醇、还原糖［19］、木酚素类、木栓酮、羽扇醇、取代型芳族胺［20］、酚二聚体［21］和三萜类化合物［20］。其中木酚素类为抗风湿病的主要成分［22］。在已知的血管生成抑制剂中，三萜类化合物占据重要的位置［23］。

2 药理作用

目前文献报道的小驳骨的药理作用主要有抗炎镇痛、保肝抗氧化、免疫抑制、抗生成血管和抗艾滋病毒等，近年来对其抗炎镇痛的活性和机制研究相对深入，但其他药理作用的研究并不多见。

2.1 抗炎止痛作用 PAVAL等［24］分别采用夫罗因德佐剂和胶原诱导大鼠炎症模型研究小驳骨乙醇提取物的抗炎活性，分别给予大鼠小驳骨95%乙醇提取物与阿司匹林阳性对照，结果小驳骨提取物与阿司匹林的抗炎活性相似。JOTHIMANIVANNAN等［25］对小驳骨95%乙醇提取物进行抗炎和镇痛活性研究，抗炎活性研究采用角叉菜胶致小鼠足肿胀模型和棉球肉芽肿模型，镇痛活性研究采用埃迪氏热平皿实验和乙酸致痛扭体实验模型，分别给予小鼠小驳骨乙醇提取物250和500 mg·kg－1，结果在2 000 mg·kg－1剂量下小鼠未显示出大量死亡，500 mg·kg－1给药剂量对小鼠足肿胀和棉球肉芽肿增生的抑制率分别为52%和45%。足肿胀热皿反应具有剂量依赖的特点，醋酸引起疼痛扭体在500 mg·kg－1剂量时显示33%的抑制力。与醋氯酚酸对照组比较，小驳骨乙醇提取物显示剂量依赖的抗炎活性和良好的镇痛作用，作者认为这可能是由于其黄酮类化合物抑制了致炎致痛的内分泌物形成和释放而发挥作用。KAVITHA等［26-27］研究小驳骨对角叉菜胶致大鼠足肿胀急性炎症模型的抗炎活性，发现小驳骨根甲醇提取物100 mg·kg－1可显著抑制角叉胶诱发大鼠足肿胀5 h后的水肿形成，并可抑制大鼠血浆单核细胞COX、5-LOX与15-LOX活性，由髓过氧物酶活性降低推断小驳骨甲醇提取物能减少嗜中性粒细胞渗入足组织，对足组织COX-2活性有53%抑制作用。同时，采用乙酸乙酯萃取法对小驳骨甲醇提取物进行纯化，与其他提取物和诺华公司镇痛药voveran相比，50 mg·kg－1乙酸乙酯部位分别对角叉菜胶诱导大鼠足肿胀3和5 h后有80%和93%抑制作用，且呈剂量依赖性地抑制脂多糖诱导的人外周血单核细胞(hPBMCs)COX、5-LOX、白细胞介素(interleukin，IL)-6 与核因子 κB(NF-κB)，并降低脂多糖诱导的hPBMCs诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和COX-2 mRNA的表达水平。VARMA等［28］研究小驳骨叶的70%乙醇提取物对脂多糖诱导的巨噬细胞系RAW 264.7细胞一氧化氮(nitrogen monoxidum，NO)的产生、iNOS及基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因表达的抑制作用，结果显示，其醇提物呈浓度(200～50 μg·mL－1)依赖性地抑制脂多糖(1 μg·mL－1)诱导的巨噬细胞NO产生，并显著抑制巨噬细胞iNOS mRNA表达，同时下调其MMP-9基因表达，这可能是小驳骨的抗炎作用机制。

2.2 保肝抗氧化作用 KRISHNA等［29］研究小驳骨茎提取物的体外抗氧化活性及其甲醇提取部位的体内保肝活性。采用DPPH自由基清除活性法、过氧化氢清除活性法及乙二胺四醋酸(EDTA)存在与否情况下三价铁离子的减少来评价其抗氧化活性，采用四氯化碳诱导的白化小鼠肝损伤实验评价其体内保肝活性。甲醇提取部位含有更多酚类及黄酮类成分，显示良好的抗氧化作用，并在300 mg·kg－1剂量下显示较好的保肝作用，但随剂量的增加其保肝活性降低。小驳骨茎提取物的保肝作用较为温和，作者认为可能与其总酚类和总黄酮的含量有关。

2.3 免疫抑制作用 AROKIYARAJ等［30］通过胸腺摄取淋巴细胞增殖实验研究了小驳骨甲醇提取物对淋巴细胞增殖的抑制作用，结果显示100 μg·mL－1浓度的甲醇提取物对淋巴细胞的抑制率为84%;作者又对甲醇提取物在正己烷、苯、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、乙醇及水等溶剂中进行二次提取，并证实所有上述提取物在50 μg·mL－1浓度时均能抑制淋巴细胞增殖。

2.4 抗血管生成作用 PERIYANAYAGAM 等［31］采用鸡胚绒毛尿囊膜试验测定小驳骨叶的抗血管生成作用。结果表明，其水提物和无水乙醇提取物在10 μg·mL－1浓度以下时均无抗血管生成作用，50 μg·mL－1乙醇提取物及 100 μg·mL－1水提物均显示新生血管形成抑制作用，且呈剂量依赖关系。

2.5 抗人获得性免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)作用 WORADULAYAPINIJ等［32］分别对小驳骨水提取物及80%乙醇提取物进行抗艾滋病毒研究，发现在200 μg·mL－1浓度时其水提取物显示90.75%HIV-1逆转录抑制能力，而其醇提物显示16.82%的HIV-1逆转录抑制能力。

3 结束语

小驳骨虽在我国民间应用已有几千年的历史，但在安全性、有效性、稳定性及药理活性等方面还缺乏系统的研究，成为其进一步开发利用的瓶颈。现代中药的研究是建立在对其化学物质认识的基础上明确其有效成分，尽可能阐明其作用机制和代谢过程。小驳骨的现代应用主要用于治疗发热、半身不遂、风湿病、关节炎、头痛、耳痛、肌肉痛、呼吸病及消化系统疾病等。目前文献报道的小驳骨化学成分主要有生物碱、黄酮、苷类、萜类及挥发油等，但对这些成分所发挥的药效学机制还尚未展开深入研究;关于其药理作用的研究主要集中在抗炎镇痛方面，而保肝抗氧化、免疫抑制、抗血管生成及抗艾滋病毒等作用甚至其他新的药理活性的研究还有待完善和发现。从小驳骨的研究现状来看，有望将其开发成具有良好抗风湿、抗炎镇痛作用的中药制剂，以发挥传统中药疗效好、毒副作用小的优势。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［M］.北京:中国医药科技出版社，2010:44.

［2］江秀娟，林惠蓉，陈新.中药材小驳骨的质量标准研究［J］.临床医学工程，2009，16(10):26－28.

［3］LU S M，ZHANG G L.Alkaloids from Gendarussa vrlgaris Nees［J］.Natural Product Res，2008，22(18):1610－1613.

［4］陈青，苏玲，朱华，等.驳骨丹的生药学研究［J］.时珍国医国药，2010，21(4):896－898.

［5］苏玲，蔡毅，朱华，等.小驳骨挥发油化学成分GC-MS分析［J］.广西中医学院学报，2009，12(2):56－58.

［6］KIRTIKAR K R，BASU B D.Indian medicinal plants［M］.Dehra Dun:International Book Distributors，2005.

［7］IELPO M T L，BASILE A，MIRANDA R，et al.Immuno pharmacological properties of flavonoids［J］.Fitoterapia ，2000，71(Suppl 1):101－109.

［8］PAVAL J，KAITHERI S K，POTU B K，et al.Comparing the anti-arthritic activities of the plants Justicia gendarussa Burm F.and Withania somnifera Linn［J］.Int J Green Pharm，2009，3(4):281－284.

［9］SAWATZKY D，WILLOUGHBY D，COLVILLE-NASH P，et al.The involvement of the apoptosis-modulating proteins Erk 1/2，Bcl-xL，and Bax in the resolution of acute inflammation in vivo［J］.Am J Pathol，2006，168(1):33－41.

［10］SRIDHAR C，KRISHNARAJU A V，SUBBARAJU G V.Antiinflammatory constituents of teramnus labialis［J］.Ind J Pharm Sci，2006，68(1):111－114.

［11］郗砚彬.湖北栝楼种子、驳骨丹和鱼腥草化学成分研究［D］.北京:中国中医科学院，2004:6.

［12］刘起华，朱礼，李文兰.刺五加主要活性成分化学与药理研究［J］.时珍国医国药，1999，10(4):305－306.

［13］杨吉成，刘静山.多糖类及刺五加苷类的干扰素促诱生效应［J］.中草药，1990，21(1):27－29.

［14］刘文粢，黄爱东，顾熊飞.小驳骨丹无机元素的含量测定［J］.广东微量元素科学，2002，9(8):57－58.

［15］江苏新医学院.中药大词典［M］.上海:上海人民出版社，1999:2359.

［16］刘文江，段青宏.中药百两金的药理作用研究［J］.中草药，1986，17(9):21－24.

［17］LI R W，LEACH D N，MYERS S P，et al.A new antiinflammatory glucoside from Ficus racemosa L［J］.Planta Med，2004，70(5):421－426.

［18］阿斯亚，拜山佰，刘发.岩白菜素的免疫增强作用［J］.新疆医学学报，1998，21(3):189－193.

［19］WAHI S P，WAHI A K，KAPOOR R.Chemical study of the leaf of Justicia gendarussa Burm［J］.J Res Indian Med，1974，9:65－66.

［20］CHAKRAVARTHY A K，DASTIDAR P G，PAKRASH S C.Simple aromatic amines from Justicia gendarussa-13C NMR spectra of the bases and their analogues［J］.Tetrahedron，1982，38(12):1797－1802.

［21］MRUNTHUNJAYA K HUKKERI V I.Antioxidant and free radical scavenging potential of J.gendarussa Burm，leaves in vitro［J］.Natural Prod Sci，2007，3(3):199－206.

［22］APERS S，VLIETINCK A，PIETERS L.Lignans and neolignans as lead compounds［J］.Phytochem，2003，2(3):201－217.

［23］APERS S，PAPER D，BURGERMEISTER J，et al.Antiangiogenic activity of synthetic djhydrobenzofuran lignans［J］.J Nat Prod，2002，65(5):718－720.

［24］PAVAL J，KAITHERI S K，POTUB K，et al.Anti-arthriticpotential of the plant Justicia gendarussa Burm F［J］.Clinics，2009，64(4):357－360.

［25］JOTHIMANIVANNAN C，KUMAR R S，SUBRAMANIAN N.Anti-Inflammatory and analgesic activities of ethanol estract of aerial parts of Justicia gendarussa Burm［J］.Int J Pharmacol，2010，6(3):278－283.

［26］KAVITHA S K，VIJI V，KRIPA K，et al.Protective effect of Justicia gendarussa Burm.f.on carrageenan-induced inflammation［J］.J Nat Med，2011，65(3－4):471－479.

［27］KAVITHA S K，VIJI V，SHOBHA B，et al.Anti-inflammatory potential of an ethyl acetate fraction isolated from Justicia gendarussa roots through inhibition of iNOS and COX-2 expression via NF-κB pathway［J］.Cell Immunol ，2012，272(2):283－289.

［28］VARMA R S，ASHOK G，VIDYASHANKAR S，et al.Ethanol extract of Justicia gendarussa inhibits lipopolysaccharide stimulated nitric oxide and matrix metalloproteinase-9 expression in murine macrophage ［J］.Pharmaceutical Biol，2011，49(6):648－652.

［29］KRISHNA K L，MRUTHUNJAYA K，JAGRUTI A.Antioxidant and hepatoprotective potential of stem methanolic extract of Justicia gendarussa burm［J］.Int J Pharmacol，2010，6(2):72－80.

［30］AROKIYARAJ S，PERINBAM K，AGASTIAN P，et al.Immunosuppressive effect of medicinal plants of Kolli hills on mitogen-stimulated proliferation of the human peripheral blood mononuclear cells in vitro［J］.Ind J Pharmacol，2007，39(4):180－183.

［31］PERIYANAYAGAM K，UMAMAHESWARI B，SUSEELA L，et al.Evaluation of antiangiogenic effect of the leaves of Justicia gendarussa(Burm.f)(Acanthaceae)by chrio allontoic membrane method American［J］.J Infect Dis，2009，5(3):180－182.

［32］WORADULAYAPINIJ W，SOONTHORNCHAREONNON N，WIWAT C.In vitro HIV type 1 reverse transcriptase inhibitory activities of Thai medicinal plants and Canna indica L.rhizomes［J］.J Ethno Pharmacology，2005，101(1－3):84－89.