大罗伞鲜品根、茎、叶挥发油成分的GC-MS分析

秦庆芳，许蓉蓉，李勇文，杨新平，李 丽，杨成芳，谷立勍（.柳州食品药品检验所，广西 柳州 545006；.桂林医学院药学院，广西桂林 54004；.广西壮族自治区食品药品检验所，南宁 500）

大罗伞即茜草科植物九节Psychotria rubra（Lour.）Poir.[1]，以根、叶入药，别名九节木、山大刀等，在我国广西境内有较广泛的分布，为壮族民间用药，具有清热解毒、消肿拔毒的功效，临床可用于治疗白喉、扁桃体炎、咽喉炎、痢疾、肠伤寒、胃痛和风湿骨痛；其叶可外用于治疗跌打肿痛、外伤出血、毒蛇咬伤、疮疡肿毒、下肢溃疡。目前，关于大罗伞根、茎、叶挥发油成分的研究尚未见报道。为此，笔者尝试采用气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术对其挥发油进行分析，以期为大罗伞药材的进一步开发利用提供科学依据。

1 材料

1.1 仪器

7890A-5975C 型GC-MS 仪（美国安捷伦公司）；全玻璃挥发油测定器（天津玻璃仪器厂）；AE240型电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；粉碎机（浙江省温岭市大鹏机械有限公司）；DHG-9123A 型电热鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。

1.2 药材

大罗伞于2013年10月采摘自广西桂平太平山动植物保护区，经桂林食品药品检验所饶伟文主任中药师鉴定为茜草科植物九节P.rubra（Lour.）Poir.。

1.3 试剂

正构烷烃C8～C40（质量浓度：500µg/ml，美国AccuSandard公司）。

2 方法

2.1 挥发油的提取

将采摘12h 内的大罗伞药材根、茎、叶分别粉碎成细粉，各精密称取约100g，置于挥发油测定器中，分别加水500ml，按2010年版《中国药典》（一部）附录“挥发油测定”项下甲法提取挥发油[2]，取挥发油层，用乙醚溶解并定容至1ml，用无水硫酸钠干燥，再经0.45µm微孔滤膜滤过，即得。

2.2 GC条件

色谱柱：HP-5MS毛细管柱（30m×250μm，0.25μm）；流速：1ml/min；进样口温度：250℃；不分流进样；程序升温：起始温度80℃，然后以10℃/min的速率升至190℃，保持5 min，再以5℃/min的速率升至230℃，再以10℃/min的速率升至300℃，保持20min；传输线温度：280℃。

2.3 MS条件

离子源：电轰击电离（EI）源；四极杆温度：150℃；离子源温度：230℃；溶剂延迟2min；增益系数1.00＝1306V；质量扫描范围（m/z）：20～500amu。

3 GC-MS分析[3-10]

取“2.1”项下溶液，按上述GC-MS条件对大罗伞根、茎、叶的挥发油成分进行分析，总离子流图见图1。

图1 总离子流图A.根；B.茎；C.叶Fig 1 TIC of volatile oilA.root；B.stem；C.leave

对图1中的各峰进行峰纯度检查，再将各成分的质谱图与NIST08标准谱库进行比对。以图1C 中的t＝23.874峰为例，其质谱图与标准谱库中的同分异构体Isophytol（3，7，11，15-Tetramethyl-1-hexadecen-3-ol，编号：133809）和1-Hexadecen-3-ol，3，5，11，15-tetramethyl（编号：133817）的相似度均极高，见图2。

经分析，大罗伞的根、茎、叶挥发油分别分析出23、38、27个成分，扣除2个塑化剂峰及相对含量过低、碎片不完整的峰，根、茎、叶确定出7、12、5个成分，分别占各自挥发油总量的91.7%、83.6%、85.4%，均检出肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸等成分。使用面积归一化法对各成分含量进行计算，结果表明棕榈酸为主要检出成分，分别占根、茎、叶中各自挥发油总量的66.0%、60.4%、71.8%。大罗伞根、茎、叶的挥发油化学成分分析结果分别见表1、表2、表3。

图2 t＝23.874 min峰与标准谱库编号133809、133817的MS图A.t＝23.874min峰；B.标准谱库编号 133809；C.标准谱库编号133817Fig 2 MS of peak（t＝23.874 min）from TIC of volatile oil in leavesA.t＝23.874min peak；B.No. 133809；C.No.133817

表1 大罗伞根的挥发油化学成分分析Tab 1 Chemical constituents and relative content of volatile oil in roots of P.rubra

表2 大罗伞茎的挥发油化学成分分析Tab 2 Chemical constituents and relative content of volatile oil in stems of P.rubra

4 讨论

KI 是气相色谱定性指标的一种参数。试验中计算KI 所用保留时间均为扣除背景后的保留时间，考虑到峰面积较大的成分存在保留时间漂移，例如根的挥发油中棕榈酸峰保留时间为24.393min，而使用分流比20∶1进样后的保留时间为24.078min，故本试验使用分流比计算KI。

表3 大罗伞叶的挥发油化学成分分析Tab 3 Chemical constituents and relative content of volatile oil in leavesof P.rubra

由于贮存时间对植物挥发油的含量有显著影响[11]，故本试验选用采摘12h内的大罗伞作为样品。

综上所述，本试验采用GC-MS 联用技术分析大罗伞根、茎、叶的挥发油，方法精密度、稳定性和重复性均良好，可作为大罗伞质量分析和鉴别的科学依据。

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