消氮颗粒对腺嘌呤所致慢性肾衰模型大鼠的保护作用

贾永慧，王艳侠，于燕莉，张淑瑜，毕云生（.济南军区总医院药剂科，济南 5003；.济南军区总医院肾内科，济南 5003）

慢性肾衰（CRF）是导致患者肾功能损害所出现的一系列症状和代谢紊乱组成的临床综合征，其病变呈进行性发展，最终进入终末期肾病[1]。由于血液透析和肾移植技术的进步，CRF 的临床疗效已有明显提高，但仍存在患者难耐受、费用高、肾源不足等问题。中医中药在缓解症状、延缓病情进展、保护残余肾功能等方面有十分明显的作用[2]。中医理论认为，肾主水，可调节机体水液代谢[3]，CRF 的主要病理基础是湿浊淤邪、内阻肾络[4]，因此防治CRF应以泄浊、活血化瘀为主[5]。

消氮颗粒是由大黄、番泻叶、丹参、制附子、车前子、制黄精等药材组成的复方制剂。方中诸药各秉所长，具有泄浊，活血化瘀之功，且攻补兼施，有驱邪扶正之效。可改善肾脏供血、调节脏腑机能、延缓CRF 发展或逆转病情[6]。消氮颗粒在我院临床应用二十余年，作用效果十分明显。本研究通过腺嘌呤复制大鼠CRF 模型，观察消氮颗粒对CRF 模型大鼠血清常规、电解质、尿液和肾脏病理学的影响，探讨其作用机制，为临床应用提供理论依据。

1 材料

1.1 仪器

B600A 型医用低速离心机（河北省安新县白洋离心机厂）；DXC800型全自动生化分析仪（美国Beckman Coulter 公司）；BX53型显微镜（日本Olympus公司）。

1.2 药品与试剂

腺嘌呤（上海笛柏化学品技术有限公司，批号：AA13，规格：100g/瓶，腺嘌呤含量≥98.0%）；消氮颗粒（济南军区总医院制剂室，批号：20110612，规格：6g/袋）；尿毒清颗粒（内蒙古康臣药业有限责任公司，批号：20111018，规格：5g/袋）。

1.3 动物

SPF级Wistar大鼠60只，♂，体质量（200±20）g，购自山东大学实验动物中心[实验动物使用许可证号：SCXK（鲁）20090001]。饲养条件：济南军区总医院实验动物中心清洁级动物房内，全价营养颗粒饲料（购自山东大学实验动物中心）饲养，自由饮水。

2 方法

2.1 复制模型与分组、给药[7-12]

ig 腺嘌呤（200mg/kg），每天1次，连续30d，以复制大鼠CRF 模型。60只Wistar 大鼠随机均分为6组，即正常对照（等容纯化水）组、模型（等容纯化水）组、尿毒清颗粒（2.088g/kg）组与消氮颗粒高、中、低剂量（3.956、1.977、0.989g/kg）组。模型复制成功后ig给药，每天1次，连续30d。

2.2 指标的测定

2.2.1 一般情况观察 观察大鼠体质量、大小便、体毛、精神状态、活动状况、摄食量、饮水量。

2.2.2 生化指标的测定 末次给药后，禁食不禁水24h，大鼠眼眶后静脉丛采血，检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、电解质[钾（K+）、钠（Na+）、钙（Ca2+）、磷（P3+）]水平。末次给药后，禁食不禁水24h，收集大鼠尿液，检测尿蛋白（PRO）、中性粒细胞（LEU）、尿比重（SG）水平。半定量计分方法评定PRO、LEU水平：阴性，0分；±，1分；+，2分；++，3分。

2.2.3 肾脏病理学观察 大鼠肾脏用10%中性甲醛固定液固定，常规脱水包埋，切片，常规脱蜡至水，HE染色，显微镜下观察大鼠肾脏病理学变化。

2.3 统计学方法

3 结果

3.1 消氮颗粒对模型大鼠一般情况的影响

正常对照组大鼠体毛润泽、光亮，行动灵敏。模型组大鼠复制模型5～7d后逐渐出现多饮、多尿、少食、体质量下降、精神萎靡、眯眼、弓背、蜷缩、活动减少、体毛干枯、竖毛等现象。与模型组比较，消氮颗粒高、中、低剂量组大鼠体质量无明显变化，体毛较润泽，活动增加，眯眼、弓背、蜷缩现象减少。

3.2 消氮颗粒对模型大鼠血清生化指标水平的影响

与正常对照组比较，模型组大鼠血清Scr、BUN、UA、P3+浓度增加，差异有统计学意义（P＜0.01）。与模型组比较，消氮颗粒高、中、低剂量组大鼠血清Scr、BUN、UA、P3+浓度减少，差异有统计学意义（P＜0.01）。结果表明，消氮颗粒可明显降低模型大鼠血清Scr、BUN、UA、P3+水平。消氮颗粒对模型大鼠血清生化指标水平的影响见表1。

3.3 消氮颗粒对模型大鼠尿液生化指标水平的影响

与正常对照组比较，模型组大鼠尿液PRO、LEU 水平升高，SG降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。与模型组比较，消氮颗粒高、中、低剂量组大鼠尿液PRO、LEU 水平降低，SG 升高，差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。结果表明，消氮颗粒可改善模型大鼠尿常规指标，减轻肾损伤。消氮颗粒对模型大鼠尿液生化指标水平的影响见表2。

表1 消氮颗粒对模型大鼠血清生化指标水平的影响（，n＝10）Tab 1 Effects of Xiaodan granules on serum biochemical indexs of model rat（，n＝10）

表1 消氮颗粒对模型大鼠血清生化指标水平的影响（，n＝10）Tab 1 Effects of Xiaodan granules on serum biochemical indexs of model rat（，n＝10）

与正常对照组比较：＊P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.01vs.normal control group：＊P＜0.01；vs.model group：#P＜0.01

3.4 大鼠肾脏病理学观察结果

正常对照组大鼠肾脏颜色暗红，组织学未见明显改变，HE染色观察肾小管、肾小球、系膜区宽度、系膜基质、间质均未见病变。模型组大鼠肾脏呈灰白色，HE 染色与正常对照组比较，系膜区明显增宽，系膜基质明显增多，小管间质可见大量炎细胞浸润，血管壁增厚，已造成CRF。各给药组大鼠肾脏表面均出现不同程度的红、白相兼的颗粒状纹理。与模型组比较，消氮颗粒高剂量组大鼠肾脏间质有所改善，炎细胞减少；消氮颗粒中剂量组大鼠肾脏间质明显改善，有少量炎细胞浸润，血管壁改善明显；消氮颗粒低剂量组大鼠肾脏间质有所改善，炎细胞减少，血管壁变薄。大鼠肾脏病理学切片见图1。

表2 消氮颗粒对模型大鼠尿液生化指标水平的影响（，n＝10）Tab 2 Effects of Xiaodan granules on urine biochemical indexs of rat（，n＝10）

表2 消氮颗粒对模型大鼠尿液生化指标水平的影响（，n＝10）Tab 2 Effects of Xiaodan granules on urine biochemical indexs of rat（，n＝10）

与正常对照组比较：＊P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.05，##P＜0.01vs.normal control group：＊P＜0.01；vs.model group：#P＜0.05，##P＜0.01

图1 大鼠肾脏病理学切片（HE，100×）A.正常对照组；B.模型组；C.尿毒清颗粒组；D.消氮颗粒高剂量组；E.消氮颗粒中剂量组；F.消氮颗粒低剂量组Fig 1 Renal pathological section microscope of rats（HE，100×）A.normal control group；B.model group；C.Niaoduqing pellet group；D.Xiaodan pellet high-dose group；E.Xiaodan pellet medium-dose group；F.Xiaodan pellet low-dose group

4 讨论

大鼠ig腺嘌呤30d后，血清Scr、BUN、水平UA、P3+明显升高，与正常对照组比较，差异具有统计学意义（P＜0.01），表明复制模型成功，其复制模型方法简便可控。ig给药后，消氮颗粒能明显降低模型大鼠血清Scr、BUN、UA、P3+水平，改善尿常规指标，减缓肾组织损伤。其结果与方中各药功效一致，方中大黄可通腑泻浊、荡涤肠胃、炙热积滞，促使糟粕毒素外排，番泻叶泻下通便、利水消胀，车前子功于降泻、清热利湿、清肺祛痰、利尿通淋，此三味药均可促进机体对代谢物的排泄，改善血常规、尿常规的各项指标；附子用以峻补元阳、散寒除湿、温壮肾阳，可改善肾功能；另外丹参有活血祛瘀、凉血消痈[13]之功效。大量现代药理学研究表明，丹参能有效地改善肾功能，减少细胞的凋亡，保护组织、改善循环和抗氧化，而且改善移植肾功能疗效明显[14]；制黄精补气养阴、健脾、润肺、益肾[15]，可减轻肾组织损伤。

本研究发现，消氮颗粒中剂量组的治疗效果优于高、低剂量组，这与方中主药大黄有关。现代研究表明，大黄能够明显增强胃肠蠕动功能[16]、加速内容物排泄、减少滞留时间，从而影响药物代谢吸收，降低治疗效果。另外，大黄药性苦寒泻，高剂量服用大黄易引起腹痛、腹泻等症状。在临床应用过程中应根据患者胃肠道情况，合理调整用药剂量。

笔者应用生化指标结合病理形态学的研究，探讨了消氮颗粒对腺嘌呤所致CRF 模型大鼠肾组织的保护作用，结果证明，消氮颗粒疗效确切，可为临床应用提供理论依据。

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