HPLC法测定依诺沙星胶囊的溶出度

2014-03-07 10:26孔令洋孙巧巧
药学研究 2014年2期
关键词:溶出度测定方法沙星

蔡 群,孔令洋,孙巧巧

(1.济宁市第一人民医院,山东济宁272100;2.济宁市药品检验所,山东济宁272100)

HPLC法测定依诺沙星胶囊的溶出度

蔡 群1,孔令洋2,孙巧巧2

(1.济宁市第一人民医院,山东济宁272100;2.济宁市药品检验所,山东济宁272100)

目的建立依诺沙星胶囊的溶出度测定方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.025 mol·L-1磷酸溶液(用三乙胺调节pH至3.0)-甲醇-乙腈(80∶10∶10)为流动相,检测波长为269 nm;分别采用HPLC法和药典规定的紫外对照品对照法测定依诺沙星胶囊的溶出度。结果依诺沙星在5~200μg·mL-1范围内线性良好(r=0.999 9,n=6),回收率为100.6%,RSD=0.6%。结论本方法准确、灵敏、重现性好、可行。

溶出度;依诺沙星胶囊;紫外分光光度法;高效液相色谱法

依诺沙星是第三代的氟喹诺酮类抗生素,具有广谱、强效杀菌作用,与其他抗菌药物间并无明显交叉耐药,对多重耐药的肠杆菌科仍高度敏感。原标准收载的溶出度测定方法为紫外法测定,其缺点是专一性不强,灵敏度和准确度不高。测定的结果明显偏高,很可能是辅料及胶囊壳引起的干扰,而用高效液相色谱法可以很好的避免这种现象。

1 仪器和试剂

Agilent 1200 series高效液相色谱仪,TU-1800SPC紫外分光光度计,D-800LS溶出度仪,电子分析天平(BT25S d=0.01 mg北京赛多利斯仪器系统有限公司),500型超声清洗机(山东济宁亨达超声设备有限公司);甲醇(色谱纯),纯化水,乙腈(色谱纯),85%磷酸溶液,依诺沙星对照品(91.1%,中国药品生物制品检定所),3批依诺沙星胶囊(0.1 g,兖州生宝制药有限公司)。

2 方法

2.1 色谱条件 照依诺沙星含量测定项下色谱方法[1]:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.025 mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH至3.0)-甲醇-乙腈(80∶10∶10)为流动相,流速:1 mL·min-1,柱温:30℃,检测波长为269 nm。

2.2 溶出方法 照溶出度测定法[1](篮法),以稀盐酸溶液(稀盐酸24 mL加水至1 000 mL)900 mL为溶出介质,转速为100 rmp,温度设定37℃,依法操作,经30 min取样。

2.3 线性关系考察 精密称取依诺沙星对照品0.021 67 g置100 mL容量瓶中,加流动相溶解至刻度,摇匀,作为储备液。分别取2.5、5、10、25、50 mL置100mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成溶液。于上述6份溶液中分别取20μL进样测定。以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,进行线性回归,得回归方程A=150.724 1C-147.668,r=0.999 9(n=6)。结果表明,依诺沙星在5~200μg·mL-1浓度范围内,其浓度与吸收度呈现良好的线性关系。

2.4 辅料干扰试验 取约相当于一粒胶囊的辅料成分,置100 mL容量瓶中,加适量溶出介质,超声使其溶解,再加至刻度,摇匀,滤过(0.45μm微孔滤膜),取续滤液5 mL至50 mL容量瓶中,加溶出介质稀释至刻度,高效液相下进样。在15 min内无明显色谱峰。

2.5 精密度试验 取“2.3”项下储备液,精密量取5 mL,置50 mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成溶液,作为对照品溶液。重复进样5次,RSD=0.12%。

2.6 稳定性试验 取“2.3”项下的50μg·mL-1对照品溶液,分别在1、2、4、6、8 h进行测定,RSD=0.5%,结果表明,依诺沙星溶液在8 h内稳定。

2.7 重复性试验 取同一批样品6份,加溶出介质溶解并稀释至50μg·ml-1的供试品溶液,分别进样测定,记录色谱图计算含量,结果RSD=0.4%,表明该方法重复性良好。

2.8 回收率试验 按依诺沙星胶囊的80%、100%、120%分别精密称取依诺沙星对照品适量,与相应辅料混合均匀。照溶出度测定法(篮法)进行测定,30min后取样,滤过,取续滤液;另精密称取依诺沙星对照品适量,制成约50μg·mL-1的对照品溶液。外标法测定,计算回收率(见表1)。实验结果表明,本方法的回收率较好,平均回收率为100.6%(RSD=0.6%,n=9)。

表1 回收率试验测定结果

2.9 供试品溶出度测定 紫外分光光度法:取过滤后的溶出液适量,用溶出介质定量稀释成每1 mL中约含依诺沙星4μg的溶液,在268 nm的波长处测定吸光度;另取依诺沙星对照品适量,加溶出介质定量稀释成每1 mL中约含依诺沙星4μg的溶液,同法测定,计算每粒胶囊的溶出量。

高效液相色谱法:取过滤后的溶出液适量,用流动相稀释成50μg·mL-1溶液,照含量测定法进行测定(见表2、图1)。

图1 供试品溶液色谱图

表2 供试品测定结果

3 结果和讨论

3.1 结果 溶出度测定方法比较(见表3)。

表3 溶出度测定方法比较

3.2 讨论 原标准收载的溶出度测定方法简便易行,但其缺点是专一性不强,灵敏度和准确度不高[2]。如上表3所示,紫外法测定的结果明显偏高,很可能是辅料及胶囊壳引起的干扰,而用高效液相色谱法可以很好的避免这种现象。胶囊壳质量的不同,紫外吸收强度也各不相同,故UV法测定时常常有干扰。一般采用取6粒空白胶囊壳测定,以排除干扰(《中国药典》2010年版)。但笔者认为,严格按照样品测定的步骤,取6粒空白胶囊壳进行试验,工作量大,且由于干扰不一,会给测定结果带来误差。故仍建议采用HPLC法,而无需再进行胶囊壳的空白试验。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010版(二部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010.

[2]孔令洋,孙巧巧,薛雯.HPLC法测定头孢羟氨苄胶囊的溶出度[J].药学研究,2013,32(9):515-516.

Determ ination of the dissolution of Enoxacin Capsules by HPLC

CAIQun1,KONG Ling-yang2,SUN Qiao-qiao2
(1.Jining First People′s Hospital,Jining 272100,China;2.Jining Institute for Drug Control,Jining 272100,China)

ObjectiveTo establish the assay method of dissolution test on Enoxacin Capsules.M ethodsA Phenomenex C18Column was used with themobile phase of0.025mol·L-1phosphoric acid(pH was adjusted to 3 with triethylamine)-methanol-acetonitrile(80∶10∶10).The determination wavelength was 269 nm.The method of HPLC and the method of UV was compared.ResultsThe Enoxacin Capsules was linear within the concentration range of 5~200μg· mL-1(r=0.999 9,n=6).The average recovery was100.6%and RSD was0.6%.ConclusionThe result shows that the method was accurat,reliable,recurrentwell,and can be used for the quality control.

Dissolution;Enoxacin Capsules;UV;HPLC

R927.11

A

2095-5375(2014)02-0096-003

蔡群,女,研究方向:医学检验,E-mail:konglingyang123@eyou.com

猜你喜欢
溶出度测定方法沙星
漂白粉有效氯测定方法
粗苯中氯含量的测定方法研究
盐酸安妥沙星片中右旋安妥沙星的测定*
改进的高氯废水CODCr的测定方法
生物质炭及草炭吸附模拟废水中恩诺沙星特性的研究
水飞蓟素固体分散体的制备及5种成分的溶出度
栀子金花丸中3种成分溶出度的比较
罗布麻叶分散片的制备及溶出度测定
响应面法优化TiO2光催化降解马波沙星的研究
新人参二醇滴丸制备及体外溶出度研究