几种生物农药对三七黑斑病防效及与三七质量关系研究

王 勇，陈昱君，杨建忠，刘云芝，张文斌， 向飞军

（1.文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.云南省三七农业工程实验室， 云南 文山 663000；3.文山苗乡三七实业有限公司， 云南 文山 663000；4.文山华信三七股份有限公司，云南 文山 663000；5. 康美药业股份有限公司，广东 普宁 515300）

几种生物农药对三七黑斑病防效及与三七质量关系研究

王 勇1，2，3，陈昱君1，4，杨建忠1，2，3，刘云芝1，4，张文斌1，2， 向飞军5

（1.文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.云南省三七农业工程实验室， 云南 文山 663000；3.文山苗乡三七实业有限公司， 云南 文山 663000；4.文山华信三七股份有限公司，云南 文山 663000；5. 康美药业股份有限公司，广东 普宁 515300）

采用田间接种病原后药剂喷施的方法，开展了7种生物源农药的田间防效试验，并采用传统紫外分光光度法对参试处理样品的三七总皂苷含量进行了测定。结果显示：以3%多抗霉素可湿性粉剂和8%宁南霉素水剂的田间防治效果较好，相对防治效果分别达到74.18%和60.6%。各处理间三七样品的总皂苷含量与对照比较，除阿利宁和抗霉菌素处理略比对照低外，其余参试药剂处理均略比对照高。结合田间防治效果比较和三七皂苷含量比较结果，认为3%多抗霉素可湿性粉剂和8%宁南霉素水剂可应用于三七种植安全生产。

生物农药；控制；三七黑斑病；试验研究

利用生物农药防治植物病害已有广泛的应用基础，如王辉［1］报道用2%春雷霉80 mL/667 m2防治水稻叶瘟防效达70.6%、穗颈瘟防效75.2%；魏靖等［2］应用1.5%多抗霉素水剂防治黑痘病、穗轴褐枯病、灰霉病，均取得较好的控制效果，且对作物安全，但利用生物农药防治三七病害少有报道［3］。三七黑斑病是三七种植区的一种主要病害，常年发病率5%～20%，严重时高达60%以上［4-5］，生产上通常采用化学药剂进行防治［6-7］。化学农药的经常使用易导致病原产生抗药性［8］，同时也对环境造成污染，影响产品质量［9］。试验通过生物农药对三七黑斑病的防治研究，筛选出安全有效的生物农药供生产应用，以减少化学药剂的使用。

1 材料和方法

1.1 田间药剂筛选试验

1.1.1 供试药剂

选择在蔬菜、粮食作物上已得到推广使用的生物杀菌剂，即：A. 3%多抗霉素可湿性粉剂（延边春雷生物药业有限公司）500倍液；B. 8%宁南霉素水剂（黑龙江强尔生化开发有限公司）800倍液；C. 4%春雷霉素可湿性粉剂（延边春雷生物药业有限公司）1000倍液；D. 4%农抗120水剂（绿盾生物制品有限责任公司）1200倍液；E. 阿利宁可湿性粉剂（黑龙江强尔生化开发有限公司）500倍液；F. 60000单位抗霉菌素水剂（陕西绿盾生物制品有限责任公司）2000倍液；G. 0.3%灰霜特水剂（河北保定亚达化工有限公司）1200倍液；设喷清水为对照。药剂浓度均为厂商推荐使用量。

1.1.2 试验地点

试验点设于砚山县郊址村民委本院实验场七园内，海拔1530 m，土壤为红壤土，荫棚材料为传统杉树叶，荫棚透光率为17.5%。试验用三七为生长均匀一致、无感病症状的三年生三七。试验采取随机区组设计，每处理重复4次，共计28个小区，小区面积3.24 m2。

1.1.3 试验方法

1.1.3.1 菌液制备

采集田间自然发病的三七黑斑病病叶，放入研钵捣细后用无菌水稀释，经单层沙布过滤，即得人参链格孢（Alternaria panax Whetz.） 分生孢子悬浮液，经镜检，孢子悬浮液浓度为4.16×104个/mL。

1.1.3.2 接种及防治

试验采用田间喷雾接种法。即用当天配制的人参链格孢分生孢子悬浮液对植株叶面进行均匀喷雾接种，每小区接种孢子悬浮液250 mL。接种后48 h进行第一次喷药防治，以后每隔7 d喷施一次，共喷施3次。

1.1.4 田间调查及记录

施药前调查一次三七黑斑病病情，施药后于15 d、30 d和45 d分别调查各处理的发病株数及病级，计算病情指数、相对防治效果。三七黑斑病病害分级见表1。

表1 三七黑斑病病情分级表

1.2 三七总皂苷检测

1.2.1 预处理

将经过生物农药防治黑斑病后的三七块根用清水洗净，自然晾干后用小型中药材粉碎机打成粉状备用。

1.2.2 三七总皂苷的提取

称取2.0 g的上述各处理三七粉，置于磨口锥形瓶中，准确加入50 mL甲醇后超声震荡30 min，冷却静置12 h。用小烧杯取上清液10 mL于60 ℃水浴中挥干，再用10 mL蒸馏水溶解已提取的粗总皂苷进行柱层析。以D101大孔吸附树脂柱进行层析分离，用上述处理好的溶解液上柱，再用三分之二的蒸馏水冲洗除去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液再用20 mL 70%的乙醇洗脱总皂苷，用小烧杯收集洗脱液于60 ℃水浴上挥干，即为总皂苷待测物。

1.2.3 测定方法

称取标准品人参二醇Rg1（中国药品生物制品检定所提供）3.1 mg，用甲醇定容10 mL，取该液10、20、40、60、80、100、120 μL置于20 mL的比色管中60 ℃干燥箱中烘干溶剂，取出加新配置的5%香草醛冰乙酸0.2 mL，高氯酸0.8 mL，置于60℃水浴上加热15 min显色后，立即取出用流水冷却，加5 mL冰乙酸，摇匀。于紫外光光度计560 nm处测定吸光度，以吸光度对标准人参二醇的加入量作回归处理，测得方程为：y=0.61104x+0.09336，r值为0.99856。用10 mL的甲醇溶解总皂苷，取该液30 μL同标准曲线的制备方法进行检测。

2 试验结果

2.1 几种生物农药田间试验情况比较

2.1.1 存苗数差异性比较

由表2可看出，各参试处理小区平均存苗率均高于对照，说明生物农药在一定程度上可增强植株抗逆性和抗病性，提高三七存活力。其中3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液处理的存苗数达114棵，居第一位，与对照相比，达极显著水平。说明3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液处理保苗效果优于其它处理。

表2 几种生物农药存苗数比较

2.1.2 几种生物农药防效比较

由表3看出，3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液防治效果居第一位，为74.18%；其次是8%宁南霉素水剂800倍液处理，防效为60.60%。阿利宁500倍液防效为58.01%，居第三位。其余处理对三七黑斑病均有一定的防治效果，但防效不高。

表3 几种生物农药田间防治效果

2.1.3 几种生物农药产量比较

如表4所示，参试各处理小区产量均高于对照，其中3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液、8%宁南霉素水剂800倍液、4%春雷霉素可湿性粉剂1000倍液与0.3%霜特水剂1200倍液及对照相比，达极显著水平。小区产量以3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液处理最高，平均单产达339.52 kg；其次是8%宁南霉素水剂800倍液处理，平均单产为329.23 kg；4%春雷霉素可湿性粉剂1000倍液处理位居第三，平均单产为325.12 kg。其余处理产量也比不施药对照高40 kg以上，显示了一定的控病保产效果。

表4 几种生物农药小区产量比较

2.2 几种生物农药处理三七总皂苷含量

由表5看出几种生物农药处理后，三七总皂苷含量以8%宁南霉素800倍液处理的三七最高，平均达7.16%，其次是3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液处理，平均7.10%；4%春雷霉素可湿性粉剂1000倍液处理居第三位，为7.08%；其余处理与对照相同或略低于对照。研究结果表明宁南霉素、多抗霉素对提高三七质量具有比较明显的促进作用。

表5 几种生物农药施用后三七总皂苷含量比较

3 结果讨论

（1）生物农药具有选择性强、对人畜安全、不污染自然生态环境等优点，在三七病虫害防治上有必要作为一个重要的应用途径进行探索和研究。

（2）通过对现有商品化生物农药的田间试验研究表明，多数生物农药可增强植株抗逆性，提高三七存活力；使用后对三七质量无不良影响，其中宁南霉素、多抗霉素对提高三七质量还具有一定的促进作用。3.3%多抗霉素可湿性粉剂500倍液处理后的三七具有较好的保苗、增产效果，建议生产上推广应用，以减少化学药剂的使用。

［1］王辉.水稻稻瘟病化学防治药剂对比试验［J］.中国农村小康科技，2008 （11）：49-50.

［2］魏靖，张建华，惠祥海.多抗霉素防治葡萄常见病害药效试验［J］.现代农业科技，2010 （2）：183-184.

［3］陈昱君，王勇，刘芸芝，朱有勇，刘云龙.生物菌剂控制三七根腐病的初步研究［J］.中国中药杂志，2004（11）：1102-1103.

［4］陈昱君，王勇.三七病虫害防治［M］.昆明：云南科技出版社，2006：40-48.

［5］王淑琴，于洪军，官廷荆.中国三七［M］.昆明：云南民族出版社，1993：428-472.

［6］王淑琴，于洪军，陈先华.三七黑斑病的综合防治研究［J］.植物病理学报，1981 （22）：47-54.

［7］冯光泉，李忠义，王勇.腐霉利、菌绝王对三七黑斑病的防治效果［J］.人参研究，2000 （1）：46-48.

［8］袁明山.浅谈马玲薯晚疫病化学药剂防治的抗药性［J］.马玲薯杂志，1999 （4）：249-250.

［9］刘勤生.化学农药的使用对农产品质量和环境污染的影响及防范对策［J］.现代农业科技，2008（12）：153.

Control Effects of Several Biological Pesticides on Black Spot Disease and Its Relationship with Quality of Notoginseng

WANG Yong1,2,3, CHEN Yu-jun1,2,4, YANG Jian-zhong1,2,3, LIU Yun-zhi1,2,4, ZHANG Wen-bin1,2, XIANG Fei-jun5
(1. Research Institute of Notoginseng, Wenshan University, Wenshan 663000, China; 2. Notoginseng Agricultural Engineering Laboratory, Wenshan, 663000, China; 3. Notoginseng Industrial Co., Ltd of Miaoxiang, Wenshan 663000, China; 4. Huaxin Notoginseng Co., Ltd, Wenshan 663000, China; 5. Kangmei Pharmaceutical Co., Ltd. Puning 515300, China)

PNS content of tested samples is determined through seven kinds of biological pesticides field efficacy trials adopting spraying agent after a field inoculation of pathogen and traditional ultraviolet spectrophotometry. The results show that field control effect with 3% polymyxin WP and 8% aqueous Ningnanmycin is better and their relative control effect reached 74.18% and 60.6%. Compared with the control sample, PNS content under anti-fungal and Alining treatment is slightly lower than that of the control treatment and PNS content of other participants is slightly higher than the control. 3% polymyxin and 8% WP Ningnanmycin agent can be used in notoginseng planting safely in production referring to comparison result of field control effect and PNS content.

Biological pesticides; control; Sanqi ( notoginseng); black spot disease; research

S567.236

A

1674-9200（2014）03-0001-04

（责任编辑 张 铁）

2014-06-09

国家科技支撑计划项目“三七黑斑病防治技术研究”（2006BAI09B04-03）。

王 勇（1974-），男，云南砚山人，文山学院文山三七研究院副研究员，硕士，主要从事中药材栽培和病虫害研究。

陈昱君（1960-），女，河南济源人，文山学院文山三七研究院研究员，主要从事植物保护研究，E-mail：yncyj@vip.sina.com。