高尔基体蛋白联合甲胎蛋白检测在原发性肝癌早期诊断中的价值

徐向勇等

[摘要] 目的 探讨血清高尔基体蛋白73（GP73）、甲胎蛋白（AFP）联合检测对原发性肝癌（PHC）早期诊断中的作用。 方法 选取2007年7月～2012年7月武汉钢铁（集团）第二职工医院PHC患者76例（PHC组）、肝硬化患者53例（肝硬化组）和正常人群50例（对照组），采用酶偶联吸附法和化学发光免疫分析法进行血清GP73、AFP检测，分析两者单独及联合检测在早期诊断PHC中的价值。 结果 ①PHC组患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP[（871.2±497.6）μg/L]明显高于肝硬化组[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和对照组[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差异均有统计学意义（P < 0.05）。②PHC组患者血清GP73和AFP阳性检出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分别高于肝硬化组[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和对照组[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差异均有统计学意义（P < 0.05）。③联合检测对PHC诊断灵敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP单项检测[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差异有统计学意义（P < 0.05）；而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 PHC患者血清中GP73和AFP水平较高，两者联合检测可以显著提高对PHC早期诊断的能力。

[关键词] 高尔基体蛋白；甲胎蛋白；原发性肝癌；诊断

[中图分类号] R735.7 [文献标识码] B [文章编号] 1673-7210（2014）01（a）-0083-03

原发性肝癌（PHC）是全球第六位常见的恶性肿瘤，是第三位常见的肿瘤相关死亡原因[1-2]。甲胎蛋白（AFP）是目前最重要的也是临床使用最频繁的肝癌标记物[3-4]，但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特别是老年人血清AFP正常[5]，故需要结合临床及其他检测指标做出正确诊断。高尔基体跨膜糖蛋白73（GP73）系列相关研究，证实GP73是肝癌早期诊断和术后复发病情评估的理想血清标记物，敏感性、特异性高于AFP[6]。本研究通过测量患者血清GP73和AFP水平，探讨联合检测在PHC早期诊断中的意义，为临床预防和治疗提供科学依据，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2007年7月～2012年7月来武汉钢铁（集团）第二职工医院（以下简称“我院”）心内科住院治疗76例PHC患者作为PHC组，男47例，女29例，平均年龄（47.4±11.5）岁；经影像及肝组织病理检测确诊为PHC，且住院前未接受相关治疗。肝硬化组选择同期住院的53例肝硬化患者，男33例，女20例，平均年龄（45.7±9.6）岁；患者经临床、CT联合检查确诊为肝硬化，排除肝占位相关疾病。对照组为来我院体检中心体检的50名健康人群，男29名，女21名，平均年龄（43.1±10.7）岁。三组年龄、性别构成比一般资料比较，差异均无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。研究对象均自愿签署知情同意书。

1.2 检测方法

三组研究对象均于清晨空腹肘静脉取血5 mL，双盲编号，离心后收集血清，置于-40℃冰箱保存备用。GP73采用酶偶联吸附法（ELISA）检测，试剂盒购至康乃格公司，全自动酶标仪（美国热电公司）测定A值。AFP采用全自动化学发光分析系统检测，仪器和试剂均购至罗氏公司。所有操作严格按照试剂和仪器说明书进行。

1.3 判断指标

GP73的参考值为0～85.5 μg/L，当≥85.5 μg/L时为阳性；AFP参考值为0～200 μg/L，当≥200 μg/L时为诊断PHC临界值[7]。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 19.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两独立样本的计量资料采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清GP73和AFP水平检测结果对比

PHC组患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP[（871.2±497.6）μg/L]明显高于肝硬化组[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和对照组[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 三组血清GP73和AFP阳性检测率比较

PHC组患者血清GP73和AFP阳性检出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分别高于肝硬化组[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和对照组[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.3 GP73和AFP单项检测及联合检测对PHC诊断价值比较

联合检测对PHC诊断灵敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP单项检测[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差异有统计学意义（P < 0.05）；而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义（P > 0.05）。见表3。

3 讨论

PHC是全球第六位常见的恶性肿瘤，也是第三位常见的肿瘤相关死亡原因。PHC通常为生长缓慢、潜伏期长，肝癌的预后非常不好，主要原因在于当发现肝癌时，大多数已经处于中末期[8-9]，而处于初始阶段尤其是肝功能良好、癌细胞没有转移时预后较好。日本有报道这种患者的5年生存率在89%～93%（外科切除）和71%（经皮治疗）[10]。所以在早期阶段发现PHC对患者的预后至关重要，临床急切需要敏感的PHC标记物，用来诊断早期阶段PHC和观察对治疗的反映以及监测切除术后的复发情况。血清AFP是目前最重要的也是临床使用最频繁的PHC标记物[11-12]，AFP常用于PHC临床辅助诊断及高危人群的筛查。持续1个月以上AFP>500 μg/L，并能排除妊娠、活动性肝炎、睾丸癌或卵巢畸胎瘤等，基本可确诊为PHC。AFP也用于PHC的治疗效果及预后评估，PHC彻底切除后，血清中的AFP浓度将迅速下降，1周内可降至正常水平[13]。若增高则可能复发，其增高比肝功能异常出现得更早。但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特别是老年人血清AFP正常故需要结合临床及其他检测指标做出正确诊断[14]，且它的敏感性一直不高，文献报道，诊断肝癌的敏感性为40%～69%。其次，在其他一些疾病中也有AFP高于临界值的报道[15-16]。

近年来的研究发现，GP73是一种新型的标志物。Shi等[17]研究发现GP73对肝癌具有较高的诊断效率，其ROC曲线的AUC达到了0.94，高于AFP（AUC=0.79）（P < 0.01），若将GP73的诊断界值设置为8.5 RU，其诊断敏感性为74.6%，特异性为97.4%；而AFP在35 ng/mL的界值处，诊断敏感性仅为58.2%，特异性为85.3%。最重要的是，在AFP为阴性（<35 ng/mL）的326例肝癌患者中，有218例GP73呈阳性；在GP73为阴性（<8.5 RU）的200例肝癌患者中，AFP阳性的患者高达92例[18]。这提示，二者在肝癌的诊断上可能存在互补作用。本研究采用GP73联合AFP检测结果发现PHC组患者血清GP73、AFP、明显高于肝硬化组和对照组（P < 0.05），该组患者血清GP73和AFP阳性检出率分别高于肝硬化组和对照组（P < 0.05），说明PHC患者具有较高的血清GP73、AFP水平和检测阳性率，提示两者存在作为PHC标记物的可能。对GP73和AFP单项检测及联合检测结果对比后发现，联合检测的灵敏度为96.1%，远高于单项检测的两组，而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义，由此说明两者联合检测具有较高的互补性，避免早期PHC诊断过程中出现漏诊，为临床治疗提供更为可靠的参考。

综上所述，GP73与AFP联合检测可以为PHC早期诊断提供更有效的方法。但是本研究样本数量有限，还需要进一步扩大样本量进行深入研究。

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（收稿日期：2013-10-16 本文编辑：李继翔）