Beckman-Coulter LH750在体液常规中的应用评估

郭学霖 张瑞敏 杨勇

Beckman-Coulter LH750在体液常规中的应用评估

郭学霖 张瑞敏 杨勇

目的评价Beckman-Coulter LH750在体液常规计数中的应用。方法用LH750的体液模式测定脑脊液和胸腹水中的有核细胞和红细胞, 通过批内精密度、携带污染率、线性等指标进行评价, 从随机选择的130例标本中选择符合要求的标本对有核细胞和红细胞进行仪器和显微镜手工法计数比对。结果LH750在检测脑脊液和胸腹水中的有何细胞核红细胞具有良好的重复性和线性, 携带污染率低, 与手工法计数结果比对相关性良好。结论Beckman-Coulter LH750体液模式对于体液常规细胞计数, 特别是细胞数量较多时,与显微镜计数有较好的符合性, 精密度高, 携带污染率低, 使用方便快速, 在体液细胞计数中确实存在一定的优越性。

体液模式；脑脊液；胸腹水；血细胞分析仪

目前, 脑脊液和胸腹水常规检查计数多采用显微镜手工计数法, 操作过程繁琐耗时, 特别是细胞数量较多时结果准确性、重复性受到个人因素影响较大,而结果的准确性对于临床的诊断鉴别诊断起到重要作用。Beckman-Coulter LH750提供了专门的体液模式用于体液细胞的计数, 本文就LH750体液模式对体液常规计数能力进行评价。

1 材料与方法

1. 1标本来源 随机选取武汉协和医院住院患者130例体液标本(EDTA-K2抗凝), 脑脊液50例, 胸水36例, 腹水44例。

1. 2仪器和试剂

1. 2. 1仪器 Coulter LH750；奥林巴斯光学显微镜；改良牛鲍血细胞计数板。

1. 2. 2试剂 LH750原装配套试剂及质控；等渗生理盐水。

1. 3方法

1. 3. 1计数 在2 h内进行仪器计数及显微镜计数。仪器每日完成质控, 保证仪器状态良好, 选择体液模式, 手工颠倒10次混匀标本, 手工进样(大约200 μl)进行计数。显微镜手工计数由两名有经验的检验师按盲法, 严格按照《全国临床检验操作规程 》(第3版)操作［1］, 计数结果取均值 。浑浊或者带血标本用等渗盐水稀释后进行计数。

1. 3. 2计数结果评价 批内精密度测定：选取高、中、低三个WBC水平标本, 对每一份标本计数11次来评定精确性, 每一个标本的第一个分析都会被丢弃。

携带污染率：进行三个连续的高体液计数(H1-H3), 随后立即进行三个连续的低体液计数(L1-L3)的来评定由高至低的携带污染。携带污染被评定为

［(L1-L3)/(H3-L3)］×100%

线性：选取高值标本(有核细胞3500/ul, 红细胞13000/ul)稀释比率为1:2～1:32, 以稀释计算值为理论值与仪器结果做回归分析, 求线性方程。

2 结果

批内精密度：见表1。

携带污染率：见表2。

线性：有核细胞及红细胞在仪器WBC与RBC线性范围内稀释结果与理论值呈线性关系, 见表3。

比对：120例标本中, 去除有干扰信息的标本, 62例WBC>0.20×103细胞/μl, 33例RBC>10×103细胞/μl, 用于两种方法的相关性比较, 结果见表4, 表5。

表1 有核细胞、红细胞批内精密度结果

表2 携带污染率

表3 稀释线性结果

表4 LH 750有核细胞计数与手工法相关性比较

表5 LH750红细胞计数与手工法相关性比较

3 讨论

现在脑脊液和胸腹水常规细胞计数均采用显微镜手工的方法进行计数, 存在操作耗时, 报告结果速度较慢, 细胞数较多时, 劳动强度较大, 不同的检验人员之间结果重复性差等问题。因此, 近些年, 大家都在探讨以尿沉渣分析仪及血细胞计数仪代替手工计数的可行性［2,3］。

Beckman-Coulter LH750对细胞的计数采用经典的库尔特技术, 加上计算机软件的技术更新, 结合了的智能微数技术(AccuCount), 及智能动力系统等先进的技术, 专门增设了对体液测定的体液模式, 无需专门的试剂可得到有核细胞和红细胞两个参数。本文结果该仪器有核细胞和红细胞检测重复性好。携带污染率低, 有核细胞和红细胞携带污染率分别为1.5%和0.4%,在仪器允许的2.0%和0.8的范围内。有核细胞和红细胞浓度在0～100×103个/μl 和0～8×106个/μl有良好的相关性, 此范围较大, 完全能满足临床的需求。与手工计数相比较, 有核细胞和红细胞计数在脑脊液与胸腹水都有较好的相关性。

综上, Beckman-Coulter LH75体液模式在脑脊液与胸腹水常规计数中精密度, 携带污染率, 线性良好,与手工计数法有较好的相关性。在细胞数量较少时,变异系数稍大, 仪器要求有核细胞>0.20×103细胞/μl, RBC>10×103细胞/μl, 故细胞较少时建议手工进行计数。细胞数较大时, 结果可靠, 能够代替手工计数。此外, 对仪器计数有细胞干扰的不能用仪器测定, 主要的细胞干扰产生有：标本中的小凝块, 细胞碎片；所以标本必须经抗凝处理, 而且需要及时测定, 最好在2 h内完成检验［4］。因此, Beckman-Coulter LH750体液模式对于体液常规细胞计数, 特别是细胞数量较多时, 与显微镜计数有较好的复合型, 并且能够有效的提高结果的重复性, 大大缩短检验时间, 而且该仪器较低的试剂成本, 表明其在体液细胞计数中确实存在一定的优越性。

［1］ 叶应妩, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程. 第3版. 南京：东南大学出版社, 2006: 312-317.

［2］ 陆凤燕, 朱雪明, 潘扬, 等. iQ200全自动尿沉渣分析仪在体液检测中的应用评价. 医疗卫生装备, 2011(4): 42-44.

［3］ 何银华, 颜宇飞, 蔡峥, 等. Sysmex XE-2100全自动血液分析仪计数胸腹水有核细胞的评价. 检验医学, 2011(4):228-230.

［4］ Barnes pw, Eby CS, Shimer G. An evaluation of the utility of performing body fluid counts on the coulter LH 750 Lab hematol, 2004,10(3):127-131.

R446.11

B

1674-9316(2014)01-0015-03

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.01.010

675000 楚雄医药高等专科学校检验系(郭学霖)；武汉, 华中科技大学附属协和医院检验科(张瑞敏 杨勇)