肺炎支原体感染咽拭子快速培养的临床研究

陈惠琴++++++丁后昌++++++肖志刚++++++廖思森++++++孙丛萌

[摘要] 目的 探讨肺炎支原体咽拭子快速培养在儿童支原体感染诊断中的临床应用价值。 方法 对2010年6月～2012年9月呼吸道感染住院患儿进行肺炎支原体咽拭子快速培养，研究结束后作统计学分析（阳性率）。结果 检测患儿1500例，阳性数为537例，阳性率为35.8%。其中，≤1岁、2～3岁、4～6岁及7～12岁年龄组患儿的肺炎支原体阳性检出率分别为27.2%、42.7%、44.7%和26.7%；阳性率与性别无关。 结论 肺炎支原体咽拭子快速培养对儿童肺炎支原体感染的早期诊断具有重要的临床价值，最适于基层医院推广应用。

[关键词] 肺炎支原体；咽拭子；培养

[中图分类号] R563.13 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）01-0145-03

支原体肺炎又称原发性非典型肺炎，是学龄儿童及青年常见的一种肺炎，婴幼儿也不少见，主要靠呼吸道飞沫传播，全年均有发病，好发于冬春季，以3～6岁小儿多见[1]。近年来，小儿支原体肺炎发病率逐年增加，越来越受到重视。据统计，支原体肺炎占小儿肺炎的比率也在不断上升。文献报道，肺炎支原体感染占儿童社区获得性肺炎（CAP）病原的10%～30%，国外文献报道为50%，故支原体肺炎（MPP）越来越受到人们的重视。早期快速简易的诊断并及时治疗有利于缩短患儿病程、减少并发症，为此，我们对呼吸道感染及疑似肺炎支原体感染住院患儿进行肺炎支原体咽拭子快速培养，结果阳性作为诊断依据，及时使用大环内酯类抗生素治疗，取得较好的疗效。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2010年6月～2012年9月呼吸道感染及疑似肺炎支原体感染的住院患儿1500例，男816例，女684例，≤1岁346例，2～3岁393例，4～6岁398例，7～12岁363例。

1.2 方法

采用肺炎支原体咽拭子快速培养法：清晨患儿未洗漱、进食前用经无菌生理盐水湿润的咽拭子取咽部分泌物，半小时内接种到预温37℃的培养基中培养。此法是利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长。培养基液体颜色由紫红色变为草绿色或嫩绿色且清亮，或在静置时，瓶底有蓝色颗粒或物质沉淀为阳性，24 h后培养基颜色不变或无蓝色颗粒或物质沉淀为阴性。根据检测阳性结果及时使用大环内酯类抗生素治疗。阳性患儿出院后予阿奇霉素、克拉霉素序贯口服半个月，1个月后复查咽拭子。

1.3 统计学分析

应用SPSS 17.0软件进行统计学处理，分别计算出各年龄组肺炎支原体培养阳性率，并进行配对计数资料的χ2检验；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

1500例中537例肺炎支原体培养结果呈阳性，阳性率 35.8%，其中男296例，36.3%，女241例，35.2%，经分析男女发病率无统计学意义（χ2=0.18，P>0.05）。≤1岁94例，27.2%；2～3岁168例，42.7%；4～6岁178例，44.7%； 7～12岁97例，26.7%。其中2～6岁阳性率43.7%，占64.4%。537例肺炎支原体阳性患儿均予阿奇霉素静滴3～5 d，出院后予阿奇霉素、克拉霉素序贯口服半个月，出院1个月后复查咽拭子，496例转阴（92.4%），41例未转阴者继续予阿奇霉素、克拉霉素序贯口服，半个月后再次复查，均转阴。

表1 各年龄组肺炎支原体培养阳性率比较

注：≤1岁组与2～3岁组阳性率比较具有统计学意义（χ2=19.52，P <0.01）；2～3岁组与4～6岁组阳性率比较无统计学意义（χ2=0.314，P>0.05），≤1岁与2～6岁组阳性率比较具有统计学意义（χ2= 27.87，P <0.01）， 7～12岁与2～6岁组阳性率比较具有统计学意义（χ2=30.48，P <0.01）

结果显示，2～3岁组与4～6岁组发病率无明显差异；≤1岁组、7～12岁组无明显差异；2～6岁组与≤1岁组、7～12岁组均有显著性差异。

3 讨论

支原体肺炎是肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）引起的急性呼吸道和肺部急性炎症病变，又称原发性非典型肺炎。肺炎支原体是小儿呼吸道感染的重要病原之一，全年均有发病，以冬春季较多，是学龄儿童及青年常见的一种肺炎，婴幼儿也不少见。主要表现为头痛、咽痛、发热、咳嗽等一般的呼吸道症状，阵发性干咳、反复或长期咳嗽是其特征性表现。但肺炎支原体易感人群为婴幼儿，其机体免疫机制尚未完善，机体免疫能力低下，易长期反复感染，病程长，诊断若不及时，易诱发多种并发症。近年来，小儿支原体肺炎发病率在逐年增加。支原体肺炎在非流行年间约占小儿肺炎病原的10%～20%，流行年份则高达30%以上[2]。近10多年的临床研究表明，肺炎支原体感染也是呼吸道以外多个器官疾病的重要原因，可引起多系统、多器官损害，所以早期快速地检查出病原体非常必要。早期快速简易的诊断、及时用大环内酯类抗生素有利于缩短患儿病程、减少并发症的发生。有资料显示，食物残渣呈酸性，有可能出现假阳性，所以我们采用清晨洗漱、进餐前采样，避免漏诊、误诊。本课题主要研究呼吸道感染及疑似肺炎支原体感染的住院患儿肺炎支原体咽拭子快速培养法的临床应用价值。在本组研究资料中，肺炎支原体阳性率达35.8%，其中2～6岁阳性率43.7%，占总阳性数的64.4%，诊断符合率高，显示学龄前儿童发病率较高，可能与学龄前儿童生理器官不成熟、免疫系统分化较低、机体屏障功能差、体质弱、常到游乐场所有关。男36.3%，女35.2%，经统计学分析，男女发病率无统计学意义；本组肺炎支原体阳性病例肺外器官受累153例（28.5%），其中39例以肺外表现为首发症状起病，就诊时主要表现为无明显诱因出现发热、腹泻、心动过速、疲乏、精神差，血生化提示心肌酶谱、肝酶、胆汁酸、CRP异常升高等，无呼吸系统症状及肺部体征，经检查排除其他系统疾病，给予大环内酯类抗生素后症状明显改善。因此，对临床上不能按常见病原解释、常规治疗症状改善不理想的患儿，应高度怀疑肺炎支原体感染，尤其以肺外表现为首发症状的患儿，应尽早做咽拭子痰液支原体快速培养，以免误诊，漏诊。endprint

目前，检测肺炎支原体感染的方法主要有PCR检测肺炎支原体DNA、血清IgM抗体检测、咽拭子支原体快速培养等。PCR检测肺炎支原体DNA诊断快速、敏感、特异性高，可作早期诊断手段，但此法实验条件要求较高，仅在科研单位及部分三级医院开展，而广大基层医院未能开展。血清IgM抗体检测阳性率最高，该法是检测血清中的抗体，而非直接检测病原体；但机体感染后1周左右才产生IgM抗体，发病初期不能被检测出，对早期病例不利，可能造成漏诊，不能及时治疗； 约2～4周达高峰，一般12～16周转阴[3]，因而阳性结果并不能确诊是支原体感染。而肺炎支原体咽拭子快速培养法主要是检测病原，不受病程影响，感染初期就可检测出肺炎支原体，可早期快速诊断急性呼吸道支原体感染[4]。此法是用肺炎支原体专用液体培养基进行支原体快速培养，利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长。根据相关资料报道[5，6]，在肺炎支原体检测的各种方法中，咽拭子快速培养法阳性病例病程最短，提示病程较短的患者选择此法检测的阳性率较高，对于支原体感染的临床诊断具有明显的优势，尤其是早期患儿，效果较优[7]。此法操作简单、需时短、阳性率高、特异性强、灵敏度高，临床符合率高，价格便宜，适合一般实验室推广应用，可作为诊断支原体感染的首选试验[8]。本组资料中，阳性患儿（537例）经正规治疗、出院1个月后均回院复查肺炎支原体咽拭子快速培养， 496例转阴（92.4%），41例未转阴者继续予阿奇霉素序贯口服，半个月后再次复查，均转阴。结果表明，肺炎支原体病原体在咽部存留时间（约7～9周）较血清中MP-IgM抗体（12～16周）短。张国英等报道培养法的临床符合率100%，而抗体检测的符合率是90.4%[9]。结合本组资料结果及采集咽拭子标本操作方便、简单，患儿无痛苦，儿童顺应性好，价格便宜，患儿及家属易于接受，检测需时短，对早期诊断更可靠，我们认为咽拭子支原体快速培养最适合于基层医院推广应用[10]。

综上所述，儿童肺炎支原体感染好发于学龄前和学龄儿童，有肺外表现者可累及各个系统，治疗上应选择具有影响肺炎支原体蛋白质合成作用的大环内酯类抗生素，采用阿奇霉素静滴及口服序贯治疗，直至培养转阴。另外，我们建议对所有住院的呼吸道感染的患儿常规进行肺炎支原体咽拭子快速培养法检测，可早期发现肺炎支原体感染不典型病例，尤其是伴肺外表现者及以肺外表现为首发症状者，从而避免漏诊、误诊。

[参考文献]

[1] 邱素清，覃珊珊，向华国，等. 儿童肺炎支原体咽拭子快速液体培养结果分析[J]. 中国微生物学杂志，2012，24（6）：552-553.

[2] 胡亚美，江载芳. 诸福棠实用儿科学[M]. 第7版. 北京：人民卫生出版社，2003：1204-1205.

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[7] 翟韶蕊. 儿童肺炎咽拭子肺炎支原体培养及分析[J]. 中国实用医药，2011，6（35）：59-60.

[8] 谢莲. 肺炎支原体咽拭子的快速培养鉴定法[J]. 医学理论与实践，2012，25（11）：1358-1359.

[9] 张国英，李鑫，徐卫平，等. 肺炎支原体咽拭子培养法的临床应用[J]. 中国误诊学杂志，2009，9（33）：8118-8119.

[10] 张红辉. 肺炎支原体快速鉴定培养基在小儿支原体肺炎早期诊断中的应用[J]. 当代医学，2009，（16）：68.

（收稿日期：2013-08-05）endprint

目前，检测肺炎支原体感染的方法主要有PCR检测肺炎支原体DNA、血清IgM抗体检测、咽拭子支原体快速培养等。PCR检测肺炎支原体DNA诊断快速、敏感、特异性高，可作早期诊断手段，但此法实验条件要求较高，仅在科研单位及部分三级医院开展，而广大基层医院未能开展。血清IgM抗体检测阳性率最高，该法是检测血清中的抗体，而非直接检测病原体；但机体感染后1周左右才产生IgM抗体，发病初期不能被检测出，对早期病例不利，可能造成漏诊，不能及时治疗； 约2～4周达高峰，一般12～16周转阴[3]，因而阳性结果并不能确诊是支原体感染。而肺炎支原体咽拭子快速培养法主要是检测病原，不受病程影响，感染初期就可检测出肺炎支原体，可早期快速诊断急性呼吸道支原体感染[4]。此法是用肺炎支原体专用液体培养基进行支原体快速培养，利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长。根据相关资料报道[5，6]，在肺炎支原体检测的各种方法中，咽拭子快速培养法阳性病例病程最短，提示病程较短的患者选择此法检测的阳性率较高，对于支原体感染的临床诊断具有明显的优势，尤其是早期患儿，效果较优[7]。此法操作简单、需时短、阳性率高、特异性强、灵敏度高，临床符合率高，价格便宜，适合一般实验室推广应用，可作为诊断支原体感染的首选试验[8]。本组资料中，阳性患儿（537例）经正规治疗、出院1个月后均回院复查肺炎支原体咽拭子快速培养， 496例转阴（92.4%），41例未转阴者继续予阿奇霉素序贯口服，半个月后再次复查，均转阴。结果表明，肺炎支原体病原体在咽部存留时间（约7～9周）较血清中MP-IgM抗体（12～16周）短。张国英等报道培养法的临床符合率100%，而抗体检测的符合率是90.4%[9]。结合本组资料结果及采集咽拭子标本操作方便、简单，患儿无痛苦，儿童顺应性好，价格便宜，患儿及家属易于接受，检测需时短，对早期诊断更可靠，我们认为咽拭子支原体快速培养最适合于基层医院推广应用[10]。

综上所述，儿童肺炎支原体感染好发于学龄前和学龄儿童，有肺外表现者可累及各个系统，治疗上应选择具有影响肺炎支原体蛋白质合成作用的大环内酯类抗生素，采用阿奇霉素静滴及口服序贯治疗，直至培养转阴。另外，我们建议对所有住院的呼吸道感染的患儿常规进行肺炎支原体咽拭子快速培养法检测，可早期发现肺炎支原体感染不典型病例，尤其是伴肺外表现者及以肺外表现为首发症状者，从而避免漏诊、误诊。

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[10] 张红辉. 肺炎支原体快速鉴定培养基在小儿支原体肺炎早期诊断中的应用[J]. 当代医学，2009，（16）：68.

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目前，检测肺炎支原体感染的方法主要有PCR检测肺炎支原体DNA、血清IgM抗体检测、咽拭子支原体快速培养等。PCR检测肺炎支原体DNA诊断快速、敏感、特异性高，可作早期诊断手段，但此法实验条件要求较高，仅在科研单位及部分三级医院开展，而广大基层医院未能开展。血清IgM抗体检测阳性率最高，该法是检测血清中的抗体，而非直接检测病原体；但机体感染后1周左右才产生IgM抗体，发病初期不能被检测出，对早期病例不利，可能造成漏诊，不能及时治疗； 约2～4周达高峰，一般12～16周转阴[3]，因而阳性结果并不能确诊是支原体感染。而肺炎支原体咽拭子快速培养法主要是检测病原，不受病程影响，感染初期就可检测出肺炎支原体，可早期快速诊断急性呼吸道支原体感染[4]。此法是用肺炎支原体专用液体培养基进行支原体快速培养，利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长。根据相关资料报道[5，6]，在肺炎支原体检测的各种方法中，咽拭子快速培养法阳性病例病程最短，提示病程较短的患者选择此法检测的阳性率较高，对于支原体感染的临床诊断具有明显的优势，尤其是早期患儿，效果较优[7]。此法操作简单、需时短、阳性率高、特异性强、灵敏度高，临床符合率高，价格便宜，适合一般实验室推广应用，可作为诊断支原体感染的首选试验[8]。本组资料中，阳性患儿（537例）经正规治疗、出院1个月后均回院复查肺炎支原体咽拭子快速培养， 496例转阴（92.4%），41例未转阴者继续予阿奇霉素序贯口服，半个月后再次复查，均转阴。结果表明，肺炎支原体病原体在咽部存留时间（约7～9周）较血清中MP-IgM抗体（12～16周）短。张国英等报道培养法的临床符合率100%，而抗体检测的符合率是90.4%[9]。结合本组资料结果及采集咽拭子标本操作方便、简单，患儿无痛苦，儿童顺应性好，价格便宜，患儿及家属易于接受，检测需时短，对早期诊断更可靠，我们认为咽拭子支原体快速培养最适合于基层医院推广应用[10]。

综上所述，儿童肺炎支原体感染好发于学龄前和学龄儿童，有肺外表现者可累及各个系统，治疗上应选择具有影响肺炎支原体蛋白质合成作用的大环内酯类抗生素，采用阿奇霉素静滴及口服序贯治疗，直至培养转阴。另外，我们建议对所有住院的呼吸道感染的患儿常规进行肺炎支原体咽拭子快速培养法检测，可早期发现肺炎支原体感染不典型病例，尤其是伴肺外表现者及以肺外表现为首发症状者，从而避免漏诊、误诊。

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[9] 张国英，李鑫，徐卫平，等. 肺炎支原体咽拭子培养法的临床应用[J]. 中国误诊学杂志，2009，9（33）：8118-8119.

[10] 张红辉. 肺炎支原体快速鉴定培养基在小儿支原体肺炎早期诊断中的应用[J]. 当代医学，2009，（16）：68.

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