发酵红三叶草对肉仔鸡饲料消化率的影响

孟翠红，张福元

（1.山西运城农业职业技术学院，山西 运城 044000；2.山西农业大学动物科学院，山西 太谷 030800）

发酵红三叶草对肉仔鸡饲料消化率的影响

孟翠红1，张福元2

（1.山西运城农业职业技术学院，山西 运城 044000；2.山西农业大学动物科学院，山西 太谷 030800）

为评价红三叶草固态发酵物（RSF）对肉仔鸡的饲料消化率及血液生化指标的影响，采用单因素完全随机试验，设0.1%、0.2%、0.3%3个添加水平，用红三叶草提取物作对比，选用1日龄健康艾维茵肉仔鸡600只，分成5组，每组3个重复，每个重复40只鸡，试验期为49 d。试验结果表明，RSF 0.1%处理组显著提高了脂肪的消化率（P＜0.05），对氮沉积的作用低于脂肪。RSF 0.1%处理组提高了生长前期（13～15 d）表观代谢能，在生长后期（34～36 d）RSF 0.2%处理提高效果显著（P＜0.05）。RSF有提高血清总蛋白、血糖及降低尿酸浓度的趋势，但差异不显著（P＞0.05），添加RSF对其他各项血液生化指标影响不大。

红三叶固态发酵；肉仔鸡；血液生化指标

红三叶草也称红车轴草，为豆科三叶草属多年生草本植物。大量研究表明，红三叶不仅是优良的豆科牧草，而且因其含有丰富的异黄酮类物质，如红车轴草素、芒柄花素、鹰嘴豆芽素A、大豆素等具有类似大豆异黄酮的药用与保健作用[1-3]。异黄酮具有多种生理活性，主要有植物雌激素功能和抗氧化功能[4-5]。异黄酮类化合物属植物雌激素，相关研究结果表明，异黄酮具有促进动物生长、提高动物泌乳性能及促进乳腺发育、增加产蛋、调节动物繁殖、增强机体免疫力等生理功能[6-8]。杨守凤等发现，这类物质还具有降血脂、对抗性激素依赖性肿瘤生长和抗癌等作用[9-10]。米曲霉固态发酵红三叶草培养物富含异黄酮、各种消化酶、多糖等有益保健成分。陶浩等证实，异黄酮、各种消化酶和多糖等物质单独添加于饲料中都能提高动物生产性能和机体免疫力[11-13]。但未见米曲霉发酵红三叶草培养物对动物生产性能方面的试验报道。本试验进一步了解米曲霉对红三叶草的发酵效果，认识该发酵物对肉仔公鸡生产性能的影响，从营养消化率指标方面探讨发酵物作用效果和机理，为固态发酵红三叶生产富含异黄酮、消化酶的高效廉价的饲料添加剂提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

红三叶草：购自甘肃岷海制药有限公司，粉碎，过40目筛，测得总黄酮含量为2.2%。

红三叶草固态发酵物（RSF）：在最佳发酵条件下利用米曲霉A.niger 3.314 8菌株（产纤维素酶）发酵红三叶草两周后，低温干燥便可制得。测得含纤维素酶为2 000 U·g-1、果胶酶为1 560 U·g-1、糖化酶为396 U·g-1、酸性蛋白酶为196 U·g-1，米曲霉活菌数为5.3×106cfu·g-1，总黄酮为2.3%。

红三叶草提取物：购自兰州天萃生物技术有限公司，主要成分为刺芒柄花素、鹰嘴豆芽素A、染料木素及大豆素，总黄酮含量为98%。

1.2 试验日粮

以玉米-豆粕为主要原料，按两个阶段配制试验日粮，即为生长前期（0～21 d）和后期（22～49 d）。基础日粮组成及营养水平见表1。

1.3 试验设计

本试验是以红三叶固态发酵物RSF的添加水平为影响因素的单因素完全随机试验设计。选择1日龄健康艾维茵肉仔公雏鸡600只，肉仔鸡平均体重为40.39±1.48 g·只-1（P＞0.05），随机分为5个处理，每个处理3个重复，每40只鸡为1个重复。5个试验组日粮分别为基础日粮（对照组），基础日粮添加RSF0.1%，基础日粮添加RSF0.2%，基础日粮添加RSF 0.3%，基础日粮添加红三叶草提取物20mg·kg-1。试验期为49d。

表1 肉仔鸡基础日粮组成及营养水平

1.4 饲养管理

试验鸡采用3层笼养，进鸡前5 d鸡舍用福尔马林熏蒸消毒。第1周室温为33～35℃，第2周为30℃，3周后室温保持在22℃。自由饮水和采食。在试验鸡7日龄，新城疫弱毒苗首免；14日龄，法氏囊疫苗饮水；21日龄，新城疫弱毒苗饮水二免，疫苗用量为2倍的首免。全程为自然环境条件下饲养，室内24 h光照。整个试验全程观察鸡群精神状态和健康状况，记录每日采食量和病死数。

1.5 测定指标及方法

分别在13～15、20～22、34～36日龄，采集粪样要以重复组为单位，各组在以试验期每天17:00收粪1次，连续收集3 d，粪样-20℃保存。将3 d收集的各重复组的粪样等比例混合，分成15份样品。将样品置于瓷盘内，70℃烘箱内烘干48 h，冷却30 min，称重，再继续烘干2 h，直至恒重为止（＜0.01 g）。待粪样烘后，粉碎机粉碎，过40目筛（孔径0.45 mm），充分混匀后放入有磨口的广口瓶中，贴上标签，用于测定表观代谢能、氮沉积、表观脂肪。取样后，再将剩余粪样置于105℃烘箱烘干至恒重（＜0.01 g），用于测定总能。日粮中各种养分消化率和日粮代谢能均采用内源指示剂法（2N-HCl不溶灰分法）测定。养分消化率计算公式见式1。

式中：a-粪中某养分的百分含量；b-饲料指示剂的百分含量；c-饲料中某养分的百分含量；d-粪中指示剂的百分含量。

1.6 统计分析

试验数据采用SPSS10.0软件One Way ANONA进行统计，并进行Duncan's多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

2 结果与分析

2.1 对肉仔鸡各日龄营养物质消化率的影响

RSF对肉仔鸡各生长阶段脂肪消化率的影响见表2，对各日龄表观代谢能的影响见表3，对各日龄阶段氮沉积的影响见表4。

表2 RSF对肉仔鸡各生长阶段脂肪消化率的影响 %

表3 RSF对肉仔鸡各日龄表观代谢能的影响MJ·kg-1

表4 RSF对肉仔鸡各日龄阶段氮沉积的影响

由表2可见，RSF 0.1%处理组和红三叶草提取物提高了肉仔鸡13～15日龄脂肪的消化率，与对照组相比差异显著（P＜0.05），与另外两个水平RSF处理组差异不显著（P＞0.05）。20～22日龄，RSF处理组有提高脂肪消化率的趋势，但与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。红三叶草提取物可显著提高脂肪消化率，与对照组相比差异显著（P＜0.05），但与RSF 3个水平添加组差异不显著（P＞0.05）。RSF 0.1%处理显著提高了肉仔鸡34～36日龄脂肪消化率，与对照组差异显著（P＜0.05），与其他各组差异不显著（P＞0.05）。红三叶草提取物可显著提高34～36日龄肉仔鸡脂肪消化率（P＜0.05）。总的来看，RSF的添加可提高肉仔鸡脂肪的消化率。

由表3可见，RSF 0.1%组能够显著提高肉仔鸡13～15日龄代谢能，与对照组和RSF 0.3%组差异显著（P＜0.05），与RSF 0.2%组和红三叶草提取物组差异显著（P＞0.05）。各RSF组在20～22日龄无显著差异（P＞0.05）。红三叶草提取物与试验理组对照组差异显著（P＜0.05），与RSF组差异不显著（P＞0.05）。RSF 0.2%组显著提高了34～36日龄肉仔鸡表观代谢能（P＜0.05），与对照组及RSF 0.3%组差异显著（P＜0.05），与RSF 0.1%组和红三叶草提取物组差异不显著（P＞0.05）。

由表4可见，各组间13～15日龄肉仔鸡氮沉积无显著差异（P＞0.05）。在20～22日龄阶段，红三叶草提取物组有提高氮沉积的趋势，但与各组间无显著差异（P＞0.05）。RSF 0.3%组提高了34～36日龄肉仔鸡的氮沉积，与红三叶草提取物组无显著差异（P＞0.05），与对照组及另外两个水平RSF组差异显著（P＜0.05）。但总的来看，RSF提高了氮沉积，但差异不显著（P＞0.05）。

2.2 对肉仔鸡各日龄血液生化指标的影响

RSF对22、36和49日龄肉仔鸡血液生化指数的影响见表5、6和7。

由表5、6和7可见，添加RSF对22、36、49日龄肉仔鸡中各组之间的总蛋白、白蛋白、血糖、尿酸、胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、底密度脂蛋白、球蛋白和血蛋白/球蛋白差异不显著（P＞0.05）。

表5 添加RSF对22日龄肉仔鸡血液生化指数的影响

表6 添加RSF对36日龄肉仔鸡血液生化指数的影响

表7 添加RSF对49日龄肉仔鸡血液生化指数的影响

3 讨论

3.1 对肉仔鸡各日龄营养物质消化率的影响

安永义报道，在玉米-豆粕日粮中添加消化酶，并对营养物质的消化率没有产生显著影响（P＞0.05），消化酶的添加可以降低抗营养物质水平和肠道食糜黏性，从而提高营养物质的消化吸收[13]。此外，肠道有害微生物可通过肠道食糜黏度的降低来减少其滋生，而有害菌的存在与宿主在营养吸收上存在竞争，尤其是脂肪的利用[14]。周业飞在基础日粮中分别添加不同水平的那西肽预混剂，进行肉仔鸡饲养试验，研究那西肽对肉仔鸡生长性能及日粮营养消化率的影响，结果表明，那西肽可以显著提高饲料消化率（P＜0.05），对促进肉仔鸡生长具有一定的剂量依赖性。这与安永义和Smits等的研究结果一致。本试验为含米曲霉菌的未发酵红三叶草，主要以纤维素酶为主，可能是因为纤维素酶可降低抗营养因子的作用来提高某些营养的利用率，另外米曲霉菌在肠道中也可发挥作用。

3.2 对肉仔鸡各日龄血液生化指数的影响

血液成分在一定程度上能反映动物体内代谢及健康状况，血液总蛋白在某种程度上反映动物蛋白质营养状况，良好的营养状况可以提高血浆蛋白含量，使血浆蛋白维持在一个相对较高的水平上，血清蛋白是组织合成的原料，特别是清蛋白和α-球蛋白的合成。从表5、6、7可见，RSF 0.2%组提高了肉仔鸡0～21和36～49 d血清总蛋白，与对照组相比提高比例为5.95%和8.44%，对各生长阶段血清总蛋白水平统计分析表明，各组间在血清总蛋白水平上差异均不显著（P＞0.05）。

血清白蛋白和球蛋白的含量高低与动物抗病力有关，本试验虽发现RSF的添加提高了成活率，却在白蛋白和球蛋白指标上没有反应出来，各组间差异不显著（P＞0.05）。从本试验数据上看，在各试验组内血液生化指标个体偏差较大，RSF 0.1%和0.2%组虽有提高血清总蛋白和降低尿酸的趋势，但差异不显著（P＞0.05），可能是个体差异较大所致。另外血液生化指标表明，米曲霉菌对肉仔鸡生理机能没有损伤作用。Steenfeldt等对2 kg的石歧杂鸡用加酶饲料强饲后4 h采血，测定血液中葡萄糖和游离氨基酸的含量，发现加酶组血糖和总的氨基酸水平均高于对照组[16]。本试验RSF 0.1%、0.2%组提高了肉仔鸡35日龄前生长阶段蛋白质沉积，但差异不显著（P＞0.05），这点与上述差异显著的报道不一致。动物机体内脂类代谢情况可通过血清甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的指标得以反映。从全程来看，各组间无显著差异（P＞0.05），这与Um等的研究结果一致[16]。说明RSF对肉仔鸡脂类代谢影响不大，或者在血液指标上无表现出来。

Um等发现添加淀粉酶提高血糖浓度，安永义却未发现加酶使血糖浓度升高[17]。本试验RSF的添加有提高肉仔鸡35日龄血糖浓度的趋势，但各处理组与对照组差异不显著（P＞0.05），有研究表明血糖浓度高是动物能量代旺盛的表现，Verma等发现，添加酶使肉鸭IGF-Ⅱ水平提高近2倍，血糖水平显著降低[18]。而本试验认为血糖升高可能是由于RSF中所含糖化酶和纤维素酶促进了高分子碳水化合物的单糖分解过程。有关酶添加对血液血糖浓度的影响结果不一致，造成不一致的原因可能与采血时鸡生理状况及应激有关。另一方面作者认为酶作用效果在血液生化指标上并不一定能很好的反应出来。

禽类蛋白质分解的产物是尿酸，当禽类不能从食物中获得必需氨基酸时，将引起体蛋白的分解，补饲以获得这种氨基酸，导致尿酸排出量增加。因此，蛋白质的品质可通过尿酸的排出量来评价。血液中尿酸水平的降低说明蛋白质的分解代谢降低，添加粗酶制剂可以增加限制性氨基酸的吸收，从而提高蛋白质的品质，增加蛋白质在体内的沉积。从各生长阶段血清尿酸含量来看，3个水平RSF添加组均有降低0～21日龄肉仔鸡尿酸含量的趋势，RSF 0.2%、0.3%组有降低22～35日龄肉仔鸡血清尿酸浓度的趋势，但各组间差异不显著（P＞0.05），36～49日龄肉仔鸡尿酸浓度无下降趋势，全期各组间在尿酸含量上差异不显著（P＞0.05）。

4 结论

4.1 RSF对各生长期营养消化率的影响

RSF 0.1%组能显著提高脂肪消化率（P＜0.05），脂肪消化率提高是由于RSF 0.1%组降低了肠道内有害菌，使肠道变薄以及维持肠道胆汁酸盐的浓度，从而有利于营养物质的消化吸收。对氮沉积的作用低于脂肪。在生长前期，RSF 0.1%组的表观消化能最佳；在生长后期，RSF 0.2%组的表观消化能最佳。

4.2 RSF对血液生化指标的影响

RSF有提高血清总蛋白，血糖及降低尿酸浓度的趋势，但差异不显著（P＜0.05），添加RSF对其他各项血液生化指标影响不显著（P＞0.05）。

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Effects of Redclover-solidstate-fermentation on Digestibility of Feed in Broilers

MENG Cuihong1,ZHANG Fuyuan2

（1.Agricultural Vocational and Technology College of Yuncheng Shanxi,Yuncheng 044000,Shanxi China;
2.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi China）

To study the effects of redclover-solidstate-fermentation(RSF)on digestibility of feed in broilers,six hundred one-day-old broilers were divided into 5 groups randomly.The control group was fed with basal diet,while the four experiment groups were fed with the basal diet added 0.1%,0.2%,0.3%redclover-solidstate-fermentation products(RSF)and red clover extract.The experiment lasted for 49 days.The results showed that,0.1%RSF improved the digestibility of fat significantly(P＜0.05).But the nitrogen deposition is not as distinct as fat.0.1%RSF improved the apparent metabolizable energy at the early stage of growth(13-15 d),and 0.2%RSF had a signifixant effect at the later stage of growth(34-36 d)(P＜0.05).RSF could improve the total serum protein and blood glucose.It could reduce the concentration of uric acids,but no obvious difference(P＞0.05).Added RSF had little effect on the oblood of other biochemicalindexes.

redclover-solidstate-fermentation;broiler;blood biochemical indexes

S831.5

A

1001-0084（2014）12-0006-06

2014-09-30

孟翠红（1972-），女，山西运城人，硕士，讲师，主要从事动物营养与饲料科学方面的教学与研究。