新疆哈萨克族高血压患者外周血T淋巴细胞亚群表达的变化

袁庆艳，张源明，张邱兵，章桂铭，郁 洁，朱 健

高血压是一种常见的心血管疾病，高血压及其并发症严重威胁着人们健康，但其发病机制仍未完全明确。最新研究表明，高血压是一种慢性低度炎性反应，同时提出T淋巴细胞介导的炎性反应参与了高血压的发生发展[1-2]。近年对于高血压与T淋巴细胞亚群表达变化的报道较少见。本研究通过观察新疆哈萨克族高血压患者外周血T淋巴细胞亚群表达的变化，探讨高血压发病机制与T淋巴细胞亚群的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年9月—2013年1月新疆医科大学第一附属医院高血压门诊收治的未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压患者20例作为高血压组，高血压诊断参考2005年世界卫生组织/国际高血压学会(WHO/ISH)高血压诊断标准：收缩压≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和/或舒张压≥90 mm Hg。排除标准：经实验室和临床检查诊断为继发性高血压、风湿性心脏病、急性脑血管病、急慢性感染、先天性心脏病、糖尿病、全身免疫系统性疾病、重要脏器功能衰竭等疾病之一者。另选取同期在本院体检健康的同民族者20例作为对照组。操作程序均经新疆医科大学第一附属医院伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。

表1 两组基本资料比较

注：*为χ2值

表2 两组T淋巴细胞亚群表达水平比较

1.2 试剂与仪器 PE-抗CD8，FITC-抗CD4，Percp-抗CD8三色标记的单克隆抗体(美国BD公司)，淋巴细胞分离液(美国SIGMA公司)，磷酸盐缓冲液(PBS)(新西兰Hyclone公司)，流式细胞仪(美国BD公司)，离心机(Multifuge X1R型，美国Thermo公司)。

1.3 T淋巴细胞分选 抽取受试者空腹外周静脉血3 ml，使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，标本在采集8 h内测定。根据密度梯度离心法提取淋巴细胞，取淋巴细胞分离液3 ml加入离心管，然后将3 ml抗凝血与PBS缓冲液1∶1混匀后放入另一试管，小心加入呈有淋巴细胞分离液的离心管中，可见清晰的两层液体界面。以1 600 r/min在离心机中离心20 min，离心半径13.5 cm，离心管由上至下分为5层，第一层是淡粉色的血清层；第二层是白色絮状样外周血单核细胞层；第三层是透明的淋巴细胞分离液；第四层是粒细胞，又称为棕黄层；第五层是红细胞、血小板等。取第二层即淋巴细胞层，加入PBS洗涤3次，然后调整细胞密度为1×106/ml，加入20 μl三色标记的单克隆抗体，混匀后于4 ℃静置30 min，PBS洗涤2次，再加入PBS 0.5 ml重悬，利用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群的表达。

2 结果

2.1 两组基本资料比较 两组性别、年龄、吸烟率、饮酒率、BMI、空腹血糖、CRP、TG、LDL-C、HDL-C比较，差异均无统计学意义(P>0.05，见表1)。

3 讨论

近年来，高血压与炎症之间的相关性也越来越受到关注。Chas等[3]提出，炎性细胞激活参与了高血压的发生发展，并且为高血压的治疗提出了新的研究方向。Schmid-Schönbein等[4]研究发现，自发性高血压鼠体内存在着大量的T淋巴细胞浸润。Dzielak[5]提出，当实验鼠体内缺乏T淋巴细胞时，可降低甚至避免高血压的发生。表明T淋巴细胞的激活与高血压的发生有关。

有研究提示，淋巴细胞在高血压和血管重构的病因和发生发展中扮演着重要角色，并指出T淋巴细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)形成过程中起关键作用，而AngⅡ又在高血压的发生发展中起关键作用[6-9]。AngⅡ可促进炎性递质的形成，进而刺激T淋巴细胞。炎症与高血压可通过血管氧化应激、内皮损伤、血管壁重构等机制相互影响和促进[10-11]。Madhur等[12]明确提出，高血压患者白介素17(IL-17)血清水平明显升高，并且其可进一步促进T淋巴细胞的活化增殖，IL-17作为一个危险因素促进了高血压的发生发展。Navarro-Gonzalez等[13]提出，在高血压合并糖尿病患者中，炎性递质白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的血清水平是正常对照组的数倍。炎性递质可促进高血压的发生，甚至加速高血压恶化，引起心脑肾等靶器官的损害[14]。

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