清宫汤抗焦虑作用实验研究

孟登科 周 静 楼建秀 浙江中医药大学附属第一医院 杭州 310000

清宫汤抗焦虑作用实验研究

孟登科 周 静 楼建秀 浙江中医药大学附属第一医院 杭州 310000

目的 研究清宫汤的抗焦虑作用。方法 健康雄性昆明种小鼠50只，随机分为空白对照组、地西泮组、清宫汤高、中、低剂量组，每组10只。空白对照组给予生理盐水，其余各组给药10天，第10天进行国际通用的高架十字迷宫模型（EPM）行为学观察，统计各组进开臂时间和进开臂次数。结果 与空白对照组比较，地西泮组、清宫汤中剂量组小鼠进开臂次数（OE）和进开臂时间（OT）、低头探究次数和臂内双腿自立次数明显增加（P＜0.05），清宫汤低剂量和清宫汤高剂量组增加不明显（P＞0.05）。结论 清宫汤有抗焦虑作用，中剂量组抗焦虑作用最明显。

小鼠；焦虑模型；抗焦虑；清宫汤；EPM；行为学

清宫汤由元参心、莲子心、竹叶卷心、连翘心、犀角（水牛角代）、连心麦冬组成[1]，出自清代吴鞠通《温病条辨》，主治温病误用汗法，汗出过多，耗伤心液，邪陷心包而致的身肤灼热、神昏谵语、舌蹇肢厥等症[2]。临床报道可治疗更年期失眠、狂证、房颤、心动过速等病证[3-4]。焦虑症临床表现常见头晕、胸闷、心悸、呼吸困难、口干、尿频、尿急、出汗、震颤和运动性不安等症，与清宫汤适应证有一定的相似之处。本研究拟对清宫汤进行抗焦虑作用研究，为扩大清宫汤的临床应用范围提供一定的理论依据。

1 实验材料

1．1 动 物 健康雄性昆明种小鼠50只，5～6周龄，清洁级，体质量17～19g，上海医学科学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK（沪）2009-0601。

1．2 药品与试剂 地西泮（规格：2.5mg，批号：0912130），临用碾碎药片，用去离子水配制成溶液；清宫汤常规方法煎煮后制成高、中、低，即12.25g/（9kg·d）、6.50g/（kg·d）、3.75/g（kg·d）剂量，分装灭菌后4℃保存备用。

1．3 器 材 小鼠高架十字迷宫（EPM）（自制）[5]。

2 实验方法

2．1 分组和给药 雄性昆明种小鼠50只，随机分为5组，即空白对照组、地西泮组、清宫汤高、中、低剂量组,每组10只。清宫汤高、中、低剂量组分别按12.25g/（9kg·d）、6.50g/（kg·d）、3.75/g（kg·d）给予灌胃，地西泮组按2.0mg/（kg·d）给以地西泮混悬液灌胃，空白对照组灌服等容积生理盐水，各组连续灌胃10天。实验第10天，清宫汤高、中、低剂量组和空白对照组末次灌胃1h后，地西泮组给药0.5h后，于8: 00～14:00做高架十字迷宫测试。所有动物均于实验前一天进入测试实验室。

2．2．1 测试条件 实验室内光线昏暗（以1.5m距离处能区分小鼠细微活动的最低亮度为准）并保持恒亮，室温20℃左右，保持安静。

2．2 ．2 测试指标 迷宫测试前每只小鼠自由活动，探究5min后迅速置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录下述指标。每只小鼠测试5min。①记录进入开放臂次数（OE），以小鼠4个爪子均进入到臂内为准，中途1个爪子从该臂中完全退出则为该次进入活动完成；②记录进入开放臂时间（OT）；③观察小鼠低头探究次数和臂内双腿直立次数。

观测人员在距离测试箱1.5m处分别观察记录动物的活动。中间用湿布擦拭迷宫，清除粪便，继用干布擦净后再进行下一只小鼠的测试。

2．3 统计学方法 应用SPSS11.0统计软件，数据以（±s）表示，采用单因素方差分析、Student-Newman-Keuls检验。

3 结果

3．1 各组小鼠进开臂次数和时间 与空白对照组比较，地西泮组、清宫汤中剂量组小鼠进入开放臂次数和进入开放臂时间明显增加（P＜0.05）；清宫汤低剂量和清宫汤高剂量组增加不明显，见表1。

表1 各组小鼠进开臂次数和进开臂时间（±s）

表1 各组小鼠进开臂次数和进开臂时间（±s）

注：空白对照组比较，*P＜0.05

组别空白对照组地西泮组清宫汤低剂量组清宫汤中剂量组清宫汤高剂量组n/只10 10 10 10 10进开臂次数/次15.35±5.07 28.40±3.22* 14.74±3.86 27.17±4.59* 16.97±4.02进开臂时间/s 13.45±5.57 19.88±6.07* 12.12±3.33 22.36±6.03* 13.92±4.86

3．2 小鼠低头探究次数和臂内双腿直立次数比较

与空白对照组比较，地西泮组和清宫汤中剂量小鼠在开放臂内双腿直立次数百分率和中央平台区低头探究次数百分率显著增加（P＜0.05）；清宫汤高剂量组和清宫汤低剂量组增加不明显，见表2。

表2 各组小鼠低头探究次数和臂内双腿直立次数（±s）

表2 各组小鼠低头探究次数和臂内双腿直立次数（±s）

注：与空白对照组比较，*P＜0.05

组别空白对照组地西泮组清宫汤低剂量组清宫汤中剂量组清宫汤高剂量组n/只10 10 10 10 10低头探究/次2.25±1.08 14.09±2.12* 3.45±1.07 15.13±2.06* 2.27±1.13臂内双腿直立/次5.71±1.03 11.66±4.43* 6.84±1.56 13.35±3.09* 4.11±1.01

4 讨论

本实验以OE和OT反映动物的焦虑状态，OE和OT是动物趋近-规避冲突的结果，与焦虑程度直接相关。焦虑动物的OE和OT明显降低，经典抗焦虑药物可使两者升高，而此二者的下降则意味着预处理措施加剧了动物的焦虑程度（致焦虑作用）。通常抗焦虑药物只增加动物对开放臂的探索，使OT和OE上升，而致焦虑药物也仅是降低OT和OE，不会使封闭臂的探索减少。动物在开放臂和中央平台区低头探究的次数则反映了在非保护区内的探索行为，代表动物对陌生环境的好奇探究或因恐惧而寻求逃避，与焦虑程度也有一定相关性。本研究显示，空白对照组小鼠较少进入或停留于开放臂中，而倾向探究封闭臂，体现了模型的设计原理；2.0mg/（kg· d）的地西泮可使OE、OT显著增加，低头探究次数明显增多，说明小鼠对开放臂和非保护区的探究增加，反映了地西泮的抗焦虑作用，符合Handley和Mithani的模型设计理念[8]，并与Pellow的结果[9]一致，表明本实验中EPM模型的复制成功。实验还观察到，清宫汤中剂量可显著增加小鼠OE和OT值，明显提高小鼠在开放臂和中央平台区低头探究次数；清宫汤高、低剂量对OE、OT、低头探究的影响均不明显。实验结果显示，清宫汤高、低剂量组没有抗焦虑效果，清宫汤中剂量具有一定的抗焦虑效应，符合经典抗焦虑药物的原理，与地西泮的作用方向一致。

焦虑症又称焦虑性神经症，是以广泛性焦虑症（慢性焦虑症）和发作性惊恐状态（急性焦虑症）为主要临床表现，常伴有头晕、胸闷、心悸、呼吸困难、口干、尿频、尿急、出汗、震颤和运动性不安等症，其焦虑并非由实际威胁所引起，或其紧张惊恐程度与现实情况很不相称，主要表现为睡眠障碍、心事烦多、坐立不安、失眠多梦、食欲不振等焦虑和植物神经功能紊乱症状。

应用抗焦虑药是治疗焦虑症的主要方法。目前临床最常用的抗焦虑药物仍是以地西泮为代表的苯二氮卓类（Benzodiazepines，BDZ），这类药物虽有较好的抗焦虑作用，但也存在着肌肉松弛、记忆力减弱等不良反应。此外，这类药物还可与酒精产生相互作用，引起严重后果，久用可产生药物依赖性[10-13]。因此，寻找疗效确切、副作用小的抗焦虑药仍是目前抗焦虑研究的重要课题。

近年来社会竞争的日趋激烈与生活压力的不断加大，焦虑疾病发病率呈上升趋势，世界卫生组织研究报告显示，中国人疾病负担较高的25种疾病中精神疾病占5项。精神障碍所造成的负担，己经超过心脑血管疾病、糖尿病和恶性肿瘤等疾患，在中国人疾病总负担中排名第一[14]。中医无“焦虑症”之名，从临床表现看，属于情志病、心病范畴，与“郁证”等有关，多因不良环境、精神刺激致忧思气结，气滞血瘀，久之化热生火，扰动心神，此外，肝阳上亢、肝风上扰等也可致病。

清宫汤方中玄参滋水养阴，水牛角清热解毒，共为君药；臣以麦冬养阴清心；佐以连翘清心解毒，竹叶心清心通窍；使以莲心清心去热，能使心火下通于肾，又能使肾水上济于心。诸药合用，能清心营之热而育养心阴[15]。

综上所述，清宫汤中剂量抗焦虑作用效果最佳。但本实验缺乏对清宫汤中剂量附近的剂量研究。根据相关文献和本实验结果，清宫汤具有抗焦虑作用，最佳剂量为6.50g/（kg·d）。

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Effect of Qinggong Decoction on Anxiety

MENG Dengke,ZHOU Jing,LOU Jianxiu.The First Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou(310000),China

ObjectiveTo study the anxiolytic effect of Qinggong decoction.MethodsFifty healthy male Kun ming mice were randomly divided into control group,diazepam（DZP）,and Qinggong decoction groups with high（12.25, 6.50,3.75 g·kg-1·d-1）,medium,and low doses（n＝10）.Control group

normal saline and other groups were administered the corresponding drugs for 10 days.Elevated plus maze（EPM）test was used to observe the anxiety-related behavior of mice.ResultsCompared with control group,total number of entries and duration into the open arms of DZP group and Qinggong decoction with medium dose group were significantly increased（P＜0.05）,while no significant difference in entries and duration was noted in the low-and high-dose Qinggong decoction groups（P＞0.05）.Compared with control group,an increase in the number of head dip of DZP and Qingtang decoction groups was found（P＜0.05）,but the same increase was not seen in the low-and high-dose groups of Qingtang decoction（P＞0.05）.ConclusionQinggong decoction possesses anxiolytic effect and acts effectively at the dose of 6.50 g·kg-1·d-1.

mice；anti-anxiety；Qinggong decoction；EPM；behavior

2013-04-08