丙氨酸氨基转移酶（ALT）连续监测法测定及其临床意义

于 洋

黑龙江省第四医院道外分院，黑龙江 哈尔滨 150050

丙氨酸氨基转移酶（ALT）连续监测法测定及其临床意义

于 洋

黑龙江省第四医院道外分院，黑龙江 哈尔滨 150050

ALT在肝细胞中较多，当肝脏受损时，此酶人血致使含量增加，往往作为诊断肝细胞损伤的重要指标之一，但其它疾病也会引起ALT不同程度的增高。ALT活性增高可见于下列疾病。

丙氨酸氨基转移酶；连续监测法；赖氏法

丙氨酸氨基转移酶（ALT）广泛地分布在人体的各组织器官内，分布次序：肝＞肾＞心＞肌肉。以肝脏含量最多，是血清的2850倍。在肝脏等脏器受损或坏死时，细胞内酶释入血流，使血清内酶的活力增高［1］。胆道梗阻时，由胆道内酶反流，血中丙氨酸氨基转移酶活力也增高。连续监测法就指示酶反应平衡点偏向右侧，利用NADH在340 nm有特异光吸收的特性，可连续测定NADH被氧化速度（即测△A340/△t），来表达谷丙转氨酶活力。

1 资料与方法

1.1 一般资料

Tris贮存液（1.0 mol/L）：并用蒸馏水稀释至1 L。此溶液室温放置至少稳定6个月。Triton X-100。Tris缓冲液：取Tirs贮存液160 ml，加蒸溜水约800 ml，在25℃加大约5 ml浓盐酸调pu至（7.54±0.02），用蒸馏水稀释至1 L。加0.1 ml Triton X-100，在4℃下可长期保存。L-丙氨酸加溶解大约50 ml蒸馏水中，加40 ml Tris贮存液，在25℃用浓盐酸调pH至（7.54±0.02）。最后加蒸馏水至250 ml，加25 μlTriton X-100。此溶液在4℃下可稳定1个月。还原型辅酶INADH、取纯度为80%的NADH干粉2 mg溶于1 ml Tris贮存液中。LDH贮存液。试剂A：取24 ml L-丙氨酸溶液加8 ml NADH溶液及120 μl LDH贮存液。试剂B：取5.26 g α-酮戊二酸和35.64 g L-丙氨酸溶于250 ml蒸馏水中。加50 ml Tris贮存液，此液pH大约7.4，在25℃用0.1 mol/L NaOH调pH至（7.54±0.02）［2］。最后用蒸馏水稀释至500 ml，并加入50 μl Triton X-100。

1.2 方法

用自动吸样器吸取10 μl血清，加入到比色杯中，用90 μl水冲洗吸样器一并加入到杯中，加入50 μl试剂A，在30℃下孵育6 min。在6 min结束时加入50 μl试剂B，混合，待30 s，在340 ml测定NADH的吸光度减少。

1.3 计算

ALT活性，U/L=△A／min×1/6.22×0.20 ml/ 0.01 ml×1000=△A/min×3215，△A是每分钟吸光度的变化。6.22是NADH在340 nm的毫摩尔吸光系数。0.20 ml是总容量。0.01是血清样品量，1000是毫摩尔转化成微摩尔的转换系数。

2 正常参考值

3 U/L～30 U/L。

3 临床意义

由于肝组织中所含的ALT量为心脏、肌肉、肾组织的3倍，所以ALT升高几乎总是由肝病引起的。ALT异常，阳性率为80%～100%，是病毒性肝炎的重要检查指标。患病毒性肝炎病人中，则可升至1000～4000单位。急性乙型肝炎ALT升高显著，若较高水平持续数月，甚至于数年，表明转为慢性。重症肝炎和亚急性肝炎时，一度上升的ALT在症状恶化时有酶活性降低，出现血清胆红素和ALT变化分离的现象，可能是肝坏死的征兆。慢性肝炎、肝硬化时ALT轻度上升或正常，血清AST＞ALT。当慢性肝炎、肝硬化患者ALT正常而甲胎蛋白升高时，要警惕并发原发性肝癌的可能。心功能不全致肝淤血，可有ALT升高。

丙氨酸氨基转移酶（ALT）的高低可反映肝细胞损害的程度，临床上常遇到NAFLD患者无任何自觉症状，而通过查体或检查其他疾病而发现转氨酶增高，通过B超或肝活检而确诊为NAFLD。NAFLD时ALT水平反映脂肪肝的活动性，一般SFL时ALT不高，但少数病例伴有一定程度的炎症时也可轻度升高。NASH时因常伴有肝细胞的炎症坏死，或有肝纤维化发生，因此常出现持续的ALT增高。如果转氨酶持续增高超过8周以上，并伴有γ球蛋白增高，常提示有活动性肝病存在。活动型进行性肝硬化时ALT可轻度或中度升高，但在代偿期中则正常或稍偏高。NAFLD合并黄疸者多为胆汁淤积性黄疸，此时转氨酶也可升高，但一般不超过正常值的8倍，个别病例因严重肝内或肝外胆管阻塞时ALT可达正常的10倍以上，但随黄疸的消退而迅速下降。门冬氨酸氨基转移酶（AST/ALT）比值的变化也可反映病情的变化。

当心功能好转时，ALT则恢复正常；脂肪肝、胆管炎、药物性肝脏损害等ALT将升高。

［1］邱骏，顾国浩.两种方法测定丙氨酸氨基转移酶的偏差评估［J］.苏州大学学报：医学版，2006，26（5）：759-761.

［2］郭群，王以立.双波长在连续监测法测定中的应用［J］.临床检验杂志，1997，15（5）：273-275.

Monitoring with Continuous Monitoring Assay for Alanine Aminotransferase （ALT） and its Clinical Significance

YU Yang Daowai Branch of The Fourth Hospital of Heilongjiang Province，Harbin Heilongjiang 150050，China

Hepatocyte has a larger quantity of ALT which can release blood when liver damaged and increase its content.It is one of the most important indicators for liver damage diagnose.However，other diseases may also increase ALT content to a different level.Following diseases may cause ALT activity increase.

Alanine aminotransferase，Continuous monitoring，Reitman method

R446.11

B

1674-9316（2014）22-0067-02

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.22.043