微柱凝胶免疫分析技术检测血小板抗体的分析

冯 宇

（长春市中医院，吉林 长春 130022）

微柱凝胶免疫分析技术检测血小板抗体的分析

冯 宇

（长春市中医院，吉林 长春 130022）

目的探讨为主凝胶免疫分析技术检测血小板抗体的效果，初步建立并优化这种检测血小板抗体的方法。方法选取2012年5月至2013年6月我院收治的血液病患者75例，作为观察组；另选取2012年5月至2013年6月来我院进行健康体检的健康体检者75名，作为对照组。分别采用微柱凝胶免疫分析技术进行血小板抗体检测。结果在75例血液病患者中，共检出血小板抗体19例；其中输注超过30个治疗量血小板的患者12例，血小板抗体阳性者7例（58.33%）；输注20～29个治疗量的患者21例，血小板抗体阳性者9例（42.86%）；输注10～19个治疗量的患者27例，血小板抗体阳性者10例（37.04%）；输注3～9个治疗量的患者9例，血小板抗体阳性者2例（22.22%）；输注少于3个治疗量血小板的患者6例，均未检出血小板抗体。健康体检者均未检出血小板抗体。结论结果表明血小板抗体的产生与输注血小板的频率和量相关。微柱凝胶免疫分析技术检测血小板抗体准确可靠、简单快速，比传统的定性检测法与定量检测法效果好，具有临床推广价值。

微柱凝胶免疫；分析技术；检测；血小板抗体；分析

为了探明多次输注血小板与血小板抗体阳性率的关系，我院决定引入微柱凝胶免疫分析技术检测血小板抗体，这种方法检测结果准确可靠，简单快速，值得在临床推广。通过分析检测结果，我们得出多次输注血小板后，患者体内的血小板阳性检出率升高的结论[1]。现对微柱凝胶免疫分析技术检测血小板抗体进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年5月至2013年6月我院收治的血液病患者75例，作为观察组；另选取2012年5月至2013年6月来我院进行健康体检的健康体检者75名，作为对照组。分别采用微柱凝胶免疫分析技术进行血小板抗体检测。75例血液病患者中，特发性血小板减少性紫癜患者39例，再生障碍性贫血患者15例，白血病21例；患者与健康体检者的年龄均在17～67岁，平均（34.2±10.3）岁；患者与健康体检者中，男性73例，女性77例；两组患者在年龄、性别方面的差异无显著性，可以进行对比。

1.2 检查方法

①检验所需材料。交联试剂：为O型血供者多人份混合血小板，含抗人IgG抗体，但与指示细胞表面的抗人IgG 抗体为非同源。指示红细胞：表面包被有抗人IgG 抗体。器材：6孔微柱凝胶板。②检测步骤：a.检测原理：指示红细胞表面包被有抗人IgG抗体，该抗体通过其分子上的Fc段与指示红细胞结合。若受检者的血液样品中存在抗血小板抗体，抗血小板抗体将与红细胞表面的抗人IgG 抗体的Fab段结合，形成指示红细胞（抗人IgG抗体）-（血小板抗体）-血小板复合物。在加入交联试剂的条件下，交联剂与复合物形成网状结构，将此加入微柱凝胶上，在一定的离心力作用下和凝胶的分子筛作用下，网状复合物浮在凝胶表层，和游离指示红细胞分离。这就出现了可疑（±）依次至阳性（++++）凝集。若检测标本中无抗血小板抗体，则无法形成该网状结构，指示红细胞经上述处理后仍沉聚在凝胶底部，呈现阴性结果。b.取凝胶管一支，对其进行标本标记。依次向其中加入受试者血清、指示红细胞（0.5%～0.8%）各一滴（大约为50 μL）。置于37 ℃孵箱中孵育10 min。孵育后，滴加1滴O型血供者混合血小板（3人以上）入反应腔，离心3 min，转速1000 r/min。以上各步骤完成后，立即观察结果。

1.3 统计学处理

对结果进行卡方统计，采用SPSS20.0统计软件进行分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

在75例血液病患者中，共检出血小板抗体19例；其中输注超过30个治疗量血小板的患者12例，血小板抗体阳性者7例（58.33%）；输注20～29个治疗量的患者21例，血小板抗体阳性者9例（42.86%）；输注10～19个治疗量的患者27例，血小板抗体阳性者10例（37.04%）；输注3～9个治疗量的患者9例，血小板抗体阳性者2例（22.22%）；输注少于3个治疗量血小板的患者6例，均未检出血小板抗体。健康体检者均未检出血小板抗体。

3 讨 论

对于患有血液疾病的患者，常需要输入血小板进行治疗，对于多次输血的血小板减少患者，发生血小板输血紫癜、血小板输注无效的患者较多，其概率可达30%～70%。这就导致患者在输注治疗量血小板之后，血小板计数不升反降，这样不仅会导致血小板临床输注无效，还可能对患者的生命安全造成威胁[2]。血小板是人体内的重要物质，与凝血等功能密切相关。血小板表面有很多血型抗原，如HLA抗原、血小板特异抗原、ABH抗原物质等，它们可刺激机体免疫系统，产生相应的血小板抗体，常易引起输注血小板的患者产生抗血小板抗体，导致发生不良反应，或输注血小板无效，血小板值变得更低。我院的研究表明，采用微柱凝胶免疫分析技术检测血液中的血小板抗体，操作简便，可快速出结果，结果可靠，是一个实用的有临床推广意义的检测方法[3，4]。这个方法对于需要输注血小板进行治疗的血液病患者有重要意义，因为其检测结果可用于指导医护人员选择合适性的血小板输注，该方法并不需要大型仪器，肉眼观察即可判断结果，一般的检验实验室也可采用。

[1] 李岚,董洪强,张琼丽.微柱凝胶免疫分析技术检测血小板抗体[J].山西医药杂志,2010, 38(7):16-18.

[2] 徐长根,贺春金,张远鹏,等.微柱凝胶法检测血小板抗体[J].临床检验杂志,2010,20(5):272-274.

[3] 程洪波,李国良,熊丽红,等.微柱凝胶技术检测血小板抗体[J].现代诊断与治疗,2010,18(2):72-74.

[4] 许德义,董国飞,张哲,等.微柱凝胶免疫分析技术在血小板抗体筛选中的应用[J].中国实验血液学杂志,2010,15(4):888-890.

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1671-8194（2014）27-0079-01