常见临床标本细菌构成和耐药监测结果的分析

胡佩璐

（苏州大学附属第一医院检验科，江苏 苏州 215000）

常见临床标本细菌构成和耐药监测结果的分析

胡佩璐

（苏州大学附属第一医院检验科，江苏 苏州 215000）

目的探讨我院2012年收集的常见临床标本细菌构成和耐药监测结果。方法回顾性分析2012年分离的非重复的各种细菌1868株的检测结果，统计各类细菌对抗菌药物的耐药率。结果2012年我院共收集1868株非重复菌株，在1868株中大肠埃希菌最多，达到17.2%，铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌次之，鲍曼不动杆菌及粪肠球菌最少，均为4.6%。大肠埃希菌对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林、氨苄西林、头孢哌酮、头孢曲松、氨曲南的耐药率均较高；铜绿假单胞菌对哌拉西林、头孢曲松、头孢哌酮的耐药率均较高；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对左氧氟沙星、庆大霉素、克林霉素、亚胺培南、四环素、红霉素、β2内酰胺类等抗菌药物的耐药率均较高；鲍曼不动杆菌对头孢他啶、头孢曲松、妥布霉素、庆大霉素、头孢替坦、头孢唑林、氨苄西林的耐药率均较高；粪肠球菌对克林霉素、丁胺卡那霉素、复方新诺明、头孢唑啉的耐药率均较高。结论临床上应合理应用抗菌药物，并应加强细菌耐药性监测，以防止细菌耐药性的蔓延。

监测；细菌；耐药性；抗菌药物

当前微生物耐药问题已经成为一个重大的公共卫生问题[1]，由于耐药性的存在，当人们遭受微生物感染时，所能选择的药物越来越少，盲目用药的概率不断上升，患者病情被延误，感染率和病死率逐渐升高[2]，医疗费用日益攀升。目前重要的致病微生物大多存在严重的耐药问题[3-7]，并且耐药性改变逐渐加快，有时微生物仅仅需要在几个小时甚至几十分钟内发生单个碱基的变化就可对一种新药产生耐药性，而人类开发一种新药往往要投资数亿美元，从研发到临床应用要耗时10～15年时间。所以耐药问题的严重程度可见一斑。本文探讨我院2012年收集的常见临床标本细菌构成和耐药监测结果，报道如下。

1 资料与方法

1.1 菌株来源：2012年分离的非重复的各种细菌1868株，719株分离自呼吸道、516株分离自血液、339株分离自伤口、294株分离自泌尿道。

1.2 药敏试验

1.2.1 试验原理及方法：①原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分，溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测试药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系。②操作步骤：用无菌棉拭子蘸取制备好的菌液接种物，并在液面上的管壁内轻轻旋转挤压，将多余的菌液挤出，分3次均匀涂布在M-H培养基表面，每次旋转平皿60°，使细菌分布均匀，最后用棉拭子绕平皿边缘旋转两周。盖上平皿在室温干燥几分钟后，以无菌镊子夹取药敏纸片平贴于M-H培养基上。贴药敏纸片要求纸片间距不小于24 mm，纸片中心距平皿边缘不小于15 mm。贴好药敏纸片的平皿加盖后于室温干燥至少3 min，但15 min内必须放入35 ℃培养箱中。16～24 h后检查平皿。

1.2.2 结果判断和报告：用精确度为10 mm的游标尺量取抑菌圈直径，抑菌圈的边缘应是无明显细菌生长的区域，根据NCCLS/CLSI标准，对量取的抑菌圈直径做出耐药判断。

2 结 果

2.1 细菌分布：2012年我院共收集1868株非重复菌株，在前6位中大肠埃希菌最多，达到17.2%，铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌次之，分别为11.4%及8.5%，金黄色葡萄球菌中89%为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，鲍曼不动杆菌及粪肠球菌最少，均为4.6%。

2.2 耐药率检测：大肠埃希菌对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林、氨苄西林、头孢哌酮、头孢曲松、氨曲南的耐药率均较高，分别为88.1%、79.6%、79.3%、77.6%、75.3%、71.8%；对头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟耐药率较低，分别为22.1%、15.6%、3.3%。铜绿假单胞菌对哌拉西林、头孢曲松、头孢哌酮的耐药率均较高，分别为51.4%、47.2%、44.6%，对头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、左氧氟沙星耐药率较低，分别为17.2%、20.2%、20.9%、22.9%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对左氧氟沙星、庆大霉素、克林霉素、亚胺培南、四环素、红霉素、β2内酰胺类等抗菌药物的耐药率均较高，分别为83.5%、99.9%、93.1%、75.2%、91.8%、75.4%、91.7%，对其他受试药的耐药率均较低，不足10%。鲍曼不动杆菌对头孢他啶、头孢曲松、妥布霉素、庆大霉素、头孢替坦、头孢唑林、氨苄西林的耐药率均较高，分别为99.8%、99.3%、100%、99.6%、95.1%、96.8%、95.2%，对替加环素的耐药率较低，不足10%。粪肠球菌对克林霉素、丁胺卡那霉素、复方新诺明、头孢唑啉的耐药率均较高，分别为99.8%、96.3%、94.8%、93.1%，对替考拉宁、万古霉素耐药率均较低，不足10%。

3 讨 论

临床上抗菌药物的不合理应用，既表现在预防性用药过程，也表现在治疗性应用过程。无指征用药以及用药品种、剂量、给药途径、给药次数及疗程选择不当都可诱导耐药微生物的产生。无指征的预防性用药和治疗性用药是抗生素滥用的重要表现[8]。据统计，国内住院患者使用抗生素的比例在80%左右，而西方国家只有30%。即使如此，美国专家估计美国的50%的抗生素处方是不必要的和错误的。过多的联合用药和过多的使用广谱抗菌药物是抗生素滥用的又一重要表现[9]。有部分人认为这样做可以方便快捷的杀灭致病微生物，却导致多重耐药微生物和耐广谱药物的微生物出现，且容易引起菌群失调。过低的剂量、过短的疗程和过少的给药次数可能没有消灭致病微生物，反而提高了它们对药物的适应能力，并可能诱导微生物产生更多的毒性物质。过长的疗程可能给耐药微生物以足够的发展时间和空间，使它们进而成为优势菌群。

本文回顾性分析2012年分离的非重复的各种细菌1868株的检测结果发现，2012年我院共收集1868株非重复菌株，在前几位中大肠埃希菌最多，铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌次之，鲍曼不动杆菌及粪肠球菌最少。统计各类细菌对抗菌药物的耐药率发现，大肠埃希菌对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林、氨苄西林、头孢哌酮、头孢曲松、氨曲南的耐药率均较高，对头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟耐药率较低。可见，大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类及氨曲南耐药。因此，只能用头霉素、碳青霉烯类和氨基糖苷类治疗，给临床治疗带来很大困难。本组数据显示，铜绿假单胞菌对头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林的耐药率均较高；与其他革兰阴性菌比较，这种细菌的外膜通透性很低[10]，又很易发生基因转移，因此会对多种抗生素均表现出耐药性[11-13]，其临床治疗十分困难，病死率较高。WHO把该菌和粪肠球菌及结核杆菌并列为威胁人类生命的3种细菌[14]。本组数据显示，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对β2内酰胺类、红霉素、四环素、亚胺培南、克林霉素、庆大霉素、左氧氟沙星等抗菌药物的耐药率均较高，因此这种细菌只能用万古霉素治疗。另外，本组数据中鲍曼不动杆菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢替坦、庆大霉素、妥布霉素、头孢曲松、头孢他啶耐药率均较高；临床治疗可首选舒普深、亚胺培南；粪肠球菌对头孢唑啉、复方新诺明、丁胺卡那霉素、克林霉素耐药率均较高，据报道，粪肠球菌多重耐药显著，一般对糖肽类和利奈唑胺十分敏感。

本组监测报告提示，我院常见临床标本细菌耐药情况较严重，能否合理选用抗菌药物是一关键影响因素，应对微生物耐药性我们认为可以采取三个策略：①加强抗生素的管理，尽可能减少耐药微生物的产生：人类要想改变当前的耐药发展趋势，首要的问题就是加强抗感染药物，特别是抗菌药物的使用管理，当前最迫切的是加强抗菌药物在医疗过程中的合理应用，为延缓耐药微生物的产生，临床工作中应做到：能不用抗菌药物的疾病尽量不用，杜绝不必要的治疗性用药和预防性用药。目前抗菌药物仅适合于细菌、真菌、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体及部分原虫的感染，缺乏相应证据不宜使用抗菌药物；根据耐药性试验，能用窄谱抗菌药物的就不用广谱抗菌药，单一药物有效的就不联合用药；严格掌握适应证，确定合适的剂量、给药途径和用药次数、尽量减少长期用药；尽量避免局部用药，因为皮肤黏膜很难吸收抗菌药物，反而容易引起耐药性的产生和超敏反应。②切断耐药微生物的传播途径：耐药微生物的传播途径与相应的原始微生物相同，可通过呼吸道、消化道、血液、接触等方式在人、畜、病房、医院、社区和国家之间广泛传播。在院内感染中，患者之间最常见的传播途径是被污染的医务人员的手，这提示我们应重视基本控制措施的落实。③研究耐药微生物感染的治疗方法，开发新的药物：治疗耐药微生物感染一般从三方面入手，即强化剂量、联合用药和开发新的药品。

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1671-8194（2014）29-0087-02