中医药干预易损斑块的实验研究进展*

熊兰月 孙 胜 李明秀 邹景霞 邹世海 陈学忠，△

（1．成都中医药大学，四川 成都 610072；2．四川省第二中医医院，四川 成都 610031）

中医药干预易损斑块的实验研究进展*

熊兰月1孙 胜1李明秀2邹景霞2邹世海1陈学忠1，2△

（1．成都中医药大学，四川 成都 610072；2．四川省第二中医医院，四川 成都 610031）

动脉粥样硬化 易损斑块 中医药 实验研究

近年来，易损斑块这一概念逐渐被学者们认可并接受，用以描述具有血栓形成倾向或极有可能快速进展成为“罪犯斑块”的动脉粥样硬化（AS）斑块。相比稳定斑块，这类斑块更易导致急性心脑血管事件。中医药对斑块的干预、治疗有独特的优势，近年来在该方面的实验研究也越来越多。笔者总结了近8年来中医药干预易损斑块的动物实验研究进展，现综述如下。

1 认识易损斑块

易损斑块的组织学特点有以下几点。（1）具有偏心性的、相对大且质软的脂质核心。（2）斑块内有大量炎性细胞聚集（单核细胞、巨噬细胞，部分还有T细胞）。（3）纤维帽薄（平滑肌和胶原纤维少）且外形不规则。（4）斑块内有大量新生血管［1］。影响斑块稳定性的因素有以下几点。（1）内皮细胞功能不良。（2）斑块内蛋白酶活性升高。（3）粥样斑块内细胞凋亡。（4）斑块内新生血管增多［1］。另外，近年来，关于血清学标记物的研究也增多，因其可以用来早期发现斑块，其水平的变化也预示着斑块易损性得到改善的程度。杜燕宾等总结的血清学炎症标记物，包括C反应蛋白（CRP）、白细胞介素（IL）、可溶性CD40（sCD40）、黏附分子（CAMs）、氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）、基质金属蛋白酶系列（MMPs）、过氧化物酶体增殖物激活受体-C（PPAR-C）、核因子-κB（NF-κB）、妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）、脂蛋白相关的磷脂酶A2（Lp-PLA2）等。另外，高敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、髓过氧化物酶（MPO）、血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1（sLOX-1）、可溶性CD40配体（sCD40L）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）等亦可作为血清学标记物。但其敏感性和特异性有待进一步的验证［2］。

2 中医药干预易损斑块的实验研究

2.1 中药复方或成方制剂干预易损斑块的实验研究通心络胶囊（成分为人参、水蛭、全蝎）是在中医脉络理论指导下的中药复方制剂。多项研究表明通心络胶囊可稳定易损斑块并呈剂量依赖性。张运认为通心络胶囊稳定易损斑块分子的机制有降低胆固醇，抗炎，增加胶原合成，抑制细胞外基质的降解及抗氧化应激等［3］。吴辉等通过球囊损伤加高脂饲料法建立实验兔AS易损斑块模型，研究发现解毒活血方（黄连、栀子、黄柏、黄芩、川芎、赤芍、丹参、红花、降香）能够降低易损斑块内及血清TNF-α、炎症因子人ICAM-1的表达，尤其对易损斑块底部和肩部的炎症反应作用明显［4］。吴同启等先通过高脂喂养加球囊损伤及外源性p53基因转染法建立起稳定的AS斑块模型，然后使用中国斑点蝰蛇毒和组胺进行药物触发，成功建立起家兔AS易损斑块的动物模型，研究发现宁心痛颗粒（成分为黄芪、川芎、葛根、毛冬青、细辛）能够稳定易损斑块，其机制可能为调节脂质代谢、影响炎性介质的表达，抑制血管平滑肌细胞凋亡，从而降低斑块IMT，增加FCT及FCT/IMT值［5］。姜希娟等研究发现补阳还五汤可以改善易损斑块模型家兔心肝组织的细胞水肿，但其具体机制尚待进一步的研究［6］。初少光等以球囊损伤家兔颈总动脉结合高脂饮食喂养配合转染重组人p53腺病毒载体制备易损斑块模型，研究表明养心颗粒（由古方养心汤加减化裁而来）可显著降低模型兔血清白细胞介素-18（IL-18）含量，缓解内皮损伤引起的炎症反应。养心颗粒还可能存在降低血清CRP含量、降低血浆巨噬细胞游走抑制因子（MIF）的水平、升高载脂蛋白M含量、升高血清CYP7A1含量、降低MMP-9表达水平等机制［7］。刘振伟等采用雄性SD大鼠进行平滑肌细胞的原代培养，并通过高脂饲养加液氮冻伤法复制家兔颈动脉易损斑块模型，观察到消斑固斑片（成分为余甘子、神曲、山楂、丹参、荷叶）可降低实验兔血清 TC、TG、LDL-C，升高HDL-C，也可降低TNF-α诱导的平滑肌细胞ICAM-1水平及其蛋白表达［8］。金荣以ApoE基因敲除小鼠（ApoE-/-小鼠）建模，观察到四妙勇安汤因剂量不同而稳斑效应各异：小剂量四妙勇安汤减少脂核面积、增加胶原含量，但大剂量四妙勇安汤则以形成纤维斑块为主，其具体机制有待深入研究［9］。彭立等通过高脂饮食加免疫损伤加球囊拉伤的方法建立了兔AS易损斑块模型进行研究，发现四妙勇安汤组在减轻主动脉粥样硬化损伤的程度上与辛伐他汀组相当，而且在增加斑块纤维帽厚度和肌动蛋白含量以及减少脂质核心和抑制MMP-9表达的方面，四妙勇安汤组优于辛伐他汀组［10］。许颖智等发现四妙勇安汤亦可以通过抑制斑块内血管新生来稳定AS斑块［11］。姜希娟等的研究显示心脑血脉宁（生黄芪、当归、川芎、赤芍、水蛭）可以调节血脂、抑制炎症反应，还可以有效降低易损斑块内血肿的发病率，促进新生血管成熟［12-13］。阎露观察到脉平片（成分为银杏叶提取物、维生素C、芦丁、何首乌、当归）能增加家兔AS模型斑块声学密度，提高斑块稳定性［14］。王建辉等以高脂、高蛋氨酸喂养加颈总动脉球囊拉伤术造模，观察到痰瘀同治方（川芎、栀子、山楂、红曲）通过调节MMP-9与TIMP-1的比值稳定大鼠颈总动脉粥样硬化易损斑块［15］。占程燕等使用ApoE-/-小鼠建模，从细胞凋亡的角度进行实验研究，发现补肾化瘀方（组成：女贞子、何首乌、丹参、赤苏、石菖蒲、远志、漏芦）可减小脂质核面积，增加纤维帽的厚度，从而降低AS斑块易损性［16］。孙丽华等采用空气干燥术加高胆固醇饲喂的方法建立了家兔易损斑块模型，观察到舒心饮（黄芪、党参、麦冬、地黄、枸杞、桑寄生、葛根）对模型斑块的病理形态、血脂、颈动脉斑块组织内NF-κB和VCAM-1mRNA的表达都有改善［17］。艾颖娜等采用高脂饲喂加腹腔注射维生素D的方法建立Wistar大鼠易损斑块模型，发现扶正解毒化瘀宣痹方（黄芪、黄连、泽泻、薤白等）对大鼠血清中MMP-1的含量无明显影响，但能明显升高血清中TIMP-1的含量，可能以此稳定斑块［18］。赵玉霞等采用复合方法建立兔易损斑块模型，应用血管内超声技术定性、定量判断斑块易损性，实验发现祛瘀消斑胶囊（黄芪、莪术、大黄、山楂、片姜黄）干预组较斑块自然消退组的TC和LDL-C水平显著降低，血管外弹力膜面积、斑块面积及管腔面积狭窄百分率也显著降低［19］。刘艳等观察到脑心通胶囊可以调节基质金属蛋白酶及其抑制剂在斑块内的表达［20］。路永刚等观察到通脉益智胶囊（女贞子、何首乌、丹参、赤芍、石菖蒲、远志）可显著降低AS易损斑块的面积、增加AS易损斑块胶原组织的含量，进而达到稳定AS斑块的作用［21］。姜浩发现脉心康胶囊（人参皂苷、银杏叶提取物、茶多酚、经超微粉碎的降脂红曲）可以降低巨噬细胞内胆固醇和胆固醇酯的含量，抑制巨噬细胞释放TNFα、白介素-1β（IL-1β），达到抗炎、降低巨噬细胞趋化性、抗细胞泡沫化的作用，进而保护动脉、抗AS及稳定易损斑块［22］。王建辉采用SD大鼠成功建立了颈总动脉AS易损斑块模型，观察到化痰祛瘀解毒方（人参、桂枝、丹参、川芎、山楂、泽泻、红曲、黄连、栀子）可能通过调节脂代谢、降低血浆Hcy浓度、调节MMP-9/TIMP-1的比值来稳定易损斑块［23］。

2.2 单味药或中药提取物干预易损斑块的实验研究徐卫亭等以家兔建立易损斑块模型，研究发现小檗碱可以降低血TC、TG、LDL水平，进而减少斑块破裂及血栓形成［24］。周明学等采用ApoE-/-小鼠建模，发现在临床推荐剂量下，黄连提取物可明显减少小鼠主动脉粥样斑块破裂的次数，而且还可以显著改善小鼠AS斑块内胶原类型，调整MMP-9与TIMP-1比值，以此促进斑块稳定［25］。盛小刚等以ApoE基因缺陷小鼠成功制作AS不稳定斑块模型，观察到穿心莲、黄芩、知母、牡丹皮、青蒿等5种清热代表药可降低血脂、hs-CRP水平，干预小鼠AS斑块的形态结构［26］。文川等观察到丹参、赤芍、川芎、三七、酒大黄、桃仁等6种活血化瘀中药可以影响ApoE-/-小鼠AS斑块胶原沉积及代谢，但与其活血化瘀的活性强弱并无明显相关［27］。郑广娟等采用ApoE-/-小鼠建模，观察到虎杖、山楂均能改善小鼠主动脉病变情况，NF-κB、hs-CRP的表达水平明显降低，其中以虎杖和山楂配伍效果更显著［28］。张京春等的多项研究观察到解毒活血中药配伍组（虎杖提取物、芎芍胶囊）可降低ApoE-/-小鼠主动脉NF-κB和MMP-9的表达，还可以降低血清hs-CRP、血清CD40L的水平，且优于单纯解毒组（虎杖提取物）和单纯活血组（芎芍胶囊，由赤芍总苷和川芎总酚组成）［29］。张璐采用家兔复制AS易损斑块模型，发现芎芍胶囊还可能通过抑制斑块内血管新生达到稳定易损斑块的作用［30］。周明学等［31］研究认为在临床推荐剂量下，三七总皂苷、黄连提取物、虎杖提取物、大黄醇提物均可通过改善斑块成分、降低易损指数来稳定易损斑块，其中，活血和解毒作用兼具的虎杖提取物和大黄醇提物效果最为明显。周明学等［32］采用相同的实验方法对血竭提取物进行了研究，发现血竭提取物亦有稳定易损斑块的作用，其机制可能与调节血脂、抑制清道夫受体CD36的表达有关。在另一个实验中，周明学等［33］还观察到活血组（丹参酮）、益气组（予西洋参茎叶总皂苷）、化痰组（予瓜蒌提取物）等各组中药亦可以改善斑块内部成分。

3 问题及展望

实验研究表明，中医药稳定易损斑块有显著的疗效，而且中医药对易损斑块的干预是多途径、多环节、多靶点的，而非单一的机制。实验动物多采用家兔或ApoE-/-小鼠，也有部分实验使用大鼠，一般通过复合方法建立动物模型，以高脂饮食为基础，加用内皮损伤、免疫损伤、空气干燥术等方法，或配合药物触发斑块易损，成功建立了易损斑块动物模型。但在目前的实验研究中，虽然成功建立了易损斑块动物模型，但方案设计的合理性有待商榷，重复性实验多，且忽略了中医证候的设计，病症分离，不能很好的促进临床应用。完善斑块易损性评价体系，病证结合，完善实验的合理性，中医药对易损斑块的干预研究还需要大量的工作。

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R285.5

A

1004-745X（2014）03-0483-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.03.045

2013-10-24）

四川省科技支撑计划项目（11-2-303）

△通信作者