徐 艳
(长春市中心医院,吉林 长春130051)
贫血患者95例网织红细胞血红蛋白含量的分析
徐 艳
(长春市中心医院,吉林 长春130051)
目的观察贫血患者的网织红细胞血红蛋白含量分析,并用于指导临床治疗。方法回顾95例贫血患者的临床资料,与95例同质健康患者状况进行对比分析。结果缺铁性贫血患者的Ret-He低于正常健康人及其余两组,差异显著均有统计学意义;而地中海贫血患者和肾性贫血患者与正常健康人相比无统计学意义。结论Ret-He在贫血的鉴别和诊断中有重要的应用价值,值得临床推广。
贫血;网织红细胞;血红蛋白;含量分析
网织红细胞(reticulocyte,Rtc),是指晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞的过渡细胞,是反映骨髓红细胞造血功能和判断贫血疗效的重要指标,是机体铁状态的实时反映,对血液病的诊断和治疗具有重要意义。正常情况下,网织红细胞血红蛋白含量在整个生命周期中比较恒定,但是如果铁元素缺乏或者铁元素利用障碍等,会导致血红蛋白生成减少,导致Ret-He值降低,且不受炎性反应的影响[1]。缺铁性贫血与恶性肿瘤、炎症和感染等密切相关,临床可以采用检测外周血Ret-He来对贫血患者进行诊断,收到较好的效果,现报道如下。
1.1 一般资料
选取2011年1月至2013年1月我院收治的贫血患者95例作为对照组,所有患者均于清晨空腹抽静脉血,进行血液学、骨髓铁染色等各项试验指标的检查,其中男52例,女43例,年龄27~78岁,平均年龄48岁,病程0.75~7.5年,贫血种类包括:34例地中海贫血患者,确诊方法为血红蛋白电泳出现异常;29例缺铁性贫血患者,确诊方法为血清铁蛋白<14 μg/L,且血清转铁蛋白受体<15%;32例肾病性贫血患者,确诊方法为有肾功能出现异常,有肾病病史,且促红细胞生成素降低。选择同期在我院体检且体检全血细胞计数正常的95例健康成人作为对照组,其中男53例,女42例,年龄25~77岁,平均年龄46岁。两组患者在性别、年龄、文化水平等方面无显著性差异,具有可比性。
1.2 试剂、仪器与样本采集[2]
检测血清铁蛋白(serum ferritin,SF)采用AXSYM全自动免疫分析仪(西门子公司,德国),试剂为原装试剂,检测各项血液学参数采用Sysmex XT-4000全自动血细胞分析仪(雅培公司,美国),各种试剂和配套全血质控物也来自雅培公司。样本采集:采集治疗组与对照组患者的新鲜静脉血各2 mL,采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)进行抗凝处理,将新鲜抗凝全血用于血常规、骨髓铁染色等各项检测分析,同时再采集2 mL静脉血进行离心,将血清分离后置于-20 ℃保存备用,注意各项检测均在2 h内完成。
1.3 检测方法
采用散射比浊法和放射免疫双抗体法测定SF和sTfR;采用全自动血细胞分析仪检测网织红细胞含量和Ret-He等;采用全自动高效液相层析法分析仪定量测定Hb;采用免疫荧光染色法,通过计算获得Ret-He的结果。由于在反映网织红细胞成熟阶段的二维显示散点图上红细胞和网织红细胞分别对应不同分区的FSC,所以要找到Ret对应的Ret-y,并且利用公式进行计算,最终得到Ret-He的结果,计算公式为Ret-He:Ret-He=[5.5569@exp(0. 001@Ret-y)]。
1.4 统计学处理
观察记录并比较两组所得到的数据,对其进行卡方检验,然后采用SPSS11.0软件来完成对数据的统计与处理。最终得P<0.05,即经统计学处理后其差异具有显著性,故具有统计学意义。
2.1 确定正常参考值。经过多组检验分析,Ret-He无性别差异和年龄差异,本研究选取了对照组95例同质健康成人,可以排除影响研究指标Ret-He的疾病和其他相关因素,根据医学参考值的定义制定了Ret-He的正常参考值范围。根据百分位数法(95%)进行计算,最终确定Ret-He的正常参考值范围为27.83~36.31 pg。
2.2 稳定性评估。选取低值23.5 pg、高值36.7 pg的两份标本进行稳定性考察,在低温保存后于相应时间点重复检测标本并观察其稳定性。结果显示,高值在初次测定48 h后略有上升,但变化的差异百分率仅为0.5%;低值在初次测定48 h后略有降低,但变化的差异百分率仅为0.4%。两组数据变化趋势都不显著,稳定性良好,所以低温保存两天内Ret-He的测定值均保持稳定。
2.3 网织红细胞血红蛋白含量对缺铁性贫血的诊断价值。将各类常见贫血患者的Ret-He与对照组进行比较分析,正常人为30.05pg,缺铁性贫血患者为23.86pg,该组Ret-He低于正常健康人及其余两组,P<0.001,差异显著均有统计学意义;肾性贫血患者为31.34pg,该组Ret-He与正常健康人相比,P>0.1,无统计学意义;地中海贫血患者为29.79 pg,该组Ret-He与正常健康人相比,P>0.5,无统计学意义。
网织红细胞血红蛋白含量是全自动血液分析仪提供的一个报告参数,在<25 pg时是诊断IDA的最佳界值。网织红细胞的胞质内残存尚未完全排出的核糖核酸等嗜碱性物质,若用染料进行活体染色会被凝聚沉淀并着色,颗粒间形成网状结构,故称为网织红细胞。网织红细胞检测原理是染料可以与网织红细胞内的RNA结合,通过测量反应胞质内RNA含量和细胞体积大小可以组成一个反映网织红细胞成熟阶段的二维显示散点图,在该图中若为成熟红细胞,则荧光极少或没有,若为幼稚网织红细胞,则荧光越强。随着检验医学的不断发展和完善,采用网织红细胞来评价骨髓造血功能也为临床提供了更加丰富的诊断信息,给临床监测和治疗带来了新的研究方向,有着广阔的应用前景,值得临床推广。
[1] 高绍华.网织红细胞血红蛋白含量在铁缺乏疾病诊断中的应用价值[J].中华使用诊断与治疗杂志,2011,23(10):1037-1039.
[2] 柯宗明.贫血患者120例网织红细胞血红蛋白含量分析[J].临床和实验医学杂志,2010,9(19):1481-1483.
R556
B
1671-8194(2014)21-0239-01